唐慧琴
- 作品数：7 被引量：41H指数：5
- 供职机构：四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 产γ-氨基丁酸益生菌的筛选及其生物活性研究被引量：5
- 2016年
- 为筛选具有生物拮抗活性和耐酸耐胆盐能力的高产γ-氨基丁酸(GABA)的菌株,首先从待分离样品中筛选出可疑菌株,然后利用纸层析和HPLC-MS进行定性和定量分析,筛选出高产γ-氨基丁酸菌株。通过细菌形态、生理生化特性并结合细菌16S rDNA序列对高产菌株进行鉴定,同时研究高产菌株对3株动物性病原菌的生物拮抗作用及其耐酸耐胆盐试验。结果表明,从泡菜中筛选出的菌株GA8为高产γ-氨基丁酸菌株,在含有1%L-谷氨酸钠的GYP培养基中37℃培养48 h,产GABA量达3.50 g·L^(-1),经鉴定该菌株为植物乳杆菌;该菌株全菌液和上清液对鸡白痢沙门氏菌、鸡源大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,其菌体悬液无抑菌能力;该菌初始活菌数为108cfu·m L^(-1)时,在pH 2.0的酸性环境中处理4 h后,活菌数能达到106cfu·m L^(-1)以上;0.3%胆盐处理4 h,活菌数达到10~3cfu·m L^(-1)左右。表明所筛选出的产γ-氨基丁酸菌株GA8具有一定的抑菌性能和耐酸能力,但耐胆盐能力不强。
- 徐毓琴戴茜茜唐慧琴谷笑笑潘康成
- 关键词：益生菌Γ-氨基丁酸
- 重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡抗氧化能力及免疫功能的影响
- <正>引言动物传染疾病的治疗预防手段使用最多的是抗生素,随着抗生素长期使用其弊端日渐显露[1,2]。枯草芽孢杆菌是美国食品药物管理局（FDA）和中国农业部批准使用的安全菌株,具有不分泌毒素、安全性好、易于基因调控、无密码...
- 唐慧琴王振华潘康成张娇冯杰
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌脂肪酶基因(LipA)在枯草芽孢杆菌pab02中的整合表达被引量：5
- 2017年
- 对铜绿假单胞菌脂肪酶基因(Lip A)进行克隆,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并在枯草芽孢杆菌pab02中整合表达。根据铜绿假单胞菌Lip A基因设计引物,扩增Lip A基因,并进行测序,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,转化枯草芽孢杆菌pab02,并对转化后的阳性菌株进行诱导表达。结果显示,成功从铜绿假单胞菌A05菌株中扩增到长1 092 bp的Lip A基因,该基因与铜绿假单胞菌Lip A基因(登录号为AB290342)的同源性高达98%;该基因共编码311个氨基酸(aa),包含26个aa组成的信号肽和285个aa组成的成熟肽;成功构建了整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并将Lip A整合到枯草芽孢杆菌pab02染色体上,获得了重组枯草芽孢杆菌pab02–lip A;SDS–PAGE分析结果表明,脂肪酶蛋白得到了有效表达,该蛋白的相对分子质量约为37 000。
- 张飞燕何敏王振华潘康成冯杰唐慧琴
- 关键词：铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌脂肪酶基因
- 重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡生长性能、肠道消化酶活性和菌群的影响被引量：13
- 2018年
- 本试验旨在研究芽孢表面展示鸡白痢沙门氏菌Omp C重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡生长性能、肠道消化酶活性和菌群的影响。选择7日龄肉鸡120只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只鸡。A组(对照组)饲喂基础饲粮,B组和C组分别在基础饲粮中添加0.1%(1.0×106CFU/g)枯草芽孢杆菌168制剂和0.1%(1.0×10~6CFU/g)重组枯草芽孢杆菌SE1制剂,试验期35 d。结果显示:1)与A组相比,C组肉鸡的终末体重和平均增重分别增加6.14%和6.76%(P>0.05),料重比降低8.21%(P>0.05)。2)28、42日龄时,B组和C组肉鸡的空肠脂肪酶和回肠蛋白酶活性显著高于A组(P<0.05);B组和C组肉鸡的肠道消化酶活性无显著差异(P>0.05)。3)28、42日龄时,B组和C组肉鸡的回肠、盲肠大肠杆菌数量显著低于A组(P<0.05),盲肠乳杆菌数量显著高于A组(P<0.05)。16S rRNA V3区聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)结果显示,B组和C组肉鸡的盲肠菌群丰富度、均匀度和香农-维纳指数均显著高于A组(P<0.05);C组肉鸡盲肠菌群的相似性在28、42日龄时分别比A组高26.8%和15.6%,C组和B组之间无显著差异(P>0.05)。结果表明,重组枯草芽孢杆菌SE1具有与枯草芽孢杆菌168相同的效果,能有效促进肉鸡生长,提高肠道脂肪酶和蛋白酶活性,调节肉鸡肠道菌群,提高肠道菌群稳定性和多样性。
- 李佳骏王振华胡正茂唐慧琴谷笑笑廖成斌潘康成
- 关键词：肉鸡消化酶活性肠道菌群
- 重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、抗氧化能力及免疫功能的影响被引量：15
- 2018年
- 为探究重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、免疫及抗氧化功能的影响,本研究将120羽1日龄肉鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10羽:A组饲喂基础日粮,B组饲喂日粮中含枯草芽孢杆菌168制剂1.0×10~6 cfu/g,C组饲喂日粮中含重组枯草芽孢杆菌SE1制剂1.0×10~6 cfu/g。于饲喂实验28 d和42 d时分别测定肉鸡生长性能、免疫功能、肝脏和血清抗氧化能力。结果显示,重组芽孢杆菌SE1制剂与枯草芽孢杆菌168制剂对肉鸡生长、料重比、免疫器官指数没有影响(p>0.05),但均可显著促进28 d时的外周血T淋巴细胞的增殖(p<0.05),与A组相比,C组SE1制剂能够提高42 d时肉鸡肝脏过氧化氢酶和血清超氧化物歧化酶活力(p<0.05),降低28 d时肉鸡肝脏和血清丙二醛含量(p<0.01或p<0.05);C组血清抗鸡白痢沙门氏菌OmpC IgG水平极显著高于A组和B组(p<0.01),肠黏膜IgA水平也显著高于其它两组(p<0.05)。结果表明重组枯草芽孢杆菌SE1制剂可提高肉鸡的免疫功能和抗氧化性能,诱导产生特异性抗鸡白痢沙门氏菌Omp C蛋白的血清IgG抗体和回肠粘膜IgA抗体。
- 唐慧琴王振华潘康成张娇冯杰
- 关键词：枯草芽孢杆菌肉鸡免疫功能抗氧化
- 以CotB为分子载体表面展示鸡白痢沙门氏菌OmpC的重组枯草杆菌芽孢对小鼠免疫效果的研究被引量：5
- 2015年
- 为研究小鼠口服以CotB为分子载体表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组枯草杆菌芽孢后诱导产生的特异性抗体水平与交叉保护作用,本研究将120只成年雌性小鼠随机分为5组,A组与B组在第0、15 d分别灌服重组枯草杆菌SE1与野生型枯草杆菌168芽孢(1.0×10^(10)cfu芽孢/次/只),C组与D组则分别拌料饲喂重组枯草杆菌SE1与野生型枯草杆菌168芽孢(1.0×10~6cfu芽孢/g饲料),E组仅饲喂基础日粮。饲喂至22d,每组随机选取4只小鼠采集血清和小肠内容物,采用ELISA检测各组小鼠OmpC特异性抗体水平;同时,每组小鼠随机选取16只并分为两个小组,进行鼠伤寒沙门氏菌交叉保护试验。结果显示,口服重组芽孢可诱导产生特异性血清IgG与肠粘膜SIgA抗体,与对照组相比差异极显著(p<0.01),拌料饲喂方式所诱导的抗体水平均显著高于灌服方式(p<0.05);重组芽孢可为小鼠抗2×LD_(50)和10×LD_(50)攻毒剂量的鼠伤寒沙门氏菌感染提供100%和50%的保护作用。结果表明,重组芽孢经口服免疫可诱导机体产生特异性血清IgG与肠粘膜SIgA抗体,并可赋予交叉保护作用抗鼠伤寒沙门氏菌感染。
- 刘明刚戴茜茜徐毓琴张飞燕唐慧琴潘康成
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌枯草芽孢杆菌免疫效果
- 藏猪IGF-1成熟肽基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2017年
- 旨在克隆藏猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的成熟肽基因,并进行原核表达的研究。提取藏猪肝脏组织RNA,通过RT-PCR扩增出藏猪IGF-1全长基因,构建重组质粒p MD19-T-IGF-1,以p MD19-T-IGF-1质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽序列并构建成熟肽p ET-32α-IGF-1表达质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3),对IPTG诱导剂浓度和诱导时间进行优化,Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白后采用Western Blot对其鉴定。结果显示,IGF-1成熟肽基因(315 bp),成功构建了成熟肽p ET-32α-IGF-1原核表达质粒;重组大肠杆菌BL21-IGF-1以包涵体形式表达出分子量约31 k Da融合蛋白,最优IPTG浓度为0.5 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为10 h;纯化获得了高纯度的融合蛋白,经鉴定IPTG诱导表达和纯化的蛋白为IGF-1融合蛋白。结果表明,成功构建了表达质粒p ET32α-IGF-1及获得重组大肠杆菌BL21-IGF-1,表达了藏猪IGF-1成熟肽融合蛋白及该蛋白具有抗原抗体反应活性。
- 张飞燕王振华潘康成唐慧琴谷笑笑李伟
- 关键词：藏猪胰岛素样生长因子1原核表达蛋白纯化蛋白质印迹法
