陈达文
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目四川省科技富民强县专项行动计划项目四川省学术和技术带头人培养资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牦牛胚胎性别鉴定PCR反应体系的建立被引量：6
- 2011年
- 研究旨在建立牦牛胚胎性别鉴定准确、可靠的PCR反应体系及研究切割取样对胚胎发育能力的影响。根据牦牛SRY和HSL基因序列分别设计合成2对巢式PCR引物作为性别鉴定引物和2对引物作为内标引物,通过优化PCR反应条件,对已知性别牦牛血液基因组DNA和牦牛杂种胚胎DNA采用巢式PCR进行性别鉴定。结果表明,血液样本性别鉴定与实际性别完全相符,准确率100%。从早期胚胎取8个细胞进行性别鉴定,结果雄性为45.8%(11/24),雌性为54.2%(13/24),取样后胚胎发育率为56.7%。结果说明已成功建立牦牛胚胎性别鉴定的PCR体系。
- 张大伟字向东黄磊马力陈达文徐华伟梁冠男
- 关键词：牦牛体外受精巢式PCR性别鉴定
- 体外受精条件对牦牛与黄牛异种受精的影响被引量：1
- 2010年
- 本实验通过改变体外受精精子浓度（0．5×10^6、2×10^6、8×10^6个／mL），精卵共培养时间（12h、18h、24h），体外受精96h后是否更换培养液（IVC）以及氧气的含量（5％CO2和5％CO2、5％O2、90％N2）等培养条件，观察牦牛精子对黄牛卵母细胞受精后卵裂和早期胚胎发育状况．结果显示精子浓度为2×10^6个／mL、精卵共培养24～26h、培养96h后要更换培养液，在5％CO2、5％O2、90％N2的条件下培养，受精和早期胚胎的发育．
- 王红梅梁冠男字向东陈达文黄磊徐华伟穆晓琨
- 关键词：牦牛IVF卵裂率囊胚率
- 牦牛催乳素受体基因部分片段的克隆与序列分析被引量：3
- 2010年
- 扩增出牦牛催乳素受体(PRLR)基因部分保守序列,为研究牦牛乳腺组织中PRLR基因表达水平奠定基础.提取牦牛乳腺组织总RNA,根据NCBI的奶牛PRLR基因cDNA序列的保守区设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增牦牛PRLR基因,结果获得577 bp的片段,将该片段连接于pMD18-Simple质粒中,转化大肠杆菌,菌液PCR鉴定阳性克隆子,测序并分析氨基酸序列.分析序列与氨基酸与其他物种同源性,结果表明该序列与水牛、奶牛、绵羊、人、小鼠的PRLR基因mRNA的对应序列的同源性分别为97.40%、99.13%、93.41%、71.07%、60.20%,编码的氨基酸同源性分别为97.40%、100%、95.83%、82.38%、72.22%.
- 陈达文字向东徐华伟黄磊穆晓琨
- 关键词：牦牛催乳素受体克隆
- 哺乳期九龙牦牛的同期发情研究被引量：6
- 2010年
- 研究旨在探讨哺乳期九龙牦牛同期发情和提高繁殖率的方法。试验母牦牛分为3组,即阴道孕酮栓塞组(n=55),Co-Synch组(n=40)和对照组(n=89)。阴道孕酮栓塞组用Cue-mate、氯前列烯醇(PG-C1)和pMSG处理;Co-Synch组用PG-C1和LRH-A_3处理;对照组母牦牛不进行任何处理。结果表明:在同期发情处理后4d内,阴道孕酮栓塞组和Co-Synch组的发情率分别为100.0%和75.0%(P<0.05)。阴道孕酮栓塞组、Co-Synch组和对照组母牦牛在发情配种季节末的妊娠率分别为69.1%、50.0%和13.5%(P<0.05),翌年产犊率分别为56.4%、42.5%和13.5%(P<0.05)。结果说明,用阴道孕酮栓塞和Co-Synch技术处理后,哺乳期九龙牦牛同期发情效果好,显著提高繁殖率。
- 字向东叶子月哈李平刘云贵王大成蒋忠荣陈达文徐华伟
- 关键词：同期发情发情率产犊率九龙牦牛
- 牦牛ZP3基因的克隆及蛋白质结构的预测被引量：5
- 2010年
- 本研究对牦牛ZP3基因的编码区进行了克隆,在此基础上对ZP3蛋白的分子结构预测,为研究牦牛受精生物学提供基础。根据GenBank中普通牛的ZP3核苷酸序列设计特异性引物,以牦牛卵巢组织总RNA为模板,通过RT-PCR技术扩增牦牛ZP3基因cDNA序列(GenBank登录号为GQ856646),利用DNAMAN生物软件进行核苷酸和氨基酸序列分析、蛋白质专家系统ExPASy进行ZP3蛋白质分子结构预测。结果表明,扩增出的牦牛ZP3基因编码序列长1 266 bp,编码421个氨基酸。牦牛与牛、猪、狗、人、鼠和鸡ZP3基因核苷酸相应序列的同源性分别为98.42%、96.73%、79.67%、78.71%、69.15%和56.61%,氨基酸同源性分别为98.10%、83.85%、74.24%、70.26%、62.62%和46.12%,符合物种进化规律。预测的ZP3蛋白二级和三级结构显示它是一个具有22个氨基酸信号肽的亲水性β-桶状跨膜蛋白。牦牛ZP3基因编码区的成功克隆,为进一步研究该基因的结构与功能及其在受精过程中的作用提供了基础。
- 徐华伟字向东黄磊陈达文穆晓琨王红梅
- 关键词：牦牛克隆分子结构
- 牦牛hnRNP K基因的克隆及序列分析
- 2010年
- 为研究hnRNP K基因的生物学功能及其在牦牛中的特异性,利用RT-PCR和粘性末端连接法,分两段克隆了牦牛hnRNP K基因cDNA序列。序列分析结果表明,牦牛hnRNP K基因cDNA序列长11706bp,开放阅读框(ORF)长1389bp,编码463个氨基酸。序列比对结果表明,牦牛与黄牛hnRNP K cDNA序列的同源性达99.1%,编码的氨基酸同源性达到97.0%;在牦牛氨基酸序列中有15个突变。通过同源建模的方法成功构建了牦牛hnRNP K蛋白质三级结构,结果表明牦牛hnRNP K属于A型结构,而黄牛hnRNP K蛋白属于B型结构,其差异是由第459-463位氨基酸序列由"ADVEG"突变为"SGKFF"所致。乙酰化分析结果显示,牦牛hnRNP K对基因转录的影响水平跟黄牛是一致,表明不同物种hnRNP K功能的差异可能跟其氨基酸序列的差异有关。成功克隆的牦牛hnRNP K基因的cDNA序列为进一步分析该基因的功能提供参考。
- 方鸿滨王永江明锋陈达文
- 关键词：牦牛HNRNP基因克隆
