冯杰
- 作品数:6 被引量:28H指数:3
- 供职机构:四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 铜绿假单胞菌脂肪酶基因(LipA)在枯草芽孢杆菌pab02中的整合表达被引量:5
- 2017年
- 对铜绿假单胞菌脂肪酶基因(Lip A)进行克隆,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并在枯草芽孢杆菌pab02中整合表达。根据铜绿假单胞菌Lip A基因设计引物,扩增Lip A基因,并进行测序,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,转化枯草芽孢杆菌pab02,并对转化后的阳性菌株进行诱导表达。结果显示,成功从铜绿假单胞菌A05菌株中扩增到长1 092 bp的Lip A基因,该基因与铜绿假单胞菌Lip A基因(登录号为AB290342)的同源性高达98%;该基因共编码311个氨基酸(aa),包含26个aa组成的信号肽和285个aa组成的成熟肽;成功构建了整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并将Lip A整合到枯草芽孢杆菌pab02染色体上,获得了重组枯草芽孢杆菌pab02–lip A;SDS–PAGE分析结果表明,脂肪酶蛋白得到了有效表达,该蛋白的相对分子质量约为37 000。
- 张飞燕何敏王振华潘康成冯杰唐慧琴
- 关键词:铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌脂肪酶基因
- 枯草芽胞杆菌芽胞表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白保护性抗原片段的研究被引量:2
- 2016年
- 将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草芽胞杆菌芽胞外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽胞。通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草芽胞杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草芽胞杆菌。对重组枯草芽胞杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR鉴定,提取重组芽胞衣壳总蛋白进行Western-blot分析及对重组芽胞进行免疫荧光显微镜观察。淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明,该融合基因成功整合于枯草芽胞杆菌染色体上;Western-blot结果显示,在67.78ku处获得1条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察,可见重组芽胞具有特异性荧光信号。结果表明,PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草芽胞杆菌芽胞表面。
- 戴茜茜王振华谷笑笑张娇冯杰潘康成
- 关键词:猪流行性腹泻病毒枯草芽胞杆菌S蛋白
- 枯草杆菌芽孢表面展示外源性功能蛋白的研究进展
- 本文主要对枯草杆菌芽孢结构及芽孢表面展示外源蛋白技术和应用前景进行阐述。
- 冯杰王振华潘康成
- 关键词:枯草芽孢杆菌
- 文献传递
- 一株产淀粉酶芽胞杆菌SY200的鉴定及其对动物病原菌的生物拮抗试验被引量:2
- 2017年
- 目的对一株产淀粉酶芽胞杆菌SY200进行鉴定及其对动物病原菌的生物拮抗试验。方法提取芽胞杆菌SY200基因组DNA,采用细菌16S rRNA通用引物进行PCR扩增及对扩增到的目标片段的测序,将测序结果与NCBI上已知菌种的16S rRNA序列进行BLAST对比,并构建系统进化树进行分析。采用滤纸片法和牛津杯法分别研究该芽胞杆菌的全菌液及培养物上清液对3株病原菌的生物拮抗。结果结合细菌形态观察及生理生化特性鉴定,最终确定菌株SY200为甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus);芽胞杆菌SY200全菌培养液和培养上清液对产肠毒素大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌、金黄色葡萄球菌均有较强的生物拮抗作用,抑菌物质主要为细菌的代谢产物。结论芽胞杆菌SY200被鉴定为甲基营养型芽胞杆菌,该菌株对3株动物性病原菌具有较强的生物拮抗作用。
- 潘文杰冯杰杨帆
- 关键词:益生菌
- 产γ-氨基丁酸植物乳杆菌对小鼠生长、血清抗氧化能力及盲肠菌群的影响被引量:5
- 2016年
- 为研究产γ-氨基丁酸(GABA)植物乳杆菌GA8对小鼠生长性能、血清抗氧化能力和盲肠菌群的影响,将60只昆明系小鼠随机分成5组,试验1、2、3组小鼠饮用水中分别添加1×106、2×106和4×106 cfu/mL的产GABA植物乳杆菌GA8,对照组在饮用水和日粮中不添加任何制剂,GABA组在日粮中加入15μg/g GABA,小鼠饲喂30d后,检测其生长性能、血清抗氧化能力及盲肠菌群结构。饲喂产GABA植物乳杆菌GA8后,试验3组小鼠末重和平均日增重均显著高于对照组(P<0.05),其他组间无明显差异;试验1、2、3组的总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(SOD)活性都有提高,丙二醛(MDA)含量降低,但差异不显著;试验3组较对照组大肠杆菌明显减少(P<0.01),乳杆菌明显增加(P<0.05),试验1、2组肠球菌减少(P<0.05),其他差异不显著;采用PCRDGGE技术分析,试验1、2、3组和GABA组肠道菌群的多样性指数、均匀度和丰富度均高于对照组。结果表明产GABA植物乳杆菌GA8能明显提高小鼠的生长性能、促进有益菌生长和抑制有害菌繁殖,对血清抗氧化能力有一定的影响。
- 徐毓琴王振华潘康成张娇谷笑笑冯杰
- 关键词:小鼠Γ-氨基丁酸植物乳杆菌抗氧化能力盲肠菌群
- 重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、抗氧化能力及免疫功能的影响被引量:15
- 2018年
- 为探究重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、免疫及抗氧化功能的影响,本研究将120羽1日龄肉鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10羽:A组饲喂基础日粮,B组饲喂日粮中含枯草芽孢杆菌168制剂1.0×10~6 cfu/g,C组饲喂日粮中含重组枯草芽孢杆菌SE1制剂1.0×10~6 cfu/g。于饲喂实验28 d和42 d时分别测定肉鸡生长性能、免疫功能、肝脏和血清抗氧化能力。结果显示,重组芽孢杆菌SE1制剂与枯草芽孢杆菌168制剂对肉鸡生长、料重比、免疫器官指数没有影响(p>0.05),但均可显著促进28 d时的外周血T淋巴细胞的增殖(p<0.05),与A组相比,C组SE1制剂能够提高42 d时肉鸡肝脏过氧化氢酶和血清超氧化物歧化酶活力(p<0.05),降低28 d时肉鸡肝脏和血清丙二醛含量(p<0.01或p<0.05);C组血清抗鸡白痢沙门氏菌OmpC IgG水平极显著高于A组和B组(p<0.01),肠黏膜IgA水平也显著高于其它两组(p<0.05)。结果表明重组枯草芽孢杆菌SE1制剂可提高肉鸡的免疫功能和抗氧化性能,诱导产生特异性抗鸡白痢沙门氏菌Omp C蛋白的血清IgG抗体和回肠粘膜IgA抗体。
- 唐慧琴王振华潘康成张娇冯杰
- 关键词:枯草芽孢杆菌肉鸡免疫功能抗氧化