任媛媛
- 作品数:9 被引量:18H指数:3
- 供职机构:天津医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家杰出青年科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 唑来膦酸在乳腺癌中抗肿瘤差别化效应的研究进展被引量:1
- 2016年
- 乳腺癌是女性发病率和死亡率较高的恶性肿瘤。肿瘤复发和远处转移是导致死亡的主要原因。唑来膦酸(ZOL)具有潜在抑制破骨细胞介导的骨吸收的特性,既可抑制肿瘤细胞增殖和启动肿瘤细胞凋亡,又可干扰肿瘤细胞与骨基质的黏附,从而抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭。一些临床前研究已经证实ZOL具有直接抗肿瘤作用,且在对绝经前和绝经后乳腺癌患者的治疗效果上有差异。本文就ZOL在乳腺癌中抗肿瘤差别化效应的基础及临床研究进展作一综述。
- 谷振坤任媛媛杜晓琅王晨
- 关键词:乳腺肿瘤抗肿瘤药唑来膦酸
- pmCherry-C1-Argonaute1重组质粒的构建及鉴定
- 2016年
- 目的构建并鉴定pmCherry-C1-Argonaute1重组质粒,为深入研究Argonaute1蛋白在细胞应激及相关疾病的生物学作用奠定基础。方法提取He La细胞总RNA,反转录出含Argonaute1的c DNA;以Argonaute1 c DNA为模板,采用PCR法扩增出带有EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切的目的基因;采用双酶切法将目的片段连接到pmCherry-C1载体上;将构建成功的pmCherry-C1-Argonaute1重组质粒转染入He La细胞内,以Western blotting法检测Argonaute1与樱桃红(Cherry)蛋白的融合表达情况;以激光共聚焦显微镜观察细胞内Argonaute1蛋白与细胞应激颗粒的标记蛋白(G3BP)及加工体的标记蛋白(DCP1α)的应激共定位关系。结果以EcoRⅠ、Bam HⅠ单、双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误;融合蛋白表达阳性;当细胞受到应激时,Argonaute1蛋白与G3BP、DCP1α蛋白共定位。结论本研究成功构建重组pmCherry-C1-Argonaute1质粒。该质粒可有效表达Cherry标记的Argonaute1融合蛋白,有助于深入研究Argonaute1蛋白在细胞应激及相关疾病领域的生物学作用。
- 崔晓腾高星杰张春燕付雪苏超任媛媛杨洁
- 关键词:重组质粒融合蛋白
- RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液中13种成分被引量:5
- 2016年
- 目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液(JQOL)中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。方法采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈-5.0mmol/LKH2P04溶液(稀磷酸调节pH值至3.0)(15:85)为流动相,梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min。结果梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷13种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为2.08~31.22μg/mL(r=0.9995)、4.01~60.15μg/mL(,=0.9992)、10.09~151.31μg/mL(r=0.9992)、4.98-74.63μg/mL(r=0.9994)、2.05~30.74μg/mL(r=0.9996)、4.10~61.46μg/mL(r=0.9996)、2.93~43.98μg/mL(r=0.9993)、2.04~30.66μg/mL(r=0.9995)、12.54~181.55μg/mL(r=0.9997)、53.95-89.23μg/mL(r=0.9995)、12.05~180.68μg/mL(r=0.9995)、5.97~89.51μg/mL(r=0.9994)、7.99~119.82μg/mL(r=0.9996),平均加样回收率分别为98.8%、98.6%、101.2%、99.4%、100.1%、99.7%、98.9%、99.4%、100.5%、98.7%、101.2%、98.3%、99.1%,RSD分别为1.9%、1.8%、1.5%、0.8%、0.6%、0.9%、1.2%、2.0%、1.6%、0.8%、1.4%、1.5%、1.7%(n=6)。9批次JQOL供试品中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷质量浓度分别为0.229~0.259mg/L、1.231~1.260mg/L、0.849~0.877mg/L、0.357~0.371mg/L、0.149~0.169mg/L、0.941~0.967mg/L、0
- 任媛媛王晨
- 关键词:甘草酸铵细辛脂素苍术素欧前胡素异欧前胡素升麻素苷5-O-甲基维斯阿米醇苷
- 人Tudor-SN UTR片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测
- 2017年
- 目的为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5'UTR、pGL3-3'UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5'UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5'UTR和3'UTR序列的重组质粒,为研究Tudor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。
- 赵亚丽苏超甘世虎任媛媛高星杰杨洁何津岩
- 关键词:荧光素酶
- 人SND1基因慢病毒载体构建及稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株筛选被引量:3
- 2016年
- 目的构建人SND1基因慢病毒载体,筛选稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株,为探讨SND1基因对卵巢癌的调控作用提供细胞系模型。方法采用PCR法从pCMV-FLAG-SND1质粒中扩增FLAG-SND1基因片段,连接到慢病毒载体表达质粒pLVX-IRES-Hyg中,获得重组慢病毒载体pLVX-FLAG-SND1。以pLVX-FLAGSND1瞬时转染293T细胞48 h,采用Western blotting法检测SND1蛋白表达量。pLVX-FLAG-SND1重组质粒通过与包装质粒共转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。以慢病毒感染SKOV3细胞48 h,在细胞培养基中加入1μg/mL潮霉素B,筛选稳定表达SND1蛋白的细胞株,采用Western blotting法检测该细胞株内SND1蛋白表达量。结果重组慢病毒载体经双酶切和基因测序比对鉴定正确。重组慢病毒载体在瞬时转染的293T细胞中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。SKOV3细胞经慢病毒感染、药物筛选后获得的稳定表达株中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。结论成功构建了SND1基因慢病毒载体pLVXFLAG-SND1,并筛选出稳定表达SND1蛋白的SKOV3细胞株,为进一步明确卵巢癌发生、发展机制奠定了基础。
- 任媛媛雷静赵然辛灵彪苏超高星杰杨洁
- 关键词:慢病毒载体SKOV3细胞卵巢癌
- SND1低表达宫颈癌CasKi细胞稳定株的构建及其生物学功能变化被引量:1
- 2017年
- 目的构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响。方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-p LKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)慢病毒液,用嘌呤霉素筛选CasKi细胞稳定株。分别用Western blotting技术、RT-PCR技术检测CasKi细胞内SND1蛋白、mRNA表达,确认转染效率。用CCK-8法检测CasKi细胞增殖活力(OD_(450)值),用细胞划痕实验检测CasKi细胞相对迁移距离。结果空白对照组细胞全部死亡,阴性对照组及干扰1~4组细胞部分存活,证明细胞稳定株转染构建成功。干扰1~4组SND1蛋白、mRNA相对表达量与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05;干扰3、4组与其他组比较,P均<0.05。干扰3、4组OD_(450)值、相对迁移距离与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05。结论成功构建了SND1低表达的CasKi细胞稳定株;SND1低表达的CasKi细胞增殖和迁移能力降低。
- 孟浩付晓张春燕辛灵彪任媛媛杨洁何津岩
- 关键词:子宫颈肿瘤CASKI细胞细胞迁移
- 转染pcDNA-FLAG-EXOSC2质粒对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡的影响被引量:2
- 2017年
- 目的观察转染pcDNA-FLAG-EXOSC2质粒对宫颈癌He La细胞增殖与凋亡的影响。方法构建pcDNA-FLAG-EXOSC2重组质粒。将体外培养的He La细胞分为EXOSC2过表达组、空质粒组,分别转染pcDNA-FLAGEXOSC2重组质粒、pcDNA3.1(+)质粒。采用CCK-8法观察各组细胞增殖情况(结果以OD450表示),采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果 EXOSC2过表达组、空质粒组OD450分别为0.665 2±0.050 94、0.443 6±0.035 19,两组OD450相比,P<0.05。EXOSC2过表达组、空质粒组细胞凋亡率分别为5.99%±0.37%、7.57%±0.64%,两组细胞凋亡率相比,P<0.05。结论转染pcDNA-FLAG-EXOSC2可以促进宫颈癌He La细胞增殖并抑制其凋亡。
- 赵春妍崔晓腾钱宝鑫任媛媛杨洁高星杰
- 关键词:宫颈癌细胞增殖
- 重组pCMV-N-Tudor-SN点突变质粒的构建及表达被引量:1
- 2016年
- 目的:构建Tudor-SN蛋白的Serine426(S426)、Serine781(S781)、Threonine240(T240)和Threonine429(T429)的点突变质粒,并使该重组质粒能够在He La细胞中融合表达。方法:利用定点突变技术,对Tudor-SN蛋白进行S426A、S781A、T240A、T429A点突变,通过双酶切的方法获得Tudor-SN.Mutants片段,最后将其连入到p CMV-N-Flag载体中。在He La细胞中转染该质粒,利用Western blot技术检测质粒表达效率。结果:(1)重组质粒经双酶切鉴定,可以观察到载体与Tudor-SN.Mutants的条带。(2)转染突变质粒后可看出He La细胞中有Flag蛋白表达。结论:质粒构建成功,可以用于下一步科学研究使用。
- 杨文栋苏超张春燕赵亚丽任媛媛高星杰杨洁何津岩
- 关键词:重组质粒
- 2010—2015年天津市肿瘤医院植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物使用情况分析被引量:6
- 2016年
- 目的评价2010—2015年天津市肿瘤医院植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物使用情况。方法对2010—2015年植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物的用量、销售金额、用药频度(DDDs)、日均药费(DDC)和药品排序比(B/A)进行统计和分析。结果紫杉醇类的使用金额占植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物的85%以上,同时增长势头强劲;鬼臼毒素类的使用金额占比最低,只有1%左右,而且使用金额从2012年以后逐年下降。植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物的总使用金额是逐年增长的趋势,但2012年以后增幅较小。伊立替康、依托泊苷和长春地辛的使用金额呈逐年递增。从排序来看,紫杉醇、多西他赛、伊立替康和长春瑞滨连续6年排名前4位。总DDDs逐年增长,多西他赛的DDDs排名持续居于首位,紫杉醇居于次席。DDC和排序相对稳定,2010—2014年伊立替康的DDC排名持续居于首位,紫杉醇在2015年跃升至第1位。其中长春新碱的DDC最低,伊立替康的DDC最高。DDC超过100元的是伊立替康、紫杉醇、多西他赛和长春瑞滨。多西他赛的B/A最大,连续6年为2.00,紫杉醇的B/A连续6年均为0.50;替尼泊苷、长春新碱和长春地辛的B/A均接近1.00。结论天津市肿瘤医院植物来源的抗肿瘤药及其衍生物类药物的应用基本合理,但仍存在一些不足,还需进一步加强管理。
- 任媛媛高宁杜晓琅王晨
- 关键词:植物来源抗肿瘤药用药频度用药分析