刘月芳
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省临床医学科技专项江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTD-mLumin-HMGB1 A原核蛋白的表达、纯化及初步鉴定
- 2012年
- 目的:构建含有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)和荧光蛋白mLumin的人HMGB1 A盒原核表达载体,表达并纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白。方法:利用基因重组技术构建pET28a-PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白原核表达载体,并在大肠埃希菌Rosette(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+分离柱纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,激光共聚焦显微镜观察其穿膜能力。结果:成功构建了PTD-mLumin-HMGB1 A原核表达载体,并表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,该融合蛋白能高效地穿过细胞膜进入细胞内。结论:成功地表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,此融合蛋白具有良好的穿膜能力,为更好地研究HMGB1 A的细胞内定位和体内定位提供了重要的依据。
- 高升刘月芳田伊卿吉滢曾子涵殷丝雨邵启祥
- 关键词：蛋白转导结构域高迁移率族蛋白1融合蛋白
- STAT3 Y705与S727磷酸化水平的相互调控被引量：1
- 2017年
- 目的:明确信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)中Y705与S727在磷酸化过程中的相互作用。方法:通过构建STAT3 Y705F和S727A两个磷酸化位点突变的质粒,将其分别转染至TSC2-/-MEF细胞中,蛋白质印迹法检测STAT3 Y705F对STAT3 S727磷酸化水平和STAT3 S727A对STAT3 Y705磷酸化水平的影响。结果:基因测序结果显示编码丝氨酸的TCC突变为GCC,编码酪氨酸的TAC突变为TTC;蛋白质印迹检测结果显示转染STAT3 Y705F组中STAT3 Y705的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 Y705F下调STAT3 S727磷酸化水平;转染STAT3 S727A组中STAT3 S727的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 S727A下调Y705磷酸化水平。结论:STAT3中Y705与S727两个磷酸化位点具有协同作用。
- 刘月芳王珂丁璟王荟吴皓杰王小铃王娟夏圣周小明邵启祥
- 关键词：信号传导与转录激活因子3STAT3STAT3突变磷酸化
