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转录因子Ets-1表达载体的构建及调控小鼠成釉细胞MMP-20的表达被引量：1: 2012年; 目的构建转录因子Ets-1的pcDNA331／myc-HisA真核表达载体，转染小鼠成釉细胞，检测Ets-1调控小鼠成釉细胞MMP-20的表达，为研究Ets-1在牙釉质发育过程中的重要作用奠定基础。方法以从小鼠成釉细胞中提取的总RNA逆转录所得eDNA为模板，用RT-PcR法扩增得出含有kpnI和BamHI的Ets-1目的基因连接到pcDNA3．1／myc-HisA真核表达载体上。将重组质粒瞬时转染到小鼠成釉细胞中观察，并通过实时定量RT-PCR的方法检测MMP-20mRNA的相对表达量。结果①经过PCR引物扩增得到-约1399bp的基因片段，重组质粒pcDNA3．1／myc．HisA-Ets-l双酶切进行初步鉴定后，与GenBank登录基因对比显示生物公司测序结果完全正确。（爹重组质粒pcDNA3．1／myc-HisA-Ets-1转染小鼠成釉细胞后（以转染空载体pcDNA3．1／myc-HisA作为对照），实时定量RT-PCR检测MMP-20tuRNA的相对表达量上升明显。结论成功构建了Ets-1的真核表达载体，初步研究证明小鼠成釉细胞核中Ets-1可以上调MMP-20基因表达水平。; 孙霞付显俊李江高玉光; 关键词：转录因子ETS-1 RT-PCR 实时定量RT-PCR 转染

转录因子Sp1基因克隆及表达载体的构建被引量：1: 2012年; 目的通过转录因子Sp1基因克隆以及真核表达载体的构建，为探讨转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控奠定基础。方法根据引物设计原则设计Sp1基因的PCR引物，以从小鼠成釉细胞中提取的总RNA逆转录所得eDNA为模板，进行PCR扩增，用PCR法扩增得出含有EcoRⅠ和XbaⅠ的Sp1目的基因连接到pcDNA3．1／myc-HisA真核表达载体上。结果经过PCR引物扩增得到2343bp基因片段，将获得的重组质粒pcDNA3．1／myc-HisA-Sp1双酶切分析鉴定，测序结果与GenBank登录基因完全一致。结论成功实现了Sp1基因克隆及表达载体的构建，为以后研究转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控方面奠定基础。; 李江孙霞高玉光; 关键词：转录因子SP1 基因克隆 RT-PCR

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李江