曹鹏程
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：山西省生物研究所更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 重组TRAIL_((114-281))片段的表达纯化及抗肿瘤活性分析被引量：1
- 2018年
- 本文主要探讨人TRIAL_((114-281))对肠癌和肺癌细胞增殖的影响.利用大肠杆菌原核分泌表达TRAIL_((114-281))片段,Ni-NTA亲和层析柱对表达蛋白进行纯化,纯化的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定,通过CCK-8实验检测TRAIL片段对SW480、DLD1、A549肿瘤细胞增殖的影响.实验结果显示经SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化的蛋白为目的蛋白His-TRAIL_((114-281)),且纯度在90%以上.CCK-8结果显示,在一定浓度下,TRAIL_((114-281))片段能明显抑制SW480、DLD1、A549肿瘤细胞的增殖,抑制率呈浓度依赖性,且对各细胞的抑制作用效果不同.本研究证实TRIAL_((114-281))片段在抗肠癌及非小细胞肺癌细胞方面具有一定的应用前景.
- 赵亚蕊曹鹏程赵峰梅潘薇薇张全爱董华赵邑
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白纯化肿瘤
- 一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用
- 本发明属生物制药技术领域，目的是提供一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，提供该化合物在制备靶向抑制自分泌运动因子活性的药物中的用途，制备治疗和预防由溶血磷脂酸和自分泌运动因子升高引起的疾病或病症的药物中的用途，制...
- 赵邑李荣宝赵峰梅赵亚蕊孙勇潘薇薇梁雅丽王伟霞张全爱曹鹏程
- Autotaxin在sf9昆虫细胞的表达及纯化研究被引量：1
- 2017年
- 目的 通过sf9昆虫细胞表达人Autotaxin（ATX）,获得具有生物学活性的目的蛋白。方法 采用TRIzol法提取人的黑色素瘤细胞总RNA,通过RT-PCR获得人ATX基因,构建p Fast BacTMHTA-ATX,Bacmid-ATX重组质粒,脂质体转染sf9昆虫细胞,收获重组ATX病毒;重组病毒侵染sf9昆虫细胞表达人ATX;通过His TrapTMHP和Hi Load 16/600 Superdex 200pg柱两部纯化获得目的蛋白并测定其磷脂酶D（lysophospholipase D,lyso PLD）活性。结果 用Bam H I和Xho I双酶切鉴定PCR产物及重组载体的正确性,重组病毒能够侵染sf9细胞表达人ATX,柱层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳纯度95%以上,每升表达液可得到纯化蛋白6mg,其明显具有溶血磷脂酶D（lysophospholipase D,lyso PLD）活性。结论 通过Bac-to-Bac表达系统构建的重组病毒杆粒能够感染sf9昆虫细胞,并正确表达具有生物学活性的人ATX,为开展ATX结晶与结构分析研究提供材料,为开发高效的ATX小分子药物抑制剂提供帮助。
- 赵峰梅潘薇薇曹鹏程赵亚蕊何永吉赵邑
- 关键词：自分泌运动因子
- 具有抗凝活性抗人组织因子单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的制备并鉴定具有抗凝血活性的抗人组织因子(h TF)单克隆抗体(m Ab)。方法以截短型重组h TF243蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后,采用间接ELISA联合血浆凝血酶原时间(PT)测定方法,筛选具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定。结果成功建立1株可稳定分泌具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,该m Ab属于Ig G1亚型。间接ELISA测定腹水效价为1∶200 000,Western blot、PT测定结果表明,该m Ab可特异性结合重组h TF243,同时与SW620结肠癌细胞表面天然TF作用,显著延长血浆凝血酶原时间,具有良好的抗凝血活性。结论成功制备了具有抗凝血活性的抗h TF m Ab。
- 陈尧王兴华何永吉潘薇薇曹鹏程赵峰梅张全爱赵邑
- 关键词：单克隆抗体抗凝血活性杂交瘤技术
- Autotaxin蛋白修饰性位点的生物信息学预测被引量：2
- 2017年
- Autotaxin在肿瘤细胞中对肿瘤的发生和发展起着重要作用,其抑制剂的开发可能为治疗肿瘤提供方法。Autotaxin蛋白的修饰性位点研究可为抑制剂开发提供理论基础。本研究利用6款生物信息学软件对该蛋白的磷酸化位点进行了预测,共有17个位点被重复预测到;并用4款软件进行了糖基化位点预测,共有4个位点被重复预测到,为下一步实验验证奠定了基础。
- 曹睿赵邑潘薇薇曹鹏程梁雅丽谢海军
- 关键词：AUTOTAXIN生物信息学磷酸化位点
- 人自分泌运动因子哺乳细胞表达纯化及酶学特性被引量：1
- 2017年
- [目的]利用哺乳细胞表达系统表达人ATX蛋白,并对其进行纯化、酶学性质分析。[方法]以pFastBacTMHTAATX质粒为模板,PCR扩增ATX基因,并连接至质粒pInsulator-8His,构建真核表达质粒pInsulator-ATX-8His,经双酶切鉴定后,并瞬时转染至HEK293F细胞,SDS-PAGE检测ATX的表达。通过Ni柱和凝胶层析两步法纯化ATX,HPLC鉴定ATX蛋白的纯度。利用Bis-pNPP底物检测纯化ATX的活性及酶学性质。[结果]真核表达质粒pInsulator-ATX-8His构建成功,并在HEK293F细胞中成功表达,经纯化后ATX蛋白纯度达到98%,并且纯化的ATX具有磷酸二酯酶的活性。酶学性质分析,该酶反应最适pH值为9.0,在0~50℃有较好的热稳定性,金属螯合剂EDTA可抑制ATX活性,金属离子Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)促进ATX的活性。[结论]实现了人ATX在哺乳细胞中的表达,获得了高纯度的ATX蛋白,完成了ATX酶学性质的分析。
- 赵亚蕊曹鹏程郑耀武张全爱赵峰梅渠志灿赵邑
- 关键词：自分泌运动因子哺乳细胞纯化酶学特性
