张娇
- 作品数:6 被引量:27H指数:3
- 供职机构:四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 枯草芽胞杆菌芽胞表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白保护性抗原片段的研究被引量:2
- 2016年
- 将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草芽胞杆菌芽胞外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽胞。通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草芽胞杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草芽胞杆菌。对重组枯草芽胞杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR鉴定,提取重组芽胞衣壳总蛋白进行Western-blot分析及对重组芽胞进行免疫荧光显微镜观察。淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明,该融合基因成功整合于枯草芽胞杆菌染色体上;Western-blot结果显示,在67.78ku处获得1条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察,可见重组芽胞具有特异性荧光信号。结果表明,PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草芽胞杆菌芽胞表面。
- 戴茜茜王振华谷笑笑张娇冯杰潘康成
- 关键词:猪流行性腹泻病毒枯草芽胞杆菌S蛋白
- 蜡样芽孢杆菌PAS38对肉仔鸡生长性能及免疫功能的影响被引量:5
- 2019年
- 为了研究蜡样芽孢杆菌PAS38制剂对肉鸡生长性能和免疫功能的影响,选用80只7日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分成2组,每组4个重复,每个重复10羽,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.05%的蜡样芽孢杆菌PAS38制剂,试验期35 d。结果显示:试验组鸡体质量及净增质量均比对照组高,但仅在28 d时差异显著(P<0.05),空肠和回肠淀粉酶和蛋白酶活性均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);试验组的胸腺和脾脏指数在28,42 d时显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),法氏囊指数在42 d时显著高于对照组(P<0.05);试验组血清免疫球蛋白含量均高于显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),42 d时试验组血清中IL-2和IFN-γ含量高于对照组(P>0.05),IL-4含量低于对照组(P>0.05);试验组肉鸡的胸腺和法氏囊组织中IL-2、IFN-γ、GBP1、IRF1的mRNA表达量均有不同程度地高于对照组,IL-10 mRNA转录水平低于对照组;IL-4 mRNA转录水平在胸腺组织中显著高于对照组(P<0.05),而在法氏囊组织中则显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)低于对照组。结果表明,蜡样芽孢杆菌PAS38具有促进肉鸡的生长性能和增强肠道消化酶活性,促进免疫器官的发育,并且通过调节免疫相关基因mRNA的表达来提高机体的非特异性免疫和细胞免疫。
- 张娇王振华潘康成倪学勤李佳骏李建臻李建臻
- 关键词:肉鸡蜡样芽孢杆菌消化酶免疫功能
- 重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、抗氧化能力及免疫功能的影响被引量:15
- 2018年
- 为探究重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、免疫及抗氧化功能的影响,本研究将120羽1日龄肉鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10羽:A组饲喂基础日粮,B组饲喂日粮中含枯草芽孢杆菌168制剂1.0×10~6 cfu/g,C组饲喂日粮中含重组枯草芽孢杆菌SE1制剂1.0×10~6 cfu/g。于饲喂实验28 d和42 d时分别测定肉鸡生长性能、免疫功能、肝脏和血清抗氧化能力。结果显示,重组芽孢杆菌SE1制剂与枯草芽孢杆菌168制剂对肉鸡生长、料重比、免疫器官指数没有影响(p>0.05),但均可显著促进28 d时的外周血T淋巴细胞的增殖(p<0.05),与A组相比,C组SE1制剂能够提高42 d时肉鸡肝脏过氧化氢酶和血清超氧化物歧化酶活力(p<0.05),降低28 d时肉鸡肝脏和血清丙二醛含量(p<0.01或p<0.05);C组血清抗鸡白痢沙门氏菌OmpC IgG水平极显著高于A组和B组(p<0.01),肠黏膜IgA水平也显著高于其它两组(p<0.05)。结果表明重组枯草芽孢杆菌SE1制剂可提高肉鸡的免疫功能和抗氧化性能,诱导产生特异性抗鸡白痢沙门氏菌Omp C蛋白的血清IgG抗体和回肠粘膜IgA抗体。
- 唐慧琴王振华潘康成张娇冯杰
- 关键词:枯草芽孢杆菌肉鸡免疫功能抗氧化
- 藏猪IGF-1成熟肽真核表达载体的构建及其在毕赤酵母GS115中的表达
- 2017年
- 构建藏猪IGF-1成熟肽基因的真核表达载体,通过毕赤酵母表达系统获得具有生物活性的IGF-1成熟蛋白。根据GenBank中猪IGF-1基因设计1对引物,以构建的藏猪pMD19-T-IGF-1重组质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽基因,并将其克隆于表达载体pPIC9k,获得重组穿梭质粒pPIC9k-IGF-1,电转毕赤酵母GS115感受态,对重组酵母转化子经MM、MD平板筛选和PCR鉴定后,经G418抗性梯度筛选,获得多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达后进行Tricne-SDS-PAGE和Dot blot分析。Tricne-SDS-PAGE和Dot blot分析显示,表达的目的蛋白分子质量约为13 ku,获得成功表达;CCK8法检测显示,纯化后的IGF-1重组蛋白能够促进细胞增殖。表明,本研究成功构建了藏猪IGF-1成熟肽真核表达质粒pPIC9k-IGF-1,并在毕赤酵母GS115中得到了有效表达,表达产物具有促进细胞增殖的生物活性。
- 张飞燕王振华张立平杨金龙潘康成张娇谷笑笑
- 关键词:藏猪胰岛素样生长因子成熟肽真核表达
- 抑制性消减杂交技术(SSH)在动物免疫相关基因方面的研究进展被引量:1
- 2018年
- 对于一个生物个体来讲,尽管所有细胞的基因组成是相同的,但在不同的细胞、同一细胞不同的分化阶段或受到外界的不同刺激时,相关基因的表达及蛋白质的功能都会有所差异([1])。基因的差异表达是调控生物生命活动的核心机制,个体的生长发育和衰老死亡,以及对各种环境因子的应答,本质上都离不开差异基因的表达。为了阐明各种生命过程的分子机制,必须对差异表达基因进行分离、克隆并进一步研究,抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)应运而生,
- 谷笑笑张娇王振华潘康成
- 关键词:动物免疫免疫相关抑制性消减杂交技术SSH相关基因
- 产γ-氨基丁酸植物乳杆菌对小鼠生长、血清抗氧化能力及盲肠菌群的影响被引量:5
- 2016年
- 为研究产γ-氨基丁酸(GABA)植物乳杆菌GA8对小鼠生长性能、血清抗氧化能力和盲肠菌群的影响,将60只昆明系小鼠随机分成5组,试验1、2、3组小鼠饮用水中分别添加1×106、2×106和4×106 cfu/mL的产GABA植物乳杆菌GA8,对照组在饮用水和日粮中不添加任何制剂,GABA组在日粮中加入15μg/g GABA,小鼠饲喂30d后,检测其生长性能、血清抗氧化能力及盲肠菌群结构。饲喂产GABA植物乳杆菌GA8后,试验3组小鼠末重和平均日增重均显著高于对照组(P<0.05),其他组间无明显差异;试验1、2、3组的总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(SOD)活性都有提高,丙二醛(MDA)含量降低,但差异不显著;试验3组较对照组大肠杆菌明显减少(P<0.01),乳杆菌明显增加(P<0.05),试验1、2组肠球菌减少(P<0.05),其他差异不显著;采用PCRDGGE技术分析,试验1、2、3组和GABA组肠道菌群的多样性指数、均匀度和丰富度均高于对照组。结果表明产GABA植物乳杆菌GA8能明显提高小鼠的生长性能、促进有益菌生长和抑制有害菌繁殖,对血清抗氧化能力有一定的影响。
- 徐毓琴王振华潘康成张娇谷笑笑冯杰
- 关键词:小鼠Γ-氨基丁酸植物乳杆菌抗氧化能力盲肠菌群