赵亚丽
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:天津医科大学更多>>
- 发文基金:天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- Tudor-SN蛋白的表达调控及参与蛋白翻译调控的机制初探
- 目的: 真核生物的基因表达调控普遍存在于自然界中,是非常复杂的过程,可以发生在DNA水平、转录水平、蛋白质翻译水平等多种不同层次,而基因在不同水平上的表达调控,可能对机体的生物学功能产生不同影响。本课题组前期研究发现成...
- 赵亚丽
- 人Tudor-SN UTR片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测
- 2017年
- 目的为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5'UTR、pGL3-3'UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5'UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5'UTR和3'UTR序列的重组质粒,为研究Tudor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。
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- 关键词:荧光素酶
- 重组pCMV-N-Tudor-SN点突变质粒的构建及表达被引量:1
- 2016年
- 目的:构建Tudor-SN蛋白的Serine426(S426)、Serine781(S781)、Threonine240(T240)和Threonine429(T429)的点突变质粒,并使该重组质粒能够在He La细胞中融合表达。方法:利用定点突变技术,对Tudor-SN蛋白进行S426A、S781A、T240A、T429A点突变,通过双酶切的方法获得Tudor-SN.Mutants片段,最后将其连入到p CMV-N-Flag载体中。在He La细胞中转染该质粒,利用Western blot技术检测质粒表达效率。结果:(1)重组质粒经双酶切鉴定,可以观察到载体与Tudor-SN.Mutants的条带。(2)转染突变质粒后可看出He La细胞中有Flag蛋白表达。结论:质粒构建成功,可以用于下一步科学研究使用。
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- 关键词:重组质粒