李德强
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 人骨髓间充质干细胞向肝细胞诱导分化的进一步研究
- 2011年
- 目的:探索骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞诱导的最有效方法,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法:取健康成人的适量骨髓,采用梯度密度离心法分离BM-MSCs并行贴壁培养,扩增至第3代,取第3代细胞分3组分别进行诱导。A组:肝细胞生长因子(HGF)+表皮生长因子(EGF);B组:肝细胞生长因子(HGF)+成纤维生长因子(FGF);C组:肝细胞生长因子(HGF)+表皮生长因子(HGF)+成纤维生长因子(HGF)。分别进行培养,诱导前通过流式细胞仪分析细胞表面标志CD44、CD90的表达率对培养的BM-MSCs进行鉴定,诱导后通过RT-PCR、免疫组织化学法、糖原染色检测鉴定其诱导分化情况。结果:本文通过建立从人骨髓中分离、培养、扩增、传代、纯化BM-MSCs,定向诱导分化,使其成功向肝样细胞转化,图像分析表明C组鼠抗人白蛋白单克隆抗体(ALB)表达最为明显。结论:证明3种组合均可成功将骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导分化,均能分泌肝细胞特异性标记如鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体(AFP)、ALB、糖原,其中C组效果最为突出。
- 王人颢万美荣李德强刘小云
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞生长因子表皮生长因子成纤维生长因子肝细胞
- 兔骨髓间充质干细胞体外向肝样细胞的诱导分化被引量：1
- 2012年
- 背景:研究表明,应用四氯化碳建造的重型肝衰竭小鼠模型中移植骨髓间充质干细胞后能够明显改善肝功能,促进肝再生。目的:观察骨髓间充质干细胞移植后动物模型肝功能及肝硬化程度等指标的变化情况。方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法获取兔骨髓间充质干细胞。取传代培养至3代的兔骨髓间充质干细胞,添加肝细胞生长因子和表皮生长因子,诱导21d后进行BrdU标记。建立肝硬化兔模型,实验组兔将收集的BrdU标记过的肝样细胞悬液注入门静脉,对照组注入相同体积生理盐水。细胞移植后21d麻醉下处死试验兔,观察肝硬化兔肝脏内分布及肝功能与对照组变化情况。结果与结论:兔骨髓间充质干细胞在体外经肝细胞生长因子、表皮生长因子的诱导条件下,于21d发现细胞呈类圆形,细胞染色显示,甲胎蛋白、血清白蛋白和糖原表达均呈阳性表达。肝样细胞经门静脉移植后,实验组兔肝生化指标与对照组相比较显著改善(P<0.05)。BrdU免疫组织化学染色显示:在汇管区和肝索肝窦内均可见BrdU阳性细胞分布。说明兔骨髓间充质干细胞能够向肝样细胞分化,经门静脉移植诱导后的肝样细胞可以改善肝硬化兔的肝功能,促进兔肝细胞再生。
- 李德强王人颢
- 关键词：肝样细胞骨髓间充质干细胞肝细胞生长因子表皮生长因子干细胞
- 干细胞诱导分化为肝细胞的鉴定方法被引量：1
- 2011年
- 背景:目前关于干细胞体外诱导分化为肝细胞的各种方法较多,需要总结一套具有说服力的鉴定方法去验证。目的:总结干细胞经诱导分化为肝细胞鉴定方法的研究进展,使之更安全的应用。方法:应用计算机检索西方生物医学期刊及PubMed数据库1985-01/2010-06有关干细胞分离、培养及诱导分化为肝细胞的文章,检索词为"stemcells,induced,differentiation,hepatocytes,identification"等;同时检索中国期刊全文数据库2000-01/2010-06有关干细胞分离、培养诱导分化为肝细胞的文章,检索词为"干细胞,诱导,分化,肝细胞,鉴定"。共检索到文献43篇。结果与结论:干细胞具有可塑性特性,通过体外刺激因子、体内利用特定的微环境均可诱导干细胞分化为肝前体细胞和成熟肝细胞,理论上可提供丰富的肝细胞来源,为人们提供种子细胞,可以进行实验研究、临床应用。但是经诱导后的细胞是否为所预期的种子细胞需要一套科学的、系统的检测方法,根据肝细胞的诸多特性,如表面标志、合成、代谢功能可以证明。
- 李德强王人颢
- 关键词：干细胞分化肝细胞
