朱俊
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建被引量：2
- 2013年
- 应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体,提取重组Bacmid质粒.将阳性重组Bacmid质粒转染Sf9昆虫细胞,72 h收集培养上清液获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验和Westernblot表明,该重组杆状病毒可以在昆虫细胞实现猪圆环病毒2型Cap蛋白的分泌表达.
- 张春雷靳立明叶昱张杰朱俊高又文廖明樊惠英
- 关键词：ORF2基因CAP蛋白重组杆状病毒
- 猪流行性腹泻病毒GD-A株的分离鉴定及S基因序列分析被引量：6
- 2015年
- 【目的】在广东省某疑似发生猪流行性腹泻的猪场中,采集病猪的粪便样品,经RT-PCR检测阳性的样品接种于Vero细胞,以分离猪流行性腹泻病毒.【方法】通过在细胞上的连续传代,直至能稳定增殖.并通过RT-PCR对细胞培养物进行特异性片段的检测,观察细胞病变(CPE)的发生情况,以及间接免疫荧光(IFA)检测猪流行性腹泻病毒的M蛋白,对病毒进行分离与鉴定.【结果和结论】病毒在盲传5代时能观察到典型病变,传至20代时能在Vero细胞上增殖稳定.RT-PCR、CPE与IFA的结果证明,所分离到的病毒为PEDV,并命名为GD-A株.
- 朱俊高又文张杰叶昱廖明樊惠英
- 关键词：猪流行性腹泻病毒M蛋白S基因间接免疫荧光
