周小明
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
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- 小鼠microRNA-31反转录病毒载体重组质粒的构建及鉴定
- 2016年
- 目的:以p MSCV-puro载体(MGP)为骨架,构建带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小鼠micro RNA-31(mi R-31)反转录病毒载体MGP-31。方法:PCR扩增带有NotⅠ以及XhoⅠ酶切位点的mi R31的前体(premi R-31)序列,然后克隆至MGP载体上,测序鉴定。将构建的MGP-31质粒转染HEK-293T细胞,通过荧光显微镜观察GFP的表达情况,实时定量PCR检测mi R-31转录水平以评估MGP-31质粒的转染效率。结果:基因序列分析显示pre-mi R-31基因序列正确,并成功插入MGP载体,转染HEK-293T细胞可表达GFP,实时定量PCR结果表明转染MGP-31质粒的HEK-293T细胞可高表达mi R-31。结论:MGP-31反转录病毒载体构建成功。
- 张璐玢谢梦晓陈云鹏徐晓昱张彩云冯晖晖刘霞周小明夏圣邵启祥
- 关键词：反转录病毒载体重组质粒
- STAT3 Y705与S727磷酸化水平的相互调控被引量：1
- 2017年
- 目的:明确信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)中Y705与S727在磷酸化过程中的相互作用。方法:通过构建STAT3 Y705F和S727A两个磷酸化位点突变的质粒,将其分别转染至TSC2-/-MEF细胞中,蛋白质印迹法检测STAT3 Y705F对STAT3 S727磷酸化水平和STAT3 S727A对STAT3 Y705磷酸化水平的影响。结果:基因测序结果显示编码丝氨酸的TCC突变为GCC,编码酪氨酸的TAC突变为TTC;蛋白质印迹检测结果显示转染STAT3 Y705F组中STAT3 Y705的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 Y705F下调STAT3 S727磷酸化水平;转染STAT3 S727A组中STAT3 S727的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 S727A下调Y705磷酸化水平。结论:STAT3中Y705与S727两个磷酸化位点具有协同作用。
- 刘月芳王珂丁璟王荟吴皓杰王小铃王娟夏圣周小明邵启祥
- 关键词：信号传导与转录激活因子3STAT3STAT3突变磷酸化
- 整合素α3在卵巢上皮细胞癌中的表达及意义被引量：6
- 2017年
- 目的:研究整合素α3(integrinα3,ITGA3)在卵巢上皮细胞癌组织和细胞系中的表达及其与卵巢上皮细胞癌发展的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学法分别检测卵巢上皮癌细胞系和癌组织以及良性组织中整合素α3 mRNA和蛋白的表达。结果:qRT-PCR检测结果显示,与正常卵巢上皮细胞相比,SKOV3和OVCAR-3卵巢癌细胞系中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与卵巢良性组织相比,癌组织中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。免疫组化结果显示,与卵巢良性组织相比,卵巢癌组织中整合素α3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。且晚期患者癌组织中整合素α3蛋白表达高于早期患者。结论:整合素α3在卵巢癌细胞系及癌组织中呈高表达,且与临床分期相关;其表达可能与卵巢癌的发生、发展和转移有一定相关性。
- 陈小坤何瑶闫美娜杨鑫鑫倪晓鸽杨佩芳邵根宝卢小东周小明夏圣邵启祥
- 关键词：整合素Α3卵巢上皮细胞癌QRT-PCR免疫组织化学
- 雷帕霉素靶蛋白复合物1对Hela细胞微管蛋白稳定性的影响
- 2019年
- 目的:探讨雷帕霉素靶蛋白复合物1 (mammalian target of rapamycin complex 1,m TORC1)对Hela细胞微管稳定性的影响及可能机制。方法:使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,加入5μmol的诺考达唑处理30、60和120 min,免疫荧光检测微管蛋白的稳定性;使用50 nmol/L雷帕霉素处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测促微管解聚蛋白stathmin、KIF2A,促微管聚合蛋白CLIP170,微管切割蛋白Katanin、Spastin的表达变化。转染ATG5-shRNA抑制自噬相关基因5(autophagy-related gene5,ATG5)后,免疫荧光检测微管蛋白稳定性的改变。使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,Rho A)的表达;转染GFP Rho A-Q63L或GFP Rho A-N19、p190RhoGAP-siRNA质粒后,免疫荧光检测微管稳定性的改变。结果:用雷帕霉素抑制m TORC1的活性后Hela细胞微管的稳定性增强,但微管稳定性相关蛋白stathmin、KIF2A、CLIP170、Katanin、Spastin无明显变化。抑制细胞自噬后,微管的稳定性无明显改变。雷帕霉素抑制m TORC1的活性后Rho A GTP酶的活化水平下调;下调p190RhoGAP的活化水平后,微管的稳定性减弱。结论:Rho A在m TORC1介导的Hela细胞微管稳定性中起重要作用。
- 毛正发徐进季佩宇王旭青张建新周小明
- 关键词：微管自噬HELA细胞
- 黏蛋白的结构与功能及其在肿瘤诊断治疗中的应用前景被引量：1
- 2023年
- 黏蛋白样癌相关抗原是一种富含唾液酸的糖蛋白,已成为临床广泛应用的肿瘤诊断标志物,是肿瘤主动特异性免疫治疗的理想靶分子,被当作治疗乳腺癌、卵巢癌和消化道肿瘤等疾病的候选目标。黏蛋白具有充当细胞表面受体和传感器,调控细胞增生、分化和凋亡的作用。目前,有多种基于黏蛋白的免疫原作为疫苗用于肿瘤治疗的研究,本文就黏蛋白的概念、结构、功能、临床应用现状及前景进行综述。
- 刘梦琪周小明张维宁
- 关键词：黏蛋白蛋白结构肿瘤生物标志物免疫治疗
