李玉
- 作品数：3 被引量：14H指数：1
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- 发文基金：湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 抗KOD聚合酶单克隆抗体的制备(英文)
- 2010年
- 单克隆抗体具有高度的均一性和专一性。抗KOD聚合酶单克隆抗体，可以特异性结合于KOD聚合酶，抑制PCR反应前常温状态下的多聚酶活性，显著提高PCR反应的特异性。为了提高KOD聚合酶PCR反应的特异性，以KOD聚合酶为抗原，制备了两株抗KOD聚合酶的单克隆抗体。以大肠杆菌表达的重组蛋白KOD聚合酶为抗原免疫BALB／c小鼠，然后将免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择培养、ELISA检测和有限稀释法克隆，建立了2株能稳定分泌抗KOD聚合酶单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1F5与3G6，对应的抗体亚型分别是IgGl和IgG2a。染色体计数结果分别是85～90和83～86。1F5与3G6的细胞上清和腹水的ELISA效价分别为1：2^8，1：2^9和1：2^11，1：2^11。间接免疫荧光证实制备的单克隆抗体的特异性良好。该结果为进一步建立高特异性的PCR方法奠定了良好的基础。
- 余晓岚李玉王飞钟星陈亮马立新
- 关键词：单克隆抗体ELISA检测
- 一种载体构建的新方法:一步克隆法被引量：14
- 2007年
- 报道一种载体构建的新方法,在PCR引物设计时,相连片断设计15 bp同源序列,PCR克隆目的片段后,产生多个首尾具同源末端的片段,然后进行多片段定向连接、转化和重组子鉴定.以4片段拼接的叶绿体单交换质体载体pSMGA(pBluescriptⅡSK(+)-man-gfp-aadA)的构建为例,应用上述方法构建仅需做一次连接、转化即可.该方法设计操作相对简便,无需中间载体的构建,减少连接和转化次数.利用该法构建了10多个6 kb以内的载体,证明这是一种简便、通用、高效并值得推广的构建小载体的方法.
- 欧阳平李玉严红马立新
- 关键词：水稻
- 一种快速、简便、经济的基因合成方法
- 基因的合成和表达是分子生物学操作过程中的重要技术。化学合成DNA序列为优化基因密码子、研究未知基因的功能以及蛋白质结构与功能之间的关系提供了一个强有力的手段。然而,高的碱基合成费用和高碱基出错率是基因合成过程中的两个最大...
- 李玉严红马立新
- 文献传递
