肖华
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 高温α-淀粉酶在黄姜皂苷元提取中的应用研究
- 本研究对高温α-淀粉酶在黄姜皂苷元提取过程中的作用进行了简单分析,确定了高温α-淀粉酶作用的最适条件为：pH5,温度90℃,高温α-淀粉酶的用量为25U/g,反应时间为60min.在该条件下高温α-淀粉酶对黄姜中淀粉的水...
- 肖华李玉别松涛刘晓光路福平
- 关键词：高温Α-淀粉酶高效液相色谱法
- 黑曲霉胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究被引量：5
- 2015年
- 利用硫酸铵盐析、Superdex 200凝胶柱层析等步骤,从黑曲霉发酵液中纯化得到两种β–葡萄糖苷酶蛋白,其相对分子质量分别为1.15×105和7.0×104左右,比活力分别为62.1,U/mg（相对分子质量约为1.15×10^5）和53.0,U/mg（相对分子质量约为7.0×10^4）,纯化倍数分别为1.54和1.31,回收率分别为19.6%,和19.1%,β–葡萄糖苷酶最适水解p H为4.6,最适反应温度为50~55,℃.在p H 4.2~4.8、温度40~60,℃下均能保持稳定.Mn2＋、Mg2＋和K＋对β–葡萄糖苷酶有不同程度的激活作用,而Ca^2＋、Fe^3＋、Zn^2＋、Cu^2＋和Fe^2＋会抑制β–葡萄糖苷酶的酶活,Na＋和Ba2＋对β–葡萄糖苷酶活力影响不明显.以p NPG为底物时,该酶的Km和vmax分别为2.33,mmol/L与3.14,mmol/（L·min）.
- 徐星肖华黄琳琳别松涛
- 关键词：分离纯化黑曲霉
- 蔗糖异构酶突变菌株的构建及其应用研究被引量：4
- 2015年
- 蔗糖异构酶是糖苷水解酶13家族的重要成员,可以异构化蔗糖生成异麦芽酮糖和海藻酮糖,同时水解生成少量的葡萄糖和果糖。通过定点突变法对土壤发散菌来源的蔗糖异构酶基因进行定点突变,在大肠杆菌中实现异源表达,获得3例突变菌株R-M1(Q299E),R-M2(Q299D),R-M3(Q299N)。R-M1转化蔗糖的产物当中,异麦芽酮糖的比例从90.28%升至93.16%,海藻酮糖比例从3.09%降低到1.79%。对突变菌株R-M1游离细胞转化蔗糖底物的条件进行了优化,确定了最适转化条件为:30℃条件下,投入浓度为8×109cfu/m L的细胞到蔗糖浓度为50%的10 m L的磷酸柠檬酸缓冲液中,反应90 min,可实现蔗糖最大程度的转化,麦芽酮糖产物浓度达到460 mg/m L。
- 滕菲肖华王宁鹤李玉路福平
- 关键词：异麦芽酮糖
- 黑曲霉果糖基水解酶的重组表达及酶学特征分析被引量：5
- 2017年
- 目的:果糖基转移酶在新型果糖基衍生品的制备过程中具有重要作用,获得酶活高、性能优良的果糖基水解酶是关键。方法:利用MEGA 4.0以及Clustal X2等软件对黑曲霉的基因组进行分析,遴选了5个果糖基水解酶基因,接着将它们在毕赤酵母中进行了克隆表达,并研究了重组酶的酶学性质。结果:在摇瓶水平上,重组酶Fru1和Fru5的酶活分别为1360和1560 U/m L,远高于目前已报道的果糖基水解酶的酶活。重组酶Fru1的最适反应温度和p H分别为45℃和5.5,EDTA对它有微弱的促进作用,Fe^(2+)、Na+、Co^(2+)、Cu^(2+)和Ca^(2+)会轻微地抑制酶活,该酶对蔗糖既有水解作用,又有转苷活性,还可以水解菊粉中的二糖到五糖;重组酶Fru5的最适反应温度和p H分别为50℃和5.0,Li^+、Na^+和EDTA对其酶活有促进作用,但Fe^(2+)则强烈抑制酶的活性,它还可以水解蔗糖以及菊粉中几乎所有的大分子糖。结论:本研究为果糖基水解酶的工业化生产及其在新型果糖基衍生品制备过程中的应用提供了可能途径。
- 董自星肖华王静培张志萌王君路福平
- 关键词：黑曲霉酶学性质
