吕秀玮
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去甲斑蝥素对裸鼠结肠癌移植瘤血管生成的影响及其机制被引量：10
- 2013年
- 目的观察去甲斑蝥素(NCTD)对人结肠癌裸鼠移植瘤血管生成及瘤体血管内皮细胞生长因子(VEGF)、内皮细胞钙黏蛋白(VE-Cd)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,以探讨NCTD影响血管生成的可能机制。方法裸鼠皮下移植人结肠癌细胞(HCT116)瘤块建立人结肠癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组,NCTD高、中、低剂量组和氟尿嘧啶(5-Fu)组。分别腹腔注射生理盐水、NCTD 8、5、2mg/kg和5-FU 20mg/kg,每周2次,连续给药3周。给药结束后剥取瘤体并称重,常规石蜡包埋、制片,采用免疫组化法分析瘤体内微血管密度(MVD)以及VEGF、VE-Cd、MMP-2等促血管生成因子的表达水平。结果与模型组相比,经NCTD干预的荷瘤裸鼠生长状态基本不受影响,但瘤体生长受到抑制,瘤内微血管密度降低,VEGF、VE-Cd、MMP-2蛋白表达减少,且此效应随剂量增大而增强。结论 NCTD在不影响荷瘤裸鼠生长状态的前提下,对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长和瘤内微血管的形成具有抑制作用,其机制跟下调VEGF、VE-Cd、MMP-2等促血管生成因子的表达有关。
- 袁昌劲余涛侯风刚李丹刘礼吕秀玮任丽
- 关键词：去甲斑蝥素结肠癌血管生成基质金属蛋白酶2
- 薏苡仁油对HCT116细胞血管生成拟态形成的影响及机制被引量：5
- 2016年
- 目的观察薏苡仁油(CLSO)对人结肠癌HCT116细胞血管生成拟态形成能力的影响,并观察CLSO对细胞迁移能力和迁移诱导蛋白-7(Mig-7)表达水平的影响,藉此探讨CLSO影响血管生成拟态形成的可能机制。方法 MTT法检测CLSO对HCT116的无毒浓度(增殖抑制率<10%时的浓度),选取无毒浓度以下不同浓度的CLSO作用于三维培养的HCT116细胞,观察其对HCT116细胞形成血管生成拟态的影响;并用划痕实验观察各组细胞的迁移能力,蛋白印迹法检测各组中Mig-7蛋白的表达水平。结果体外三维培养环境下,经CLSO作用的HCT116细胞形成血管生成拟态的结构比对照组减少。划痕实验中对照组、CLSO 5和10μL/mL浓度组的平均迁移距离依次缩小,迁移率分别为17.07%、9.19%、2.10%,2个实验组和对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白印迹法检测显示经不同浓度CLSO作用于HCT116细胞后实验组条带灰度值/内参条带灰度值的比值比对照组小,Mig-7蛋白表达受到抑制,其中10μL/mL浓度组的抑制作用比5μL/mL组更明显,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论CLSO体外对HCT116形成血管生成拟态的能力存在抑制,其机制可能与下调Mig-7蛋白表达,从而影响细胞的迁移能力有关。
- 余涛刘礼吕秀玮贺文煜袁昌劲
- 关键词：薏苡仁油结肠癌血管生成拟态细胞迁移
- 端粒结合蛋白CTC1提高人乳腺癌细胞放射抗性的潜在作用机制
- 2018年
- 目的探讨端粒结合蛋白CTC1提高人乳腺癌细胞放射抗性的潜在作用机制。方法以单纯转染试剂的细胞作为空白对照(Mock组),siNC转染细胞作为阴性对照(siNC组),siCTC1#3转染细胞作为实验组(siCTC1#3组)。MDA-MB-435/MDA-MB-435R细胞分别以3×105个细胞浓度接种于铺有细胞爬片的6孔细胞培养皿中,待6 h左右细胞贴壁后,将细胞分为未处理组(untreated组)、单纯射线照射组(IR组)、siCTC1#3干扰组和射线照射联合siCTC1#3干扰组(IR+siCTC1#3组)。将siRNA(siCTC1#3和siNC)利用脂质体转染至MDA-MB-435/MDA-MB-435R细胞48 h后CCK8试剂盒检测细胞增殖及细胞毒性;台盼蓝染色测定细胞增殖动力学;Real time PCR检测细胞相对端粒长度;免疫荧光检测细胞的DNA损伤修复能力及CTC1蛋白与γH2AX的共定位情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况;检测细胞Caspase-3的活性以明确细胞早期凋亡事件的触发情况。结果 siCTC1#3组与siNC组、Mock组增殖能力、相对端粒长度相比,差异有统计学意义(P<0.05);siCTC1#3组并没有明显引起细胞周期时相的改变(P>0.05);MDAMB-435R细胞与MDA-MB-435细胞相比,对数生长期的增殖速度、相对端粒长度、γH2AX焦点的数量差异有统计学意义(P<0.05);IR+siCTC1#3组与IR组相比,γH2AX的数量、细胞凋亡率、坏死率差异有统计学意义(P<0.05);在转染后24 h,MDA-MB-435和MDA-MB-435R细胞中siCTC1#3组Caspase-3的活性分别为相应Mock组的(4.36±0.53)倍和(3.21±0.24)倍(P<0.01)。结论端粒结合蛋白CTC1提高人乳腺癌细胞放射抗性的机制与该蛋白促进肿瘤细胞增殖、促进DNA损伤修复、抑制端粒缩短和抗细胞凋亡有关,而与调节细胞周期进程无关。
- 刘礼袁昌劲余涛吕秀玮刘娇萍赖晓晶贺文煜
- 关键词：细胞凋亡端粒细胞周期DNA损伤修复
