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基于内质网-线粒体交互作用探讨靶向Bcl-2抗肿瘤的作用机制: 2020年; 目前国内外诸多以粗放方式干预内质网应激发挥抗肿瘤作用的研究结果发现,由于肿瘤细胞内信息网络交互作用导致干预效果不理想,故研究靶向内质网应激药物并明确其机制是研发精准抗肿瘤药物的基本要求.近期的细胞生物学研究为我们提供了新的努力方向.本研究通过检测多种抗肿瘤药物作用后肿瘤细胞内质网应激、自噬、胞质和线粒体Ca2+浓度变化及内质网-线粒体交互作用相关蛋白表达的改变,对基于内质网-线粒体交互作用靶向Bcl-2抗肿瘤机制进行了多方面探讨,相信以此理论为基础的肿瘤药物研发具有良好的开发前景和转化价值.通过本项目体内外试验研究,首先,采用顺铂、杨梅素等多种抗肿瘤药物,确认了通过激活内质网应激以诱导肿瘤细胞死亡的可能;其次,探讨了内质网到线粒体的Ca2+转运在肿瘤耐药中的作用,初步阐明了内质网应激在药物诱导的肿瘤细胞凋亡中的作用机制;再次,我们研究了抗肿瘤药物诱导的内质网应激与细胞自噬和蛋白代谢之间相互作用关系,进而研究了靶向Bcl-2通过调控线粒体和内质网交互作用在肿瘤耐药机制中的重要作用.; 徐冶于洋徐路王春艳田洪艳李松岩刘维民李质馨; 关键词：体内外试验细胞自噬细胞生物学抗肿瘤机制蛋白代谢

P53的表达及突变与人卵巢上皮性肿瘤关系的Meta分析: 2020年; 目的系统性评价P53的表达及突变与人卵巢上皮性肿瘤关系。方法检索中国知网、PubMed中英文数据库中,有关P53的表达及突变与人卵巢上皮性肿瘤关系的病例-对照研究,对选用的研究进行质量评价,提取相关数据,最后应用Rev Man 5.3统计学软件进行Meta分析。结果最终纳入8篇病例-对照研究,共670例患者。Meta分析结果显示,卵巢上皮恶性肿瘤中P53的表达明显比正常卵巢组织和卵巢上皮良性肿瘤组织高;卵巢上皮交界性肿瘤中P53的表达明显高于卵巢上皮良性肿瘤组织而低于卵巢上皮恶性肿瘤组织,以上差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论P53可能参与了卵巢癌发生发展的过程,并可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点。; 徐路郭玉婷黄艺锦李拱辰吴宗育徐冶; 关键词：P53蛋白卵巢上皮性肿瘤免疫组化

一种用于小鼠注射及采血的小鼠固定装置: 本实用新型公开一种用于小鼠注射及采血的小鼠固定装置，包括：固定板；多个滑道，其沿所述固定板轴向设置在所述固定板内部，并沿所述固定板径向等间距阵列；多个滑槽，其设置在所述滑槽对应的所述固定板顶面，并与所述滑道连通；多个滑杆...; 李松岩徐冶林冬静徐路于洋刘师兵孙奇沈楠; 文献传递

钙离子在顺铂诱导宫颈癌HeLa细胞自噬反应中的作用被引量：5: 2016年; 目的:采用钙释放抑制剂联合化疗药物作用于宫颈癌HeLa细胞,探讨钙离子(Ca^(2+))在肿瘤细胞自噬反应中的作用,为辅助肿瘤治疗和药物研发提供依据。方法:选择处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,随机分为对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂联合2-APB组(联合组)。MTT法检测HeLa细胞生存率,钙离子荧光探针法检测HeLa细胞胞浆和线粒体中游离Ca^(2+)水平,共聚焦显微镜检测HeLa细胞中自噬相关蛋白LC3和P62的共定位情况。结果:MTT法检测,与对照组比较,顺铂组和联合组HeLa细胞生存率明显降低(P<0.05);与顺铂组比较,联合组HeLa细胞生存率明显升高(P<0.05)。钙离子荧光探针法检测,与顺铂组比较,联合组细胞株胞浆和线粒体中游离Ca^(2+)水平及LC3和P62蛋白共定位荧光强度明显降低。结论:化疗药物可诱导肿瘤细胞发生自噬,联合钙释放抑制剂给药可以降低肿瘤细胞自噬水平,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。; 徐路曾林川于洋窦茗瀚刘师兵李松岩徐冶; 关键词：顺铂钙离子自噬宫颈肿瘤

氯化钴诱导人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性下降及机制研究被引量：1: 2020年; 目的将氯化钴作用于人卵巢癌SKOV3细胞,观察其顺铂(DDP)敏感性变化,并阐述可能机制。方法体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、氯化钴组、DDP组和联合给药组,氯化钴组以200μmol/L氯化钴作用4 h后更换普通细胞培养液继续培养20 h,DDP组以含10 mg/L DDP的培养基作用24 h,联合给药组以200μmol/L氯化钴作用4 h后更换含10 mg/L DDP的细胞培养液继续培养20 h。MTT法检测各组细胞存活率;Muse^■凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡率;Hoechst33342染色观察各组细胞核形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)观察细胞色素C(cyto C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、缺氧诱导因子(HIF-1α)、p-糖蛋白(p-GP)、磷酸化的信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)表达水平。结果与对照组比较,DDP组细胞存活率明显下降;与DDP组比较,联合给药组细胞存活率明显升高。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率升高;与DDP组比较,联合用药组细胞凋亡率明显降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞核异常比例明显升高;与DDP组比较,联合用药组细胞核异常比例降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞中cyto C和Caspase-9表达水平明显升高,氯化钴组和联合用药组HIF-1α、p-STAT3和p-GP表达水平明显升高;与DDP组比较,联合用药组cyto C和Caspase-9表达水平降低,氯化钴组和联合用药组HIF-1α、p-STAT3和p-GP表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化钴诱导缺氧可导致HIF-1α表达水平升高,同时伴随p-STAT3和p-GP表达水平的升高,人卵巢癌SKOV3细胞DDP敏感性下降。; 于洋王润泽张岳培刘师兵徐路徐冶; 关键词：氯化钴缺氧诱导因子 P-糖蛋白顺铂耐药

杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞自噬的诱导作用及线粒体分裂的促进作用: 2017年; 目的:观察杨梅素作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞自噬的发生和线粒体分裂程度,探讨杨梅素对其线粒体分裂的影响及自噬的诱导作用。方法:体外培养SKOV3细胞,杨梅素给药剂量按0、20、40和60g·L^(-1)分为对照组和低、中、高剂量杨梅素组,均作用12h。流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位变化,MitoTracker Red荧光探针特异性标记线粒体观察其形态,Western blotting法检测动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)和自噬相关蛋白LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白表达水平,采用间接免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3表达强度。结果:与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞线粒体膜电位下降比例明显升高(t=3.27,t=6.85,t=5.49,P<0.05)。与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞中线粒体数目增加,且线粒体砂砾感增强。与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞中Drp1(t=4.35,t=3.28,t=6.17,P<0.05)和Fis1(t=8.32,t=6.74,t=9.27,P<0.05)蛋白表达水平明显升高,中和高剂量杨梅素组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高(t=3.28,t=4.21,P<0.05)。间接免疫荧光检测,与对照组比较,随着杨梅素给药剂量增加,LC3表达强度逐渐增强。结论:杨梅素能够诱导人卵巢癌SKOV3细胞发生自噬,并对线粒体动分裂有明显促进作用。; 于洋刘师兵李松岩徐路徐冶; 关键词：杨梅素 SKOV3细胞自噬

氯化钴对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响: 2019年; 目的:观察氯化钴(CoCl_2)作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响,并阐述其可能机制。方法:体外培养SKOV3细胞株,随机分为对照组、CoCl_2组、顺铂(DDP)组和CoCl_2联用DDP (联合)组,CoCl_2组细胞以200μmol·L^(-1) CoCl_2作用4h后换普通细胞培养基培养20h,DDP组细胞以含10 mg·L^(-1) DDP的细胞培养基培养24h,联合组细胞以200μmol·L^(-1) CoCl_2作用4h后更换含10mg·L^(-1) DDP的细胞培养基继续培养20h。MTT法检测各组细胞存活率,免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性表达强度,Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子(Ca^(2+))水平,免疫蛋白印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白细胞色素C (cyto C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase 3)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved caspase 3)蛋白表达水平,Muse~凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率。结果:与对照组比较,CoCl_2组细胞存活率无明显变化(P>0.05),其余2组细胞存活率明显下降(P<0.05);且联合组高于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl_2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强(P<0.05);DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和联合组细胞Ca^(2+)水平升高(P<0.05);且DDP组高于联合组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl_2组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),DDP组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);且联合组低于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.05);联合组细胞凋亡率较DDP组降低(P<0.05)。结论:CoCl_2可以通过抑制DDP诱导的人卵巢癌SKOV3细胞株iNOS表达增强来减少线粒体途径凋亡的发生,降低其顺铂敏感性。; 于洋张岳培王润泽刘师兵徐路徐冶; 关键词：低氧诱导因子1Α 氯化钴诱导型一氧化氮合酶顺铂敏感性 SKOV3细胞

一种用于医学动物实验的吸入式麻醉箱: 本实用新型公开了一种用于医学动物实验的吸入式麻醉箱，包括麻醉箱本体，所述麻醉箱本体的上表面设置有箱盖，所述箱盖的上表面固定连接有提把手，所述箱盖的下表面固定连接有密封条，所述麻醉箱本体的左侧内壁分别设置有暖照灯和去味罐，...; 李松岩徐冶徐路孙奇林冬静沈楠; 文献传递

BMH-21诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究: 2018年; 目的探讨核仁应激对人肝癌BEL-7402细胞的凋亡诱导作用。方法以人肝癌BEL-7402细胞为研究对象,依据给药剂量实验分为4组:对照组(0μmol/L),1、2和4μmol/L组。MTT检测BEL-7402细胞生存率,共聚焦显微镜观察核仁应激标志蛋白变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白印迹检测凋亡相关蛋白表达。结果 MTT结果表明BMH-21对BEL-7402细胞生长抑制作用呈剂量依赖性,共聚焦显微镜观察发现BMH-21诱导BEL-7402细胞核仁应激标志蛋白发生变化,流式细胞仪检测结果表明BMH-21以剂量依赖性的方式诱导细胞凋亡,蛋白印迹结果显示凋亡相关蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 BMH-21诱导人肝癌BEL-7402细胞核仁应激,导致细胞凋亡的发生。; 徐路梁旗灿张岳培孙伟冯静于洋刘师兵刘维民徐冶; 关键词：肝癌凋亡

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徐路

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