鲍鹏
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 驱动蛋白Kif22多克隆抗体的制备、纯化及免疫特异性检测
- 2017年
- 为深入研究驱动蛋白分子Kif22在细胞内的功能,应用分子克隆技术构建原核细胞表达质粒p HIS8-Kif22C156和p GEXKG-Kif22C156,并在细菌BL-21中诱导表达HIS8-Kif22C156和GST-Kif22C156.用Ni-NTA琼脂糖结合HIS8-Kif22C156蛋白进行蛋白纯化,然后免疫新西兰大白兔制备特异性多克隆抗Kif22抗体;用谷胱甘肽琼脂糖结合GSTKif22C156蛋白进行交联,纯化多克隆兔抗Kif22抗体.蛋白免疫印迹和细胞免疫荧光染色实验证明纯化的抗体可以特异性识别细胞中的Kif22蛋白,表明Kif22多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度.
- 姜虹羽鲍鹏冀美超付成华董智雄朱长军
- 关键词：驱动蛋白多克隆抗体有丝分裂
- 黏着斑蛋白supervillin对胃癌细胞侵袭的促进作用
- 2017年
- 为了研究黏着斑蛋白supervillin(SVIL)在胃癌细胞(SGC)侵袭转移过程中所发挥的作用,利用脂质体转染的方法,将人源的p QCXIP-supervillin(pQCXIP-SVIL)质粒和pEGFP-C1质粒分别转入SGC细胞中,用G418或嘌呤霉素筛选得到稳定表达的GFP-SVIL(SGC-GFP-SVIL)和GFP(SGC-GFP-C1)细胞株,然后应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)对这些细胞株进行鉴定,最后应用细胞侵袭实验对SGC、SGC-GFP-C1及SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力进行比较,并对细胞SVIL、DNA以及皮层肌动蛋白进行免疫荧光染色.结果证实本研究成功构建了SGC-GFP-SVIL和SGC-GFP-C1细胞株.同SGC和SGC-GFP-C1细胞相比,过表达GFP-SVIL蛋白分子的SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力更强.GFP-SVIL与皮层肌动蛋白在细胞中存在共定位,皮层肌动蛋白是侵袭性伪足的标志蛋白,与SGC及SGC-GFP-C1细胞相比,SGC-GFP-SVIL细胞中侵袭性伪足数量明显增加.根据这些结果认为,SVIL可能通过调节皮层肌动蛋白的表达和影响该蛋白分子在侵袭性伪足上的定位,从而影响胃癌细胞的侵袭能力.
- 冀美超姜虹羽于东渤孙涛鲍鹏董智雄朱长军
- 关键词：皮层肌动蛋白胃癌细胞细胞侵袭
- 组织蛋白表达水平检测方法的比较分析被引量：1
- 2019年
- 为了得到一种能够准确、快速检测组织蛋白表达水平的方法,收集了12例结肠癌病人的癌组织及癌旁组织,以RRP15 mRNA的表达水平作为参照,比较免疫组织化学染色法和免疫荧光染色法在检测组织蛋白表达水平方面的优劣.免疫组织荧光染色结果显示,12例患者中有8例患者肿瘤组织的RRP15表达为阳性,4例为阴性,其结果与Real-time PCR定量结果高度一致.免疫组织化学染色结果显示,12例患者中有9例患者肿瘤组织的RRP15表达为阳性,其余3例为阴性,其中6号和11号免疫组织化学检测为阴性,而Real-time PCR定量和免疫组织荧光染色结果均为阳性,即免疫组化检测结果与Real-time PCR定量结果的一致性较差.因此认为,免疫荧光染色法是检测组织中蛋白表达水平的首选方法,免疫组织化学染色法可作为一种辅助方法.
- 鲍鹏余斯琦苏春玉于东渤朱长军董智雄
- 关键词：蛋白表达水平石蜡切片免疫荧光染色免疫组织化学染色
