赵亚蕊 作品数:15 被引量:16 H指数:2 供职机构: 山西省生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省回国留学人员科研经费资助项目 山西省国际科技合作计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 更多>>
重组TRAIL_((114-281))片段的表达纯化及抗肿瘤活性分析 被引量:1 2018年 本文主要探讨人TRIAL_((114-281))对肠癌和肺癌细胞增殖的影响.利用大肠杆菌原核分泌表达TRAIL_((114-281))片段,Ni-NTA亲和层析柱对表达蛋白进行纯化,纯化的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定,通过CCK-8实验检测TRAIL片段对SW480、DLD1、A549肿瘤细胞增殖的影响.实验结果显示经SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化的蛋白为目的蛋白His-TRAIL_((114-281)),且纯度在90%以上.CCK-8结果显示,在一定浓度下,TRAIL_((114-281))片段能明显抑制SW480、DLD1、A549肿瘤细胞的增殖,抑制率呈浓度依赖性,且对各细胞的抑制作用效果不同.本研究证实TRIAL_((114-281))片段在抗肠癌及非小细胞肺癌细胞方面具有一定的应用前景. 赵亚蕊 曹鹏程 赵峰梅 潘薇薇 张全爱 董华 赵邑关键词:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 蛋白纯化 肿瘤 一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用 本发明属生物制药技术领域,目的是提供一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物,提供该化合物在制备靶向抑制自分泌运动因子活性的药物中的用途,制备治疗和预防由溶血磷脂酸和自分泌运动因子升高引起的疾病或病症的药物中的用途,制... 赵邑 李荣宝 赵峰梅 赵亚蕊 孙勇 潘薇薇 梁雅丽 王伟霞 张全爱 曹鹏程肿瘤治疗靶向蛋白Autotaxin(ATX)单克隆抗体的制备与鉴定 2015年 目的:对肿瘤治疗靶向蛋白Autotaxin(ATX)单克隆抗体的制备与鉴定进行探究。方法:利用体内腹水法制备ATX单克隆抗体、ATX单克隆抗体的纯化、单克隆抗体特性鉴定等现代生物技术,研制新型抗肿瘤药物Autotaxin单克隆抗体。结果:获得了具有良好特异性的人ATX单克隆抗体,突破了国内空白,为国内外Autotaxin相关肿瘤研究与治疗提供了新的思路。结论:单克隆抗体由于靶向目标明确,效果明显,在疾病治疗中越来越显现出它的优势,但是它的局限性在于,使用过程中有可能带来强烈的过敏反应。因此,为了Autotaxin抗体可以更加广泛与有效的应用于肿瘤研究与治疗中,项目研究还需进一步深入,继续开发人源化抗体。 梁雅丽 潘薇薇 赵亚蕊 赵邑抗体类生物治疗药物活性测定方法 2015年 对抗体类生物治疗药物活性测定方法进行研究分析。方法:通过基于细胞的生物活性测定方法、基于新技术的生物学活性测定方法、生物学试验的统计方法来进行分析与研究。结果:基于细胞的生物活性测定方法有细胞增殖抑制法、细胞毒性法、补体依赖的细胞毒法、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性法、这几个方面。基于新技术的生物学活性测定方法有表面等离子共振效价测定法、均相时间分辨荧光、 Alpha技术、荧光染料标记法这几种。结论:越来越多的新型技术用于单抗药物的活性检测,为抗体药物的质量提供了新的保障,对国内抗体药物研发企业在质量控制尤其是活性测定方面具有重要的指导作用和参考价值。 梁雅丽 潘薇薇 赵亚蕊 赵邑关键词:活性 一种胰蛋白酶抑制剂活性片段衍生物及其制备方法和应用 一种胰蛋白酶抑制剂活性片段衍生物Argc,其结构与野生片段相比二硫键由3对变为2对,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。Argc通过如下方法获得:化学合成MBTI-Argc片段的基因序列,将pGEX-4T-1-Argc... 李卓玉 李宗伟 付荣 宋莉 赵亚蕊Autotaxin在sf9昆虫细胞的表达及纯化研究 被引量:1 2017年 目的 通过sf9昆虫细胞表达人Autotaxin(ATX),获得具有生物学活性的目的蛋白。方法 采用TRIzol法提取人的黑色素瘤细胞总RNA,通过RT-PCR获得人ATX基因,构建p Fast BacTMHTA-ATX,Bacmid-ATX重组质粒,脂质体转染sf9昆虫细胞,收获重组ATX病毒;重组病毒侵染sf9昆虫细胞表达人ATX;通过His TrapTMHP和Hi Load 16/600 Superdex 200pg柱两部纯化获得目的蛋白并测定其磷脂酶D(lysophospholipase D,lyso PLD)活性。结果 用Bam H I和Xho I双酶切鉴定PCR产物及重组载体的正确性,重组病毒能够侵染sf9细胞表达人ATX,柱层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳纯度95%以上,每升表达液可得到纯化蛋白6mg,其明显具有溶血磷脂酶D(lysophospholipase D,lyso PLD)活性。结论 通过Bac-to-Bac表达系统构建的重组病毒杆粒能够感染sf9昆虫细胞,并正确表达具有生物学活性的人ATX,为开展ATX结晶与结构分析研究提供材料,为开发高效的ATX小分子药物抑制剂提供帮助。 赵峰梅 潘薇薇 曹鹏程 赵亚蕊 何永吉 赵邑关键词:自分泌运动因子 Wnt信号通路调控肠癌细胞GRP78表达与细胞膜转位 被引量:1 2012年 目的本研究旨在探讨Wnt/β-catenin信号通路和葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)两者在肠癌细胞中的调控关系。方法本研究采用氯化锂(LiCl)处理肠癌HT-29和DLD1细胞,激活其Wnt/β-catenin信号通路。通过Western blot和荧光定量PCR,检测Wnt信号活化对GRP78表达的影响;通过对细胞组分的分离和免疫荧光染色技术分析Wnt信号活化对GRP78细胞膜转运的影响。结果 LiCl处理能够显著激活HT-29和DLD1细胞中的Wnt/β-catenin信号通路,GRP78蛋白在HT-29细胞膜表面呈独特的"簇状"分布,LiCl处理明显提高了细胞中GRP78的转录和翻译水平,且GRP78在细胞表面的分布水平也有明显增加。结论肠癌细胞中GRP78的表达和细胞膜转位受Wnt/β-catenin信号通路活性的调控。 赵亚蕊 李宗伟 赵邑 赵超 付荣 李汉卿 王兴华 李卓玉关键词:肠癌 一种胰蛋白酶抑制剂活性片段衍生物及其制备方法和应用 一种胰蛋白酶抑制剂活性片段衍生物Argc,其结构与野生片段相比二硫键由3对变为2对,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。Argc通过如下方法获得:化学合成MBTI-Argc片段的基因序列,将pGEX-4T-1-Argc... 李卓玉 李宗伟 付荣 宋莉 赵亚蕊文献传递 MG-132对缺氧、血清饥饿诱导的MSCs凋亡和旁分泌的影响 被引量:3 2011年 本研究采用缺氧、血清饥饿(hypoxia and serum deprivation,H/SD)联合处理骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),模拟MSCs移植的心脏缺血微环境,研究蛋白酶体抑制剂MG-132对H/SD诱导的MSCs凋亡和旁分泌的影响。采用Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡,real-time PCR检测白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)mRNA表达,免疫荧光染色检测NF-κBp65细胞核转位,Western blot检测IL-1β和TNF-α蛋白表达,ELISA检测IL-10细胞分泌。结果显示,MG-132能够抑制H/SD诱导的MSCs凋亡,并通过抑制NF-κBp65细胞核转位抑制IL-1β和TNF-αmRNA转录;MG-132能够明显增强H/SD诱导的IL-10mRNA转录和IL-10分泌。上述结果提示,MG-132能够抑制缺血诱导的MSCs凋亡和炎症因子IL-1β和TNF-α表达,增强抗炎症因子IL-10的分泌。MG-132预处理有可能成为提高MSCs移植存活率、增强MSCs旁分泌效应的有效策略。 李宗伟 付荣 赵亚蕊 赵超 李卓玉关键词:MG-132 骨髓间充质干细胞 白介素-10 凋亡 旁分泌 自分泌运动因子-溶血磷脂酸轴的生物学功能与调控 被引量:1 2011年 自分泌运动因子(autotaxin,ATX)也称作磷酸二酯酶Iα,是核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族(nucleotide pyrophosphatases,NPPs)中的一员,因而也称作NPP2。ATX是NPPs中唯一具有溶血磷脂酶D(lysophospholipase D,lysoPLD)活性的成员,它可以将溶血磷脂胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)水解成溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)。LPA则通过结合特异的G蛋白耦联受体(G-protein-coupled receptor,GPCR)发挥广泛的生物学效应,包括细胞增殖、迁移和细胞收缩等。ATX作为LPA生成的最主要磷脂酶,其许多功能的发挥与LPA密切相关,二者组成一个ATX-LPA功能轴。本文主要综述了近年来ATX-LPA轴的生物学功能和调控方面的相关研究进展。 李宗伟 赵亚蕊 赵超 付荣 李卓玉关键词:自分泌运动因子 溶血磷脂酸