董晓琳
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 冻干马抗H7N9精制抗体F(ab′)2的急性毒性和溶血性试验
- 【目的】冻干马抗H7N9精制抗体F(ab’)是H7N9禽流感治疗性中和抗体,为评价其临床用药的安全性,进行了小鼠急性毒性试验和对兔红细胞的溶血性试验。【方法】冻干马抗H7N9精制抗体F(ab’)单次腹腔注射分别给予昆明种...
- 吴永魁李乾学董晓琳赵永坤
- 关键词：急性毒性溶血性
- 文献传递
- 狂犬病病毒G蛋白昆虫细胞表达及其生物信息学分析
- 2016年
- 利用RT-PCR方法从SRV9株细胞毒基因组RNA扩增G蛋白基因,然后将其克隆到p MD18-T载体上,将得到的重组克隆质粒SRV9G-p MD18T进行PCR和测序鉴定。结果表明:克隆的基因全长为1 609 bp,阅读框正确;将此SRV9株G基因亚克隆到供体质粒p Fast Bac Dual后获得了重组供体质粒SRV9G-p Fast Bac Dual;进而将重组供体质粒转化DH10Bac感受态细胞,经2次抗性、蓝白斑筛选及PCR分析后,获得重组穿梭质粒SRV9G-Bacmid;将其转染Sf9细胞48 h后,通过细胞形态学和重组杆状病毒负染电镜观察显示,杆状病毒转染成功;通过Western blot检测显示,Sf9细胞成功表达了SRV9 G蛋白。随后,利用Ex PASy服务器上的在线分析工具和生物信息学分析软件DNAStar对G蛋白的基本性质进行了分析。试验采用昆虫细胞Bac-toBac杆状病毒表达系统,成功表达出G蛋白,并对其进行了生物信息学分析,为蛋白纯化及狂犬病诊断试剂盒的进一步研制奠定了基础。
- 王园园董晓琳孙钰李志萍靳朝夏志平
- 关键词：杆状病毒表达系统生物信息学分析
- 猪补体C5a蛋白表达、纯化和生物学活性检测
- 2016年
- 参照NCBI中公布的猪补体C5a蛋白氨基酸序列及猪C5蛋白的全基因序列,通过生物信息学分析获得猪C5a蛋白基因全长,为222 bp,该序列定向插入原核表达载体p ET-28a中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE和Western-blotting检测分析表明,C5a基因获得表达,重组蛋白大小为10 000。利用镍柱亲和层析进行蛋白纯化后,体外细胞试验测定重组C5a蛋白生物学活性。结果显示,成功构建了p ET-28a-C5a重组质粒,纯化获得目的蛋白纯度达到90%以上,质量浓度为2.5 g/L。细胞试验检测到C5a具有趋化和诱导中性粒细胞的活性。本研究为揭示猪C5a参与炎症过程的作用机制及制备C5a拮抗剂奠定了基础。
- 陈漫李志萍王习文王园园董晓琳高玮村李博李乾学夏志平
- 关键词：蛋白纯化活性检测
- 基于适配体识别的金黄色葡萄球菌流式细胞术检测方法的建立
- 【目的】金黄色葡萄球菌是重要的食源性致病菌之一,对金黄色葡萄球菌的快速检测是预防和控制细菌性食物中毒的有效手段。流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种集光学、电子学、免疫学等为一体的检测技术,可针对悬浮...
- 董晓琳吴永魁夏志平
- 关键词：流式细胞术金黄色葡萄球菌适配体
- 文献传递
- 犬细小病毒VP2基因的扩增、序列分析及其原核表达被引量：3
- 2016年
- 为了制备犬细小病毒（CPV）VP2蛋白抗原，试验采用PCR方法，以一例疑似CPV感染的出血性肠炎患犬粪便为样品对VP2基因进行扩增，并将该目的基因克隆到pMD18-T质粒上。进行EcoRI／HindⅢ双酶切鉴定及测序鉴定；对该基因进行序列分析后将VP2基因克隆到原核表达载体pET-32a上，并转化E．coliBL21（DE3），诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化、Western—blot试验验证其生物活性。结果表明：克隆的基因全长为1790bp；该基因序列与已报道的CPV基因序列同源性高达99．2％～99．9％，氨基酸同源性达99．0％～99．8％，为新CPV-2a基因亚型，其中与泰国株GQ379042．1亲缘性最高，仅1个碱基不同，与猫细小病毒同源性高达98．69％；获得了87ku的目的蛋白。说明该临床病例确为CPV感染。该株细小病毒VP2蛋白的成功表达可为吉林省CPV流行病学调查提供资料，可用于进一步的疫苗研究及免疫学方法的建立。
- 王园园张馨颖陈漫董晓琳孙钰孙瑞王习文李志萍曲晗焦虎平靳朝夏志平
- 关键词：同源性分析遗传进化树原核表达
- 野外便携式解剖器具盒
- 本实用新型提供一种野外便携式解剖器具盒，包括底座、竖直设于底座上的支架、设于支架顶端的上盒体、铰接设于上盒体上端开口的上盒盖，上盒体内设有多块平行竖直向下的隔板；底座两端分别铰接有左侧盖和右侧盖，左侧盖的内壁设有两端开口...
- 王习文钱军夏志平芦宏斌黄传伟张达李乾学李志萍董晓琳陈漫高玮村王圆圆李家宽
- 文献传递
- 液相适配体芯片在食源性致病菌检测中的应用被引量：1
- 2016年
- 食源性致病菌是引起食物中毒的重要因素,对食源性致病菌的快速和高通量检测是防止和诊断细菌性食物中毒的有效手段。液相芯片检测技术具有需样本量少、高通量等特点。经典液相芯片技术是以有机荧光染料编码的聚苯乙烯微球为载体,新型液相芯片技术是以物理学、光学等编码的基质为载体,通过制备不同配体功能化的载体,实现对同一液相环境中多种靶细菌的同时检测。适配体是一类相比蛋白类抗体特异性高、筛选获得快、化学稳定性强的核酸配体。论文针对核酸适配体分析鉴及以适配体为基础的新型液相芯片技术在食源性致病菌检测中的应用进行了综述。
- 董晓琳李志萍陈漫樊洪超王园园夏志平吴永魁
- 关键词：适配体液相芯片食源性致病菌
- 基于适配体的金黄色葡萄球菌流式细胞术检测方法被引量：8
- 2016年
- 本研究以金黄色葡萄球菌为对象,旨在建立一种基于荧光标记核酸适配体的流式细胞术检测方法。通过优化流式细胞仪检测参数、适配体用量及折叠方式,观察适配体针对不同方式处理细菌的识别效果建立检测方法,并对该方法的特异性和灵敏性进行了验证。结果显示:不经高温变性处理的适配体检测结果最佳,适配体最佳使用浓度为250 nmol/L,对活菌识别效果最强。本实验建立的基于适配体的流式细胞术检测方法特异性强、过程简单,40 min于混合细菌中特异性检测、鉴别靶细菌,为金黄色葡萄球菌的检测提供了一种有效方法。
- 董晓琳李志萍高玮村樊洪超王园园吴永魁夏志平
- 关键词：适配体流式细胞术金黄色葡萄球菌
- 适配体在人兽共患病治疗与生物学检测中的研究进展
- 2016年
- 适配体以其结合靶标高特异性和高亲和力的特点,在许多领域获得广泛应用。近年来,更是促进了人兽共患病领域的疾病诊断、治疗以及生物学检测方法的改革。现就适配体在人兽共患病治疗与生物学检测中的研究进展进行综述。
- 陈漫李志萍王习文董晓琳王园园高玮村李博李乾学夏志平
- 关键词：适配体人兽共患病生物学检测
- 大肠杆菌O157:H7新型液相蛋白芯片检测方法的建立
- 【目的】大肠杆菌O157:H7(E.coli O157:H7)引起的食物中毒是一种常见的动物食源性疾病。液相蛋白芯片技术主要是通过单抗和多抗的夹心ELISA或者竞争ELISA方法以实现对目标分子的检测,实验过程(以夹心E...
- 董晓琳夏志平吴永魁樊宏超
- 关键词：大肠杆菌O157:H7液相蛋白芯片
- 文献传递
