姚琳
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 四种食源性病毒多重反转录-聚合酶链反应检测研究被引量：1
- 2008年
- 目的 建立同时检测诺如病毒、轮状病毒、星状病毒和甲肝病毒多重RT—PCR检测方法。方法 以四种食源性病毒的高度保守区为靶序列设计特异引物，优化反应体系和条件，确定多重RT—PCR检测四种病毒的特异性和灵敏度，并初步应用于临床样本中四种病毒的同时检测。结果 在灵敏度试验中得到的轮状病毒、诺如病毒和星状病毒稳定的最高检测限均为50pg／ml，甲肝病毒为100pg／ml。在128份临床粪便样本中，其中轮状病毒阳性62份（48．44％），诺如病毒阳性8份（6．25％），星状病毒阳性11份（8．59％），甲肝病毒阳性4份（3．12％）。结论 研究所建立的多重RT—PCR方法，在实际应用中能同时处理大量的样本，提高PCR检测方法的能力，可以应用于临床病例的诊断和流行病学调查等研究。
- 寇晓霞吴清平姚琳张菊梅
- 水体中病毒浓缩方法及其条件优化被引量：13
- 2009年
- 本研究探讨了在自来水和污水两种不同的水体环境中,三氯化铝沉淀法和正电荷滤膜法浓缩回收病毒的效率,并比较应用不同的浓缩条件、洗脱物质时的病毒回收率,从而建立有效的环境样本中病毒的浓缩方法。结果表明,三氯化铝沉淀法在两种水体中的回收率均较高,最高回收率分别达到96.0%和92.0%,但正电荷滤膜法在两种水体中的回收率差别较大。在自来水中,正电荷滤膜法的最高回收率为93.9%,在污水中的最高回收率仅为69.9%,这说明正电荷滤膜法适用于病毒含量较高且悬浮物等杂质较少的样本。在应用于自来水样时,两种方法均可起到有效的病毒浓缩作用,但在悬浮物等杂质较多的污水中,三氯化铝法具有较好的回收效率。
- 寇晓霞吴清平姚琳张菊梅
- 关键词：病毒
- 诺如病毒结构蛋白的研究进展被引量：2
- 2008年
- 吴清平姚琳张菊梅王大鹏寇晓霞
- 关键词：病毒结构蛋白急性胃肠炎杯状病毒新病毒
- 诺如病毒VP2蛋白对病毒样颗粒稳定性的影响与免疫磁珠富集诺如病毒的研究
- 诺如病毒(Norovirus，NoV)是1972年发现的一种病毒，近年被确定为导致不同年龄阶段人群急性病毒性腹泻的最主要病原之一，在所有非细菌性腹泻暴发中有60～80％的病例是由诺如病毒引起的。诺如病毒在环境中稳定存在，...
- 姚琳
- 关键词：诺如病毒VP2蛋白免疫磁珠病毒样颗粒RT-PCR检测
- 诺瓦克病毒ORF2的原核表达及其产物分析
- 2008年
- 诺瓦克病毒(Norovirus,NV)是1972年在美国首次发现的新生病毒,直到1995年国内才有报道。该病毒是严重危害人类健康的重要食源性病毒,可导致不同年龄阶段人群的急性病毒性腹泻。实验以提取临床NV阳性腹泻样本的基因组RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增得到全长为1623bp编码NV主要衣壳蛋白VP1的ORF2全基因序列。将测序结果进行进化分析,结果表明该病毒属于NVGII。将ORF2亚克隆到原核表达载体pET-28a构建原核表达载体,鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。经IPTG诱导表达,获得大小约62kD的融合蛋白并命名为rVP1。以纯化的rVP1免疫新西兰大白兔后制备高免血清,WesternBlot结果表明,实验所获得的多克隆抗体可以特异性识别临床样本中NVVP1。因此,rVP1具有良好的免疫原性和反应原性。对小于rVP1的蛋白条带进行WesternBlot分析,结果表明所有条带均为rVP1的部分蛋白。双向琼脂扩散试验结果显示实验所获得的高效价多克隆抗体与纯化的原核表达产物仅形成单一沉淀带。
- 王大鹏吴清平姚琳寇晓霞张菊梅
- 关键词：诺瓦克病毒VP1原核表达
