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组织因子人—鼠嵌合抗体制备的研究: 组织因子(tissue factor，TF)是相对分子量为47 kD的跨膜糖蛋白，在调节凝血功能方面有重要的作用，近年来研究发现TF参与动脉粥样硬化的发生发展、血管生成和肿瘤生长等非凝血功能。利用TF单克隆抗体的导向性和...; 张全爱; 关键词：嵌合抗体真核细胞基因工程抗体

重组TRAIL_((114-281))片段的表达纯化及抗肿瘤活性分析被引量：1: 2018年; 本文主要探讨人TRIAL_((114-281))对肠癌和肺癌细胞增殖的影响.利用大肠杆菌原核分泌表达TRAIL_((114-281))片段,Ni-NTA亲和层析柱对表达蛋白进行纯化,纯化的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定,通过CCK-8实验检测TRAIL片段对SW480、DLD1、A549肿瘤细胞增殖的影响.实验结果显示经SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化的蛋白为目的蛋白His-TRAIL_((114-281)),且纯度在90%以上.CCK-8结果显示,在一定浓度下,TRAIL_((114-281))片段能明显抑制SW480、DLD1、A549肿瘤细胞的增殖,抑制率呈浓度依赖性,且对各细胞的抑制作用效果不同.本研究证实TRIAL_((114-281))片段在抗肠癌及非小细胞肺癌细胞方面具有一定的应用前景.; 赵亚蕊曹鹏程赵峰梅潘薇薇张全爱董华赵邑; 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白纯化肿瘤

组织因子人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建及鉴定被引量：3: 2009年; 目的:构建组织因子人-鼠嵌合抗体的真核共表达载体pCN40-VL-VH,并转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中进行稳定表达,以克服鼠源单克隆抗体(mAb)用于临床的局限性。方法:从分泌鼠抗人的组织因子mAb的杂交瘤细胞株(克隆号:mTA)中抽提总RNA,经RT-PCR扩增mAb VL和VH的基因序列,构建重组真核表达载体pCN40-VL-VH,并进行酶切鉴定和测序。通过磷酸钙沉淀法转染CHO细胞,以终浓度800μg/LG418筛选阳性细胞,通过间接ELISA、Western blot检测细胞培养上清中嵌合抗体的表达量、活性及特异性。结果:成功构建了抗人组织因子嵌合抗体真核共表达载体pCN40-VL-VH并在CHO细胞中表达。ELISA、Western blot证实,表达的抗组织因子嵌合抗体为人鼠嵌合抗体,该抗体能与重组人TF抗原特异性的结合且表达量为51.25mg/L。结论:成功地构建并在真核细胞中表达了抗人组织因子嵌合抗体,为进一步的研究奠定了基础。; 张全爱齐延红潘薇薇何永吉赵峰梅杨素萍赵邑; 关键词：人-鼠嵌合抗体真核表达载体 CHO细胞

一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用: 本发明属生物制药技术领域，目的是提供一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，提供该化合物在制备靶向抑制自分泌运动因子活性的药物中的用途，制备治疗和预防由溶血磷脂酸和自分泌运动因子升高引起的疾病或病症的药物中的用途，制...; 赵邑李荣宝赵峰梅赵亚蕊孙勇潘薇薇梁雅丽王伟霞张全爱曹鹏程

人重组组织因子微颗粒的制备研究被引量：1: 2017年; 采用磷脂酰胆碱(DOPC)、磷脂酰丝氨酸(DOPS)2种合成磷脂,按照6∶4、7∶3、8∶2的比例(摩尔比),分别以磷脂质量浓度为2.0%、2.5%、3.0%的混合溶液,超滤交换,制备9种双层磷脂微颗粒(MP),MP与人重组组织因子(rhTF243)脂化,得到人重组组织因子的磷脂微颗粒(rhTF243+MP)。经PT方法检测比较9种rhTF243+MP的凝血活性、稳定性及储存时间,确定最佳磷脂配比、浓度及制备工艺,制备具有稳定促凝血活性的rhTF243+MP。; 赵峰梅卢晓霞卢晓霞潘薇薇潘薇薇张全爱; 关键词：磷脂酰丝氨酸

具有抗凝活性抗人组织因子单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2016年; 目的制备并鉴定具有抗凝血活性的抗人组织因子(h TF)单克隆抗体(m Ab)。方法以截短型重组h TF243蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后,采用间接ELISA联合血浆凝血酶原时间(PT)测定方法,筛选具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定。结果成功建立1株可稳定分泌具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,该m Ab属于Ig G1亚型。间接ELISA测定腹水效价为1∶200 000,Western blot、PT测定结果表明,该m Ab可特异性结合重组h TF243,同时与SW620结肠癌细胞表面天然TF作用,显著延长血浆凝血酶原时间,具有良好的抗凝血活性。结论成功制备了具有抗凝血活性的抗h TF m Ab。; 陈尧王兴华何永吉潘薇薇曹鹏程赵峰梅张全爱赵邑; 关键词：单克隆抗体抗凝血活性杂交瘤技术

人自分泌运动因子哺乳细胞表达纯化及酶学特性被引量：1: 2017年; [目的]利用哺乳细胞表达系统表达人ATX蛋白,并对其进行纯化、酶学性质分析。[方法]以pFastBacTMHTAATX质粒为模板,PCR扩增ATX基因,并连接至质粒pInsulator-8His,构建真核表达质粒pInsulator-ATX-8His,经双酶切鉴定后,并瞬时转染至HEK293F细胞,SDS-PAGE检测ATX的表达。通过Ni柱和凝胶层析两步法纯化ATX,HPLC鉴定ATX蛋白的纯度。利用Bis-pNPP底物检测纯化ATX的活性及酶学性质。[结果]真核表达质粒pInsulator-ATX-8His构建成功,并在HEK293F细胞中成功表达,经纯化后ATX蛋白纯度达到98%,并且纯化的ATX具有磷酸二酯酶的活性。酶学性质分析,该酶反应最适pH值为9.0,在0~50℃有较好的热稳定性,金属螯合剂EDTA可抑制ATX活性,金属离子Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)促进ATX的活性。[结论]实现了人ATX在哺乳细胞中的表达,获得了高纯度的ATX蛋白,完成了ATX酶学性质的分析。; 赵亚蕊曹鹏程郑耀武张全爱赵峰梅渠志灿赵邑; 关键词：自分泌运动因子哺乳细胞纯化酶学特性

一种重组自分泌运动因子的表达方法: 一种重组自分泌运动因子的表达方法，目的是保持较高活性，高水平表达均一性糖基化修饰；本发明通过构建pInsulator4x‑ATX β‑8His‑DHFR重组表达载体，利用CAG启动子和双顺反子IRES共表达ATX和DHF...; 赵峰梅赵邑张全爱

人TRAIL酶联免疫吸附检测方法的建立: 2016年; 本研究利用重组表达的s TRAIL蛋白作为免疫抗原,分别制备了其单克隆抗体和兔源多克隆抗体,并以其为标准蛋白,建立了敏感、准确、特异性强的TRAIL夹心ELISA方法,为TRAIL蛋白在肿瘤中的监测和治疗奠定了基础。; 卢晓霞赵峰梅张全爱苏小芳刘福; 关键词：TRAIL 抗体 ELISA

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张全爱