陈亮
- 作品数：6 被引量：41H指数：3
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗KOD聚合酶单克隆抗体的制备(英文)
- 2010年
- 单克隆抗体具有高度的均一性和专一性。抗KOD聚合酶单克隆抗体，可以特异性结合于KOD聚合酶，抑制PCR反应前常温状态下的多聚酶活性，显著提高PCR反应的特异性。为了提高KOD聚合酶PCR反应的特异性，以KOD聚合酶为抗原，制备了两株抗KOD聚合酶的单克隆抗体。以大肠杆菌表达的重组蛋白KOD聚合酶为抗原免疫BALB／c小鼠，然后将免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择培养、ELISA检测和有限稀释法克隆，建立了2株能稳定分泌抗KOD聚合酶单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1F5与3G6，对应的抗体亚型分别是IgGl和IgG2a。染色体计数结果分别是85～90和83～86。1F5与3G6的细胞上清和腹水的ELISA效价分别为1：2^8，1：2^9和1：2^11，1：2^11。间接免疫荧光证实制备的单克隆抗体的特异性良好。该结果为进一步建立高特异性的PCR方法奠定了良好的基础。
- 余晓岚李玉王飞钟星陈亮马立新
- 关键词：单克隆抗体ELISA检测
- 构建定向T载体用于基因克隆和表达被引量：10
- 2013年
- 传统的T载体克隆方法需要烦琐的后续步骤来筛选和鉴定重组子,并且无法实现目的基因的定向克隆。为了克服这些问题,本研究在pET-23a(+)的基础上构建了定向T载体pETG,首先通过定点诱变消除pET-23a(+)上的两个BfuⅠ位点得到PET-23aM;设计一对引物在5端各引入一个BfuⅠ位点,下游引物紧邻BfuⅠ位点引入13 bp的部分LacO序列,用该引物从pHBM2002上扩增Prrn-gfp表达盒,插入PET-23aM的NdeⅠ和XhoⅠ位点,得到定向T载体pETG。PCR扩增的目的基因通过下游引物引入7 bp剩余的LacO序列,该基因片段与BfuⅠ酶切制备的定向T载体连接、转化大肠杆菌DH10β感受态细胞,通过补加了X-gal的平板筛选蓝色重组子。质粒酶切和PCR鉴定表明蓝色菌落全部为定向插入的重组子,重组效率100%,利用本方法成功地定向克隆了103个人类肝蛋白编码基因cDNA,克隆过程无需复杂的步骤筛选鉴定重组子。随机选择了其中的8个基因的克隆进行表达,结果显示8个克隆均在大肠杆菌中获得成功表达。该结果表明定向T载体构建成功,并且该载体非常适合基因的克隆和表达。
- 钟星翟超陈亮余晓岚蒋思婧严红杨登想马立新
- 关键词：TA克隆PCR克隆蛋白质表达
- 大学生网络思想政治教育之我见被引量：12
- 2007年
- 网络思想政治教育，是根据传播学原理和思想宣传的理论，利用计算机网络所进行的思想政治教育。其主要方式是在了解计算机网络和多媒体知识、掌握现代传播技术手段的基础上，通过制作、传播和控制网络信息，引导网民在接触信息的基础上，选择吸收正确的信息，从而达到思想政治教育的目的。网络思想政治教育是思想政治教育适应现代科技发展的表现，它具有不同于传统思想政治教育的显著特点，是计算机网络和思想政治教育的联姻，是思想政治教育的一种现代方式。
- 陈亮
- 关键词：网络思想政治教育大学生计算机网络现代传播技术网络信息教育适应
- 土壤细菌16SrRNA基因变异型及其与植被的相关研究被引量：16
- 2001年
- 绕过细菌的分离培养 ,直接提取土壤DNA ,扩增、克隆土壤细菌群体的 16S核糖体RNA基因 (16SrD NA) .根据该基因各种变异类型的限制性片段长度多型性 ,分析土壤细菌分子遗传多样性及其与植被的相互关系 .植被的改变影响土壤养分 ,进而改变土壤细菌群落结构 .土壤细菌遗传多样性和分化能反映植被的变化 .
- 杨官品朱艳红陈亮薛小乔
- 关键词：细菌植被土壤养分
- 站在巨人肩上重建大学生文化素质
- 2007年
- 当代大学生文化素质的现状和提高,是众人关注的话题,本文就大学生文化素质的提高作了浅显的设想和说明,通过对国内优秀文化传统的引见和吸收,同时建立良好的校园文化环境及完善各种条件,为大学生文化素质的提高开辟道路。
- 陈亮
- 关键词：人文素质学校教育
- 一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法被引量：3
- 2008年
- 针对如何大规模地筛选大肠杆菌重组子,将质粒快检和菌落PCR两种方法巧妙地融合,建立一种新的高效快捷的重组质粒筛选方法.该方法不需接种抽取质粒,在转化子长出当天即可筛选到重组质粒.大规模基因克隆表明该方法能够快速、准确地筛选出阳性克隆.
- 田丽春黄光瑞陈亮刘荧张桂敏马立新
- 关键词：重组质粒菌落PCR
