田志革
- 作品数：27 被引量：41H指数：4
- 供职机构：黑龙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中央高校基本科研业务费专项资金国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学经济管理更多>>
- 新疆地区马鼻肺炎血清学调查被引量：8
- 2013年
- 本文应用ELISA方法对新疆地区6个县市的马进行鼻肺炎血清学调查,共采集血清1 484份;结果显示,6个县市均查出马鼻肺炎感染阳性马,最低感染率仅为1.99%,最高感染率达51.69%,新疆西部地区疫情较为严重。本研究结果为新疆地区马鼻肺炎的防治提供了可参考数据。
- 阿依吐拉·肉孜阿孜古丽肖开提马伟田志革林汉亮
- 关键词：马鼻肺炎流行病学调查
- 黑龙江省番茄灰霉病病原菌的分离与鉴定被引量：5
- 2018年
- 为了对病原菌进行形态学观察及ITS序列鉴定,以黑龙江省齐齐哈尔市某温室中疑似感染番茄灰霉病的番茄植株叶片为试材,采用组织分离方法,分离并纯化病原菌。结果表明,共分离到4株病原菌,根据形态学特征及ITS序列系统进化分析结果,明确了引起番茄灰霉病的病原菌为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)。
- 田志革李文枫陈立新毕洪文黄峰华吴立成
- 关键词：番茄灰霉病灰葡萄孢
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。
- 赵世华戚亭郭巍李红梅王贵宾刘翠云仇铮田志革王征卢刚潘佳亮相文华
- 关键词：马动脉炎病毒核衣壳蛋白单克隆抗体
- 马疱疹病毒1/4型双重PCR分型检测方法的建立
- 本试验成功建立了分型检测EHV-1、EHV-4的双重PCR方法，该方法具有良好的特异性及敏感性，可在短时间内获得检测结果，为快速准确检测现地样品提供技术平台。并在初步的马鼻肺炎抗原监测中得到了有效的应用。
- 郭巍田志革王晓钧相文华
- 关键词：抗原检测基因组序列病理诊断
- 文献传递
- 野鸭源6型副黏病毒V蛋白在DF-1细胞中的定位
- 2014年
- 为了研究副黏病毒V蛋白在DF-1细胞中的表达及定位情况,试验采用2011年对吉林省某湿地野鸭进行流行病学监测时分离、鉴定出的1株6型禽副黏病毒(APMV6),分析该病毒的全基因组序列,并通过融合PCR方法扩增V基因片段,并将该片段与pCDNA3.1载体连接,获得pCDNA-6V重组表达质粒,转染DF-1细胞,经Western-blot分析和激光共聚焦显微镜观察。结果表明:pCDNA-6V融合蛋白在DF-1细胞中获得表达,且主要分布于细胞质中。说明副黏病毒V蛋白定位于宿主细胞质中。
- 田志革柴洪亮李凤勇孙晶华育平
- 关键词：天然免疫
- 马疱疹病毒糖蛋白G基因C-末端的原核表达被引量：3
- 2012年
- 为获得马疱疹病毒1型(EHV1)和4型(EHV4)糖蛋白G(gG),对克隆载体pMD-1gG和pMD-4gG分别进行BamHⅠ+SalⅠ和EcoRⅠ+HindⅢ双酶切,将所得片段分别插入表达载体pGEX-6P-1和pET28a(+)中,构建了重组质粒pGEX-1gG和pET-4gG。经双酶切和序列鉴定为阳性后,将重组质粒pGEX-1gG转化入大肠杆菌BL21(DE3)、重组质粒pET-4gG转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达后对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,分别在35和17ku处出现与预期大小相符的目的条带。Western-blot结果证实,目的蛋白均具有良好的反应原性。表明,成功实现了EHV1gG和EHV4gG蛋白的正确表达,初步鉴定其具有良好的反应原性。
- 田志革郭巍相文华曲娟娟
- 关键词：原核表达
- 野鸭源新城疫病毒V蛋白基因在DF-1细胞中的表达及V蛋白的亚细胞定位被引量：2
- 2014年
- 为研究野鸭新城疫病毒V蛋白基因在真核细胞中的表达及V蛋白的亚细胞定位,将新城疫病毒V基因片段与pcDNA3.1载体连接,构建pcDNA3.1-V重组表达质粒,经脂质体转染DF-1细胞后,用Western-blot验证该基因在DF-1细胞中的表达;用激光共聚焦显微成像技术确定V蛋白在真核细胞中的分布及亚细胞定位。结果显示,重组质粒pcDNA3.1-V在外源真核细胞DF-1中获得了表达,表达蛋白主要聚集于细胞质。研究结果为进行野鸭源新城疫病毒V蛋白的功能研究奠定了基础。
- 田志革柴洪亮李凤勇孙晶华育平
- 关键词：野鸭新城疫病毒
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定
- 2013年
- 为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA反应后,针对表位序列11 ASFRNGRRRQPTSYND26,进一步通过合成短肽对2株MAbs进行精确定位;结果表明,2B3识别的抗原表位为18 RRQPTSYND26,2B9针对的抗原表位为18 RRQPTSYND26。本研究结果为建立EVA的血清学检测方法及研究N蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 赵世华戚亭郭巍田志革朱超相文华
- 关键词：马动脉炎病毒单克隆抗体表位
- 马鼻肺炎病毒双重PCR分型检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 根据GenBank中登录的马鼻肺炎病毒1、4型(EHV1、EHV4)糖蛋白B(gB)基因特异保守序列(登录号分别为AY665713、AF030027.1),各设计1对引物,建立了同时分型检测EHV1、EHV4的双重PCR方法;确定其最佳工作条件,并对该方法进行了特异性和敏感性试验。结果显示,在EHV1、EHV4中分别扩增出265bp和537bp的特异性目的条带,而马流感病毒cDNA、马动脉炎病毒cDNA、马乙型脑炎病毒cDNA及马传染性贫血弱毒疫苗株cDNA均未扩增出任何条带。EHV1的DNA最低检出限为2.1pg,EHV4的最低检出限为15pg。表明本试验建立的方法具备很高的应用价值。
- 田志革侯玉杰郭巍曲娟娟相文华
- 关键词：分型检测
- 一株新型马疱疹病毒的分离和鉴定
- 本研究收集了从2008-2010年，黑龙江、辽宁、内蒙古、新疆、北京、武汉和广州共2724份马血清样品，应用ELISA方法进行EAV抗体的检测。实验结果显示，平均血清阳性率为13.28%，最高的三个省份或地区为黑龙江32...
- 郭巍刘翠云王征田志革王晓钧相文华
- 关键词：疫苗免疫抗体检测
- 文献传递
