万美荣
- 作品数:26 被引量:61H指数:5
- 供职机构:徐州医学院更多>>
- 发文基金:江苏省高校自然科学研究项目江苏省连云港市卫生局基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和生物学特性研究被引量:2
- 2009年
- 目的探讨体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone mallow mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,并研究其生物学特性。方法取大鼠股骨和胫骨,以Fieoll密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化大鼠BMSCs,传代扩增,倒置显微镜进行细胞形态学观察,MTT法测定细胞的生长曲线,流式细胞仪细胞表面抗原。结果原代分离的BMSCs,培养48h开始贴壁,胞体由圆形变为椭圆形、多角形或短梭型;培养第12天,见胞体渐变为长梭型,并达90%单层融合;经传代扩增,细胞进一步纯化。7代以前,细胞在2d内处于潜伏期,第3天进入对数生长期,第7天进入平台期;10代后增殖速度变慢;流式细胞仪鉴定BMSCs表面抗原,CD44、CD90、CD34阳性率分别为99.62%、95.13%、2.06%。结论Ficoll密度梯度离心法结合贴壁法有效分离纯化大鼠BMSCs,且细胞生长稳定,增值能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性。
- 荣良群叶英曾因明刘福民戴如飞万美荣
- 关键词:骨髓间充质干细胞体外分离培养
- 不同来源血清体外培养骨髓间充质干细胞的研究被引量:7
- 2009年
- 目的适当的血清浓度可维持骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的体外培养,而不同来源的血清对BMSCs的培养效果是否不同。本研究探讨自体血清、脐带血清、AB血清、胎牛血清在体外培养人BMSCs的可行性。方法Ficoll密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化人BMSCs,在培养过程中分别加入自体血清、脐带血清、AB血清、胎牛血清,观察比较细胞形态、表面抗原、生长曲线及各组在诱导剂作用下表面抗原和诱导分化的相关性。结果从BMSCs的形态学、生长曲线、表面抗原、诱导分化上看各组无明显差异,生长状况良好。结论自体血清、脐带血清、AB血清、胎牛血清均可维持BMSCs的体外培养,而白体血清解决异种和异体血清带来的一些潜在的风险,更为安全。
- 戴如飞叶英曾因明荣良群万美荣
- 关键词:骨髓间充质干细胞自体血清体外分离培养
- 非同源脑脊液诱导非同源间充质干细胞分化为神经干细胞的对比研究被引量:4
- 2013年
- 寻找一种符合患者治疗需求的干细胞获取模式,从而进一步推动神经干细胞广泛应用于临床。本实验采用志愿者、患者脑脊液体外诱导异体脐血源间充质干细胞(UMSCs)和患者骨髓源间充质干细胞(BMSCs)分化为神经干细胞,并采用形态学、流式细胞分析、免疫组化、荧光免疫组化法等方法对诱导后的细胞进行签定;同时,记录各诱导组获得临床可用神经干细胞所需的时间及细胞数计数。结果证实各组均可使间充质干细胞(MSCs)定向分化为神经干细胞,所获得的细胞数亦可满足临床需要,但在所需的天数及具体获得细胞数量上各组间有一定差异,其中以患者BMSCs用自愿者脑脊液诱导组所获得神经干细胞计数最高,且其所需时间最短。
- 任超刘小云万美荣耿德勤葛巍李金梅张伟伟
- 关键词:骨髓脐血间充质干细胞脑脊液神经干细胞
- 再生障碍性贫血血小板功能及血小板相关抗体联合检测
- 1997年
- 再生障碍性贫血血小板功能及血小板相关抗体联合检测徐州医学院附属医院(221002)鹿群先潘秀英万美荣河南省永城县医院(476600)刘翠英鹿照荣我们对102例再障患者进行血小板功能及血小板相关抗体(Ig)(PAIgG、PAIgM、PAIgA、PAC3...
- 鹿群先潘秀英万美荣刘翠英鹿照荣
- 关键词:再生障碍性贫血血小板功能抗体检测
- 自体骨髓间充质神经干细胞移植治疗脑梗死的疗效观察被引量:16
- 2014年
- 目的探讨自体骨髓间充质神经干细胞移植治疗脑梗死的疗效及安全性。方法选取2010年12月至2012年12月在我院治疗的脑梗死患者58例,采用随机数字表法分为对照组和移植组,每组29例。2组患者均给予常规药物治疗及康复干预;移植组在此基础上辅以自体骨髓间充质神经干细胞移植治疗,首先抽取移植组患者骨髓并分离、培养骨髓间充质神经干细胞,待培养细胞达到治疗要求时进行神经干细胞移植治疗,共进行4次细胞移植治疗,每次间隔5~10d。于治疗前、治疗4周、治疗后3个月时分别采用神经功能缺损评分量表(CNS)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Fugl—Meyer运动功能评定量表(FMA)及改良Barthel指数(MBI)评分对2组患者神经功能、肢体运动功能及日常生活活动(ADL)能力进行评定。结果经治疗4周及治疗后3个月时,发现2组患者CNS、NIHSS、MBI、上肢FMA及下肢FMA评分均较治疗前明显改善,并且治疗4周及治疗后3个月时移植组患者CNS评分[分别为(26.20±1.39)分、(17.14±1.64)分]、NIHSS评分[分别为(11.52±1.23)分、(9.51±1.05)分]、MBI评分[分别为(53.55±1.75)分、(60.09±2.17)分]、上肢FMA评分[分别为(34.60±2.08)分、(48.49±2.76)分]及下肢FMA评分[分别为(23.70±2.05)分、(30.41±2.32)分]改善幅度均显著优于对照组水平,组间差异均具有统计学意义(P〈0.05);并且治疗过程中未发现移植组患者出现严重不良反应。结论自体骨髓间充质神经干细胞移植可促进脑梗死患者神经功能恢复,且治疗过程中未发现明显不良反应,安全性较好。
- 刘定华韩伯军洪珊珊王庆广杜春艳高恒韩兰秀万美荣叶英
- 关键词:脑梗死自体
- WWOX基因转染对卵巢上皮性癌细胞生长的影响被引量:5
- 2008年
- 目的 研究抑癌基因WWOX对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生长的影响,寻求卵巢癌基因治疗的新途径。方法 将携有WWOX基因的真核表达载体体外转染卵巢癌细胞系H08910细胞(重组质粒组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染空载质粒(空质粒组)及未经转染(空白对照组)的H08910细胞作为对照,用蛋白印迹法检测重组质粒组细胞中WWOX蛋白的表达情况。体外实验:分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、体外侵袭实验、琼脂克隆形成实验及流式细胞仪等分析WWOX基因对H08910细胞生物学活性的影响。体内实验:将转染细胞接种于BALB/c裸鼠腹腔,观察裸鼠生存时间和肿瘤生长情况。结果 (1)重组质粒组细胞中WWOX蛋白能稳定表达,空质粒组及空白对照组细胞未检测到WWOX蛋白的表达。(2)MTT比色法检测显示,重组质粒组各时间点的细胞增殖能力较空质粒组及空白对照组明显下降,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(3)重组质粒组细胞的琼脂克隆形成率(19.8%)明显低于空质粒组(54.5%)及空白对照组(56.0%),差异有统计学意义(P〈0.05)。(4)流式细胞仪检测显示,重组质粒组中(72.08±o'39)%的细胞被阻滞于G0/G1期,分别与空质粒组[(41.02±1.08)%]及空白对照组[(39.31±0.67)%]比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(5)体外侵袭实验显示,重组质粒组穿膜细胞数为(89.7±3.1)个,分别与空质粒组[(91.2±1.3)个]及空白对照组[(91.4±1.3)个]比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。(6)裸鼠体内实验表明,重组质粒组裸鼠体内的成瘤能力(包括转移灶数目、转移灶重量及移植瘤最大直径、腹水量)明显低于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 抑癌基因WWOX可干扰卵巢癌细胞的细胞周期并�
- 闫洪超薛加强陆晓媛万美荣冯霞刘小云
- 关键词:氧化还原酶类基因肿瘤抑制转染
- 急性巨核细胞白血病5例
- 1989年
- 报告5例经血液,骨髓细胞学及骨髓活体组织病理检查证实为急性巨核细胞白血病(AMgL),同时骨髓活体组织检查亦符合急性骨髓纤维化(AMF)并对其诊断、治疗、预后予以讨论。
- 何徐彭潘秀英田兆嵩万美荣鹿群先
- 关键词:白血病骨髓纤维化
- FL与SCF、IL-3、GM-CSF及EPO协同调控脐血造血干/祖细胞的体外扩增被引量:1
- 2001年
- 目的 探讨造血细胞因子的不同组合对脐血造血干 /祖细胞的扩增作用。方法 应用免疫磁珠法分离纯化脐血CD3 4+ 造血干 /祖细胞 ,在体外液体培养体系中经各种不同细胞因子组合扩增 1周 ,用流式细胞仪检测CD3 4+ 造血干 /祖细胞并进行甲基纤维素法半固体培养 2周 ,在倒置显微镜下计数集落产率。结果 在FL、SCF、IL 3、GM CSF、EPO造血细胞因子的不同组合下脐血造血干 /祖细胞得以扩增 ,以IL 3+SCF +FL +EPO组的扩增效率最高 ,其有核细胞数、CD3 4+ 细胞及CFU GM、BFU E集落分别扩增 46 2± 175、3.47± 1.6 4、2 6 4± 10 5和 12 8± 6 7倍。结论 FL对扩增CD+ 3 4细胞具有较强的协同作用 ,合理的细胞因子组合扩增的脐血造血干 /祖细胞可成为异基因造血干细胞移植的主要来源。
- 孙海英徐开林嵇月红万美荣潘秀英盛瑞兰
- 关键词:体外扩增
- WWOX基因转染后对卵巢上皮性癌细胞周期的调控
- 2010年
- WWOX基因是2000年由Bednarek等^[1]应用鸟枪基因测序技术(shot gun sequencing)分离并鉴定出的新的抑癌基因。国内外学者对WWOX基因在卵巢上皮性癌(卵巢癌)发生、发展中的作用进行了一些初步研究^[2-3],但其具体作用机制尚不明确。
- 闫洪超张铮铮吴晓燕万美荣刘小云
- 关键词:WWOX基因癌细胞周期基因转染基因测序技术
- 淫羊藿总黄酮对骨水泥微粒刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:探讨淫羊藿总黄酮对人工关节无菌性松动的防治作用机理。方法:运用MTT法检测骨水泥微粒刺激巨噬细胞(macrophage)后的自分泌物对巨噬细胞本身的影响,同时分别应用酶联免疫法及RT-PCR法检测淫羊藿总黄酮对骨水泥微粒刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)水平的影响。结果:骨水泥微粒刺激巨噬细胞的分泌物对巨噬细胞自身有一定的促增殖作用,并且具有一定的剂量依赖性,而RT-PCR及ELISA法则从基因转录、蛋白分泌方面证实淫羊藿总黄酮对骨水泥微粒刺激巨噬细胞具有抑制作用。结论:骨水泥微粒可刺激巨噬细胞TNF-αmRNA的表达并分泌TNF-α,而淫羊藿总黄酮能有效地抑制单核细胞TNF-αmRNA的表达,并通过下调其表达来达到抑制TNF-α的这种分泌,从而对人工关节的松动可能起到防治作用。
- 程兆明张学康魏入帅孙承庄寇剑铭万美荣郭开今
- 关键词:淫羊藿总黄酮人工关节假体松动骨溶解