赵世华
- 作品数:7 被引量:10H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 2014年
- 为建立马动脉炎病毒(EAV)的快速检测方法,本实验以EAV N蛋白单克隆抗体(MAb)2B9为捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的EAV N蛋白MAb 2B3(HRP-2B3)为检测抗体,建立EAV双抗体夹心ELISA检测方法。结果显示,该方法的最佳工作条件为:MAb 2B9的包被浓度为2μg/mL,HRP-2B3的工作浓度为2μg/mL,以OD450nm≥0.124为阳性判定标准。该方法对马传染性贫血病毒、马疱疹病毒I型和IV型、马流感病毒等均无交叉反应,特异性好;最低检出限为病毒标准品200倍稀释(103.2TCID50),敏感性高。3次重复试验建立的标准曲线的相关系数(R2)均大于0.997。本实验建立的EAV双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、敏感性高等优点,适于EAV的快速检测。
- 胡月戚亭赵世华关平原王晓钧
- 关键词:马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA单克隆抗体
- 新疆马病毒性动脉炎的血清学调查被引量:7
- 2013年
- 为搞清马病毒性动脉炎在新疆昭苏县的流行情况,本实验采用法国进口马病毒性动脉炎间接ELISA诊断试剂盒对来自新疆4个地区的435份马血清样品进行检测结果显示,有2份血清检测为阳性,阳性率为1.26%。其中伊犁种马场,昭苏种马场和哈密伊吾县送检血清均为阴性,巴州和静县检出2份阳性血清。目前该病在我国还没有分离到病毒的相关报道,本次流行病学调查研究,对于该病在我国新疆地区的流行现状具有重要的指导意义。
- 阿依吐拉·肉孜赵世华盛卓君阿孜古丽美热木古丽居马别克王文相文华
- 关键词:马病毒性动脉炎血清学调查
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定
- 2013年
- 为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA反应后,针对表位序列11 ASFRNGRRRQPTSYND26,进一步通过合成短肽对2株MAbs进行精确定位;结果表明,2B3识别的抗原表位为18 RRQPTSYND26,2B9针对的抗原表位为18 RRQPTSYND26。本研究结果为建立EVA的血清学检测方法及研究N蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 赵世华戚亭郭巍田志革朱超相文华
- 关键词:马动脉炎病毒单克隆抗体表位
- 新疆地区2011~2012年马病毒性动脉炎的血清学调查被引量:1
- 2016年
- 本实验采用法国进口马病毒性动脉炎间接ELISA诊断试剂盒对来自新疆4个地区的435份马血清样品进行检测,结果显示,有2份血清检测为阳性,阳性率为1.26%。其中伊犁种马场、昭苏种马场和哈密伊吾县送检血清均为阴性,巴州和静县检出2份阳性血清。目前该病在我国还没有分离到病毒的相关报道,本次流行病学调查研究,对于该病在我国新疆地区的流行现状具有重要的指导意义。
- 阿依吐拉.肉孜赵世华盛卓君美热木古丽居马别克王文阿孜古丽相文华
- 关键词:马病毒性动脉炎血清学调查
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备被引量:1
- 2012年
- 为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。
- 赵世华戚亭郭巍李红梅王贵宾刘翠云仇铮田志革王征卢刚潘佳亮相文华
- 关键词:马动脉炎病毒核衣壳蛋白单克隆抗体
- 检测马疱疹病毒4型抗体间接ELISA方法的建立及应用被引量:1
- 2014年
- 为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒1型(EHV1)阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。
- 田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟
- 关键词:间接ELISA
- 马疱疹病毒1型抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2013年
- 以原核表达的具有型特异性抗原表位的马疱疹病毒1型(EHV1)gG蛋白作为检测抗原,经条件优化,成功建立了检测EHV1抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性及重复性试验。结果表明:重组EHV1gG蛋白仅与EHV1阳性血清发生反应,不与EHV4阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测结果比较,两者的阳性和阴性符合率均达到90%以上。表明,建立的间接ELISA方法可以用于检测EHV1抗体。
- 田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟
- 关键词:间接ELISA