张乐
- 作品数：5 被引量：35H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同程度内质网应激对巨噬细胞自噬的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:采用ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化模型,通过不同剂量衣霉素诱导巨噬细胞不同程度内质网应激,观察对其自噬的影响。方法:不同剂量衣霉素作用于小鼠巨噬细胞系RAW264.7,通过TUNEL染色检测其凋亡率,Western blot检测内质网应激蛋白GRP78,以及自噬标志蛋白P62的表达水平。结果:与ox-LDL组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组可以显著减少巨噬细胞的凋亡(P<0.01);与ox-LDL组相比,小剂量衣霉素组上调内质网应激蛋白GRP78表达的同时,自噬标志蛋白P62适度下降(P<0.01);大剂量衣霉素组更为显著地上调了内质网应激蛋白GRP78表达,但同时自噬标志蛋白P62也显著增加(P<0.01)。结论:小剂量衣霉素引起一定程度的内质网应激,可以激活适度的自噬,从而减少巨噬细胞的凋亡,可能有助于降低动脉粥样硬化的程度。
- 马美娟李妍张英梅闫浩刘敏张乐马颖苑健胡建华纪兆乐张荣庆李聪叶王海昌
- 关键词：巨噬细胞内质网应激自噬GRP78P62
- 不同程度内质网应激对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:采用Apo E-/-小鼠建立不稳定动脉粥样硬化斑块模型,给予不同剂量衣霉素,观察其对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法:取40只6-8周的Apo E-/-小鼠随机分为对照组和手术组。对照组小鼠给予正常饮食;手术组小鼠行右侧颈总动脉套管术(Perivascular carotid collar placement,PCCP),同时给予高脂喂养。9周末分别取对照组和手术组小鼠颈动脉,H&E染色观察小鼠颈动脉斑块形成情况。成功造模后,将小鼠随机分为正常对照组、单纯PCCP组、小剂量衣霉素组和大剂量衣霉素组;正常对照组和单纯PCCP组给予生理盐水腹腔注射,小剂量衣霉素组和大剂量衣霉素组分别给予小剂量衣霉素、大剂量衣霉素腹腔注射。2周后,处死小鼠,通过H&E染色观察颈动脉斑块形态,油红O染色观察斑块内脂质聚集,抗巨噬细胞免疫组化染色观察斑块内巨噬细胞聚集,Western-blot检内质网应激标志蛋白GRP78和自噬标志蛋白Atg7、P62的表达水平。结果:H&E染色结果显示:与单纯PCCP组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组颈动脉腔内的斑块脂质池减少,斑块结构较为完整且相对稳定;油红O染色结果显示:小剂量衣霉素组斑块内脂质含量显著降低(P<0.05 vs单纯PCCP组和大剂量衣霉素组);巨噬细胞免疫组化染色显示:与单纯PCCP组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组斑块内巨噬细胞的含量显著降低(P<0.05);Western-blot结果显示:小剂量衣霉素干预诱导的一定程度的内质网应激可以适度上调自噬(P<0.05 vs单纯PCCP组和大剂量衣霉素组)。结论:PCCP手术加高脂饮食可以短期成功建立小鼠不稳定动脉粥样硬化斑块模型,其动脉粥样硬化斑块不稳定性较高,而小剂量衣霉素干预可以使得颈动脉管腔内斑块相对较小,内部脂质池明显较小,纤维帽变厚且结构更完整,斑块结构较稳定;斑块内脂质含量降低;巨噬细胞含量明显降低,且小剂�
- 马美娟张英梅马颖张乐刘敏孙中婵张荣庆李聪叶李妍
- 关键词：APO不稳定斑块动脉粥样硬化内质网应激衣霉素
- 线粒体乙醛脱氢酶2通过提高细胞自噬改善高糖导致的心肌损伤被引量：3
- 2015年
- 目的:明确乙醛脱氢酶2(ALDH2)对高糖状态下H9c2大鼠心肌细胞自噬表达水平的影响及其对细胞存活的作用。方法:以33 mmol/L葡萄糖培养大鼠H9c2心肌细胞72 h。经ALDH2激动剂Alda-1及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预后,用Western blot检测ALDH2、自噬基因相关蛋白5(ATG5)、微管相关蛋白质1轻链3(LC3)的表达水平。用免疫荧光法检测细胞内自噬体的数量,CCK-8法检测细胞的存活率,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:与对照组相比,高糖导致心肌细胞自噬相关蛋白表达水平下降,减少自噬体的数量,降低细胞存活率,增加细胞凋亡;而ALDH2能提高高糖状态下自噬相关蛋白表达水平,增加自噬体的数量,增强细胞的存活率,减少细胞凋亡;应用自噬抑制剂3-MA处置后,可减弱ALDH2的上述作用。结论:ALDH2能够提高高糖状态下心肌细胞的自噬表达水平,提高细胞的存活率,减少细胞凋亡。
- 刘敏张乐马颖马美娟张英梅李妍
- 关键词：乙醛脱氢酶2细胞自噬高糖心肌细胞
- PBL与CBL整合教学模式在心内科临床教学中的应用被引量：23
- 2015年
- 临床教学旨在将医学生培养成一名适应现代社会要求的临床医生。PBL与CBL有机结合教学法把医学教学和临床实际相结合,为心血管内科的临床教学提供新的思路,进一步提高学生对心血管专业知识的兴趣,促进学生最大程度获取直接临床经验以及带教老师的间接经验,为培养高素质心血管专业人才进行了有益的尝试与探索。
- 马颖李妍刘敏张乐胡建华纪兆乐王海昌
- 关键词：心血管内科临床教学
- 衰老心肌自噬减退的新机制-转录因子EB的关键作用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨转录因子EB(TFEB)在衰老心肌自噬减退中的作用。方法采用老年(22月龄)雄性C57BL/6小鼠为实验对象,以成年(4月龄)雄性C57BL/6小鼠为对照,分析心肌自噬水平、心肌TFEB表达水平。结果与成年心肌相比,衰老心肌自噬水平显著降低(P<0.05)。衰老心肌中自噬体标志物Atg5、LC3和Beclin-1,溶酶体标志物LAMP1在蛋白和mRNA水平上均出现降低。与成年心肌相比,衰老心肌TFEB蛋白水平显著降低(P<0.05),衰老心肌细胞核内的TFEB水平下降更为显著(P<0.05),提示衰老心肌TFEB转录能力减退。给予小剂量雷帕霉素处理,可提高衰老心肌细胞核内TFEB水平,并且改善LC3及LAMP1的mRNA和蛋白水平,提高衰老心肌自噬水平。结论本研究发现衰老导致的心肌TFEB水平降低严重影响心肌自噬能力,提示TFEB是心肌自噬增龄性减退机制中的关键调节因子。
- 张乐刘敏马颖胡建华纪兆乐马恒李妍
- 关键词：衰老心肌损伤自噬
