肖俊
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南昌大学生命科学与食品工程学院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 三角帆蚌基质金属蛋白酶基因的克隆、表达及功能
- 用RACE-PCR技术克隆出了三角帆蚌的2种基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-19)的cDNA序列,MMP1基因的cDNA全长序列为1822 bp,其中5'UTR(非编码区)有31 bp;3'UTR有258 bp;开放...
- 肖俊周春兰胡宝庆文春根
- 关键词：三角帆蚌基质金属蛋白酶基因克隆重组蛋白
- 翘嘴鳜铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白表达、纯化及特性分析被引量：2
- 2017年
- 超氧化物歧化酶(SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基的一种重要抗氧化酶。根据翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)Cu/Zn-SOD基因序列(Gen Bank登录号:KJ558392.1)设计表达引物,扩增获得截去信号肽后的一段460 bp的序列,序列经过鉴定后,构建了重组表达质粒p ET-30a+Sc Cu/Zn-SOD,并将该质粒转入到BL21(DE3)中,用IPTG诱导进行表达。经过优化表达条件得到可溶的Sc Cu/Zn-SOD重组蛋白(rScCu/Zn-SOD),纯化重组蛋白后测定rScCu/Zn-SOD的浓度和酶活性。结果发现在20℃和37℃条件下均能够诱导Sc Cu/ZnSOD的表达。37℃时重组蛋白主要以包涵体形式存在。降低诱导温度和补充Cu^(2+)/Zn^(2+)可提高rScCu/Zn-SOD的表达量。在20℃、0.5 mmol/L IPTG条件下,添加0.5 mmol/L CuSO_4和0.1 mmol/L ZnCl_2于培养基中,重组蛋白的表达量明显升高。纯化后的重组蛋白浓度为0.14 mg/m L,酶活力为108.5 U/mg。rScCu/Zn-SOD最适温度为37℃,最适pH为7.0,可耐受5%浓度的SDS蛋白质变性剂。
- 肖俊许亮清胡向萍程周玉胡宝庆简少卿阳钢文春根
- 关键词：铜锌超氧化物歧化酶原核表达
