王开放
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水稻草状矮缩病毒P2基因多克隆抗体的制备及应用被引量：4
- 2012年
- 为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上。将重组载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29kDa含HIS标签的融合蛋白。以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到l:8192。并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础。
- 杨靓邓萍王开放刘妍刘小娟吴祖建
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白的亚细胞定位研究被引量：4
- 2013年
- 病毒蛋白的亚细胞定位可以反映病毒的某种功能,是研究病毒功能的重要依据。借助农杆菌的介导,将南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)可能编码的6种非结构蛋白分别在本氏烟细胞中表达,通过荧光共聚焦显微镜观察所表达的蛋白亚细胞定位情况。结果表明:Pns52、Pns91定位相似,主要定位于细胞质,在细胞质中形成较大的颗粒状聚集体;Pns6、Pns71、Pns72和Pns92定位相似,分散于整个细胞,主要定位于细胞质中或膜上,均形成丝网状结构;WoLF PSORT对比分析显示它们可能都是膜内在蛋白(Integral membrane protein),此外,Pns6在细胞质中还可以形成颗粒状的聚集体。
- 章松柏王开放刘小娟吴祖建
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白亚细胞定位
