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叶辉: 作品数：12 被引量：10H指数：2; 供职机构：山东省血液中心更多>>; 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>

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血站质量管理文件体系风险评估被引量：2: 2019年; 血站质量管理文件体系的构建是血站质量管理工作的基础,直接关系到采供血工作能否安全有序进行。通过对血站质量管理体系文件涉及的应用风险及严重程度进行评估,并进一步明确应采取预防措施,从而提高血站质量管理工作能力,促进采供血工作质与量同步提高,保障血液安全。; 谯铭铭庄云龙叶辉蒋保云申华; 关键词：血站质量管理体系文件风险评估

贮存末期血小板miRNA 的表达谱分析被引量：1: 2021年; 目的了解在体外常规贮存血小板微小RNA(miRNA)的表达谱变化,探讨miRNA参与调控血小板贮存损伤(PSL)的分子机制。方法留取来自无偿献血者的单采血小板20(人)份(5 mL/份),摇匀后等量混合,贮存于(22±2)℃恒温血小板振荡保存箱中,分别在d1和d5取样,采用纳米球(DNB)测序技术对血小板miRNA组测序;2组(不同贮存期)血小板相比miRNA表达量差异≥2倍(P<0.01)时,采用miRanda和TargetScan软件预测靶基因及基因本体论(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测miRNA的表达以验证DNB测序结果。结果miRNA表达谱:贮存d5与d1血小板相比,共有315个表达量差异明显的miRNA,其中上调146个(如miR-146a、let-7b等),下调169个(如miR-30d、miR-142等);已知126个miRNA中,表达上调的43个,表达下调83个;新见miRNA序列189条。d5与d1组差异表达miRNA靶基因呈明显富集的GO条目(term)包括细胞组分、细胞器、细胞膜等细胞结构,黏附、催化、活性活性等分子功能,细胞加工、代谢、生物调节、应激等生物过程。相应的KEGG富集前10的通路中主要是信号转导、分泌、膜转运、氨基酸代谢、多糖代谢、蛋白质合成、环境适应等功能。随机挑选的6个差异表达miRNA所做qPCR结果与测序结果均一致。结论随着血小板体外贮存时间的延长,miRNA表达谱发生明显变化;功能预测提示这些miRNA可能参与体外贮存下血小板发生PSL的调控。; 谯铭铭李伟庄云龙叶辉刘群盖厦陈元锋申华蒋保云王玉霞; 关键词：荧光定量PCR 小RNA

病毒灭活条件下血小板mircroRNA组的表达: 目的探索病毒灭活条件下血小板内微小RNA(microRNA)组的表达,为研究病毒灭活对血小板贮存损伤(PSL)的机制研究提供依据。方法血小板来自山东省血液中心自愿捐献血小板的献血员16人,在超净工作台中将所有样本转移到血...; 徐慧聪庄云龙叶辉蒋保云申华刘艳安立谯铭铭; 文献传递

维生素B_2光化学技术对单采血小板中白细胞和血小板源细胞因子释放的影响被引量：4: 2017年; 目的:探讨维生素B_2光化学病原体灭活技术(PRT)处理的单采血小板对白细胞和血小板源细胞因子释放的影响。方法:随机选取捐献血小板的献血员20人,各取60 ml去白细胞单采血小板,平均分成2份:一份不做处理作为对照组,另一份采用维生素B_2联合紫外光照射的光化学法处理作为实验组。在血站标准条件下保存7d,分别于1、3、5和7 d取样,分析血小板计数(PC)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV);应用ELISA方法检测白细胞源细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α和IFN-γ)和血小板源细胞因子(CCL3、CCL5、TGF-β-1和PF4)含量以及可溶性P-selectin含量;流式细胞术检测血小板膜磷脂酰丝氨酸(PS)表达水平。结果:实验组与对照组相比,PC、PDW和MPV没有统计学差异。随着血小板贮存期的延长,血小板源性细胞因子含量逐渐增加,5-7 d时达到一个新的高度平台,且实验组中血小板源性细胞因子的含量显著高于对照组(P<0.05)。在血小板贮存的3、5和7 d时,实验组中PS表达阳性率显著高于对照组(P=0.0052,P=0.010,P=0.011)。在5和7 d时,实验组中P-selectin含量显著高于对照组(P=0.0138,P=0.0036)。白细胞源性细胞因子含量在实验组和对照组中相比较差异无统计学意义。结论:经PRT处理的去白细胞血小板中,细胞因子的释放主要来源于血小板,在贮存5和7 d时,血小板源性细胞因子的积累达到一个新的平台,其原因最可能是血小板的活化和凋亡。; 刘燕盖厦张文静申华乔文本张毅张传兴叶辉李惠玲庄云龙; 关键词：血小板

miRNA-326作用于其靶基因BCL-XL的研究: 2020年; 目的研究miRNA-326是否作用于其靶基因BCL-XL,探讨miRNA调控血小板凋亡的分子机制。方法利用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统,分别构建含有BCL-XL 3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)片段的野生型和变异型的双荧光素酶载体,设置对照组,转染细胞检测相对荧光强度。结果分别构建了PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT(野生型)和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-MT(变异型)的双荧光素酶报告基因质粒载体;miRNA-326序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT质粒共转染测定的相对荧光强度显著低于对照组(miRNA-326阴性对照序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT质粒共转染组)(P=0.034);同时也显著低于miRNA-326序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-MT质粒共转染的变异组(P=0.022)。结论miRNA-326作用于BCL-XL基因的3′UTR;这为研究miRNA调控血小板凋亡的分子机制奠定了基础。; 谯铭铭盖厦叶辉姬艳博于媛陈元锋徐慧聪庄云龙; 关键词：BCL-XL基因

运用风险管理策略改进血站质量管理体系: 血液质量安全是血站的生命,是血站质量管理永恒的主题。确保血液质量安全,管理采供血各环节中的不安全因素,是保障血液质量的有力手段。《血站质量管理规范》和《血站实验室质量管理规范》借鉴和吸收IS09000标准,而随着2015...; 叶辉; 文献传递

确认存在的问题与分析: 梳理采供血业务过程主要的确认工作以及存在的主要问题。就策划和建立确认程序，包括过程、方法、设备、实验室信息系统、检验试剂和关键物料的确认活动以及不同项目确认活动的整合等方面进行探讨，旨在为血站相关工作人员开展确认活动时提...; 庄云龙叶辉谯铭铭蒋保云申华; 关键词：采供血过程

miRNA-570调控ATP合成酶G亚基的表达促进血小板凋亡: 2020年; 目的探讨微小RNA(miRNA)-570对腺苷三磷酸(ATP)合成酶G亚基因(ATP5L)基因表达的影响及miRNA调控血小板凋亡的分子机制。方法依据NCBI数据库中NM006476.5人的序列分别合成ATP5L 3′端非翻译区(UTR)的野生型(WT)序列和突变型(MT)序列(488 bp),通过在序列两端增加限制酶酶切位点,与双荧光素酶报告基因载体(psiCHECKTM-2)质粒连接,分别构建含有ATP5L 3′UTR的WT和MT的双荧光素酶报告基因载体。依据miRNA数据库中MI0003577人的序列分别合成miRNA-570序列和其阴性序列,分别与构建的双荧光素酶报告基因载体共转染293T细胞,依据转染物的不同将实验分为6组,实验组1:miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT质粒;实验组2:miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-MT质粒;阴性对照组1:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT质粒;阴性对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-MT质粒;空白对照组1:miRNA-570序列和psiCHECK-2质粒;空白对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-2质粒。转染48 h后利用生物发光检测仪检测转染细胞的相对荧光强度。收集单采血小板60 mL,利用脂质体方法转染血小板,依据转染物的不同,将实验分为4组,实验组A:miRNA-570序列;阴性对照组B:miRNA-570阴性对照序列;空白对照组C:脂质体2000;空白对照组D:空白(无转染物);分别转染转染血小板,24 h后收集血小板,流式细胞仪检测血小板膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻表达,Western blot检测血小板半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达,ELISA方法检测血小板Caspase-3活性。结果分别成功构建了psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT和-MT的双荧光素酶报告基因质粒载体。转染293T细胞测定的相对荧光强度:实验组1、实验组2、阴性对照组1、阴性对照组2、空白对照组1、空白对照组2分别为0.673±0.080、0.967±0.059、0.97±0.076、0.96±0.075、0.97±0.067、1.0±0.1(P<0.05)。实验组A、阴性对照序列组B、空白对�; 盖厦李晓华徐慧聪叶辉谯铭铭姬艳博于媛陈元锋庄云龙; 关键词：磷脂酰丝氨酸半胱氨酸蛋白酶-3

济南地区孕妇以及健康献血者戊型肝炎病毒感染的研究被引量：2: 2019年; 目的调查对济南地区孕妇及健康献血者戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)的感染状况。方法收集2015年6月份至2016年10月份于本中心进行新生儿溶血产前筛查的孕妇血浆共651例、同期献血者血样600例进行酶联免疫吸附试验(ELISA),筛查抗HEV IgG、IgM抗体。结果651例孕妇血样本中,检出HEV-IgG阳性17例(17/651,2.61%),未检出HEV-IgM阳性;600例献血者血样本中,检出HEV-IgG阳性98例(98/600,16.33%)、HEV-IgM阳性5例(5/600,0.83%);两组HEV-IgG感染率具有显著性差异(χ^2=70.43,P<0.0001)。结论济南地区孕妇群体中HEV感染率显著低于献血者人群的感染率,但鉴于孕妇HEV感染的病死率较高,孕产期HEV感染仍不容忽视。济南地区献血者中HEV感染率较高,临床输血仍存在风险,在今后的输血保障工作中应引起重视。; 张文静康佩佩叶辉王玉霞庄云龙; 关键词：戊型肝炎病毒孕妇献血者 IGM

核黄素光化学处理下贮存末期血小板miRNA的表达谱分析被引量：1: 2021年; 目的分析核黄素光化学技术(VB2-PRT)处理下贮存d1和d5血小板微小RNA(miRNA)表达谱的变化,探讨贮存末期VB2-PRT处理miRNA参与调控血小板发生贮存损伤(PSL)的分子机制。方法留取无偿献血者单采血小板20人份(5 mL/份),混合摇匀,使用终浓度为50μmol/L VB2和6.24 J/mL紫外线(UV)B光照处理8 min后,均分为2等份,贮存于(22±2)℃恒温血小板振荡保存箱中,分别在d1和d5取样(5 mL),采用纳米球(DNB)测序技术对血小板miRNA组测序,采用DEGseq和MA-plot分析软件筛选2组(不同贮存期)差异表达的小RNA,当2组间的血小板miRNAs表达量差异≥2倍(P<0.01)时,采用miRanda和TargetScan软件预测靶基因及基因本体论(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测miRNA的表达以验证DNB测序结果。结果miRNA表达谱:VB2-PRT处理后贮存d5与d1血小板相比,共有590个表达量差异明显的miRNAs,其中上调255个(如miR-99b、miR-7等),下调335个(如miR-451a、miR-19b等);已知272个miRNAs中,表达上调的112个,表达下调160个;新见miRNAs序列318条。d5与d1组差异表达miRNAs靶基因呈明显富集的GO条目(term)包括细胞组分、细胞器、细胞膜等细胞成分,涉及黏附、催化、分子转换、运输、转录因子和受体活性等分子功能,涉及细胞加工、代谢、生物调节、应激等生物过程。相应的KEGG富集前10的通路中主要是分泌、糖代谢、信号转导、膜转运、翻译、环境适应等信号通路。随机挑选的6个差异表达miRNAs所做荧光定量PCR结果与测序结果均一致。结论VB2-PRT处理下贮存d5血小板miRNA表达谱较贮存d1时发生明显变化,功能预测提示这些miRNAs可能参与VB2-PRT处理下血小板发生PSL的调控。; 申华蒋保云庄云龙盖厦叶辉谯铭铭刘群陈元锋王玉霞贡觉顿珠; 关键词：微小RNA 血小板

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