白芳
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
- 供职机构:深圳大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程理学生物学更多>>
- HPLC-PAD法优化乌骨鸡活性肽分离纯化被引量:1
- 2019年
- 乌骨鸡是一种具有药用价值的鸡种,乌骨鸡的鸡肉蛋白通过酶促水解后可获得多肽产物乌骨鸡活性肽,营养价值高,分离纯化活性肽是研究乌骨鸡应用价值的基础。利用装置C18反相色谱柱或TSKgel凝胶色谱柱的高效液相色谱仪进行乌骨鸡活性肽的分离优化,针对流动相、流速进行优化的同时,参考波长、进样量,以出峰数为主,结合分离度等考察分离效果。结果表明:C18柱的出峰数随甲醇含量及流速的降低而增加;三氟乙酸或磷酸盐作缓冲液时出峰数基本一致,但分离度不同;综合因素得pH 6.0磷酸盐/6%甲醇/水体系的流动相、0.2 mL/min的流速为该实验下的最佳分离条件。TSKgel柱的乙腈分离效果优于甲醇,梯度洗脱效果较好;综合因素得出0.1%三氟乙酸/(10%~25%)乙腈/水体系的流动相、0.5 mL/min的流速为该实验下的最佳分离条件。
- 白芳李映红李映红吴正治
- 关键词:乌骨鸡活性肽HPLCPAD
- 乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究
- 利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭吸附酶解液制备乌鸡肽,HPLC法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、Nano LC-MS/MS技术鉴定其组成成分.结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比...
- 白芳李映红吴正治黄飞娟
- 关键词:氨基酸相对分子质量
- 兔源性Ⅱ型prM多抗对Ⅰ型登革病毒无增强活性的中和作用被引量:4
- 2017年
- 目的从Ⅰ型登革病毒(dengue virus,DENV)感染患者血清中分离病毒,并探究Ⅱ型登革病毒prM多抗对该病毒体外感染细胞的影响。方法用C6/36细胞分离并扩大培养Ⅰ型登革患者血清中的登革病毒,根据细胞病变收取病毒,空斑实验测定病毒滴度。免疫荧光、流式细胞术及qRT-PCR检测病毒对细胞的感染,空斑减少中和实验和抗体依赖增强感染实验测定Ⅱ型登革病毒prM抗体对病毒的中和及增强活性。结果分离扩大培养了一株Ⅰ型登革病毒,滴度达到8×10~7pfu/m L。登革病毒可以在K562细胞复制增值,ana-1细胞可以主动吞噬病毒但病毒在此细胞内不复制。0.1、1μg/m L的多抗与病毒孵育后感染BHK细胞产生的空斑数与未加入抗体的空斑数相比,差异有统计学意义(P<0.001)。另外,prM多抗并没有增加登革病毒对K562细胞的感染。结论成功扩大培养DENVⅠ毒株,体外实验结果证明兔源性prM多抗是一种无增强活性的中和型抗体。
- 王淼阳帆黄达娜黄亚兰吴春利王超白芳黄柏诗张仁利
- HPLC-PAD法优化乌骨鸡活性肽的分离纯化研究
- 利用装置C18反相色谱柱或TSKgel凝胶色谱柱的高效液相色谱仪进行乌骨鸡活性肽的分离条件优化,针对流动相、流速进行优化的同时参考波长、进样量,以出峰数为主结合分离度等考察分离效果.结果如下,C18柱:随甲醇含量及流速的...
- 白芳李映红吴正治黄飞娟
- 奇异变形杆菌感染Caco-2细胞模型的建立
- 2017年
- 目的建立奇异变形杆菌感染人克隆结肠腺癌细胞Caco-2的细胞模型,比较不同来源奇异变形杆菌感染Caco-2细胞的致病性特征。方法活细胞动态观察优化奇异变形杆菌感染Caco-2细胞的感染条件,采用台盼蓝细胞膜通透性检测、稀释平板计数、吉姆萨(Giemsa)染色及透射电子显微镜观察不同来源奇异变形杆菌感染Caco-2细胞后细胞形态学及胞内感染情况的变化,评价该模型中不同来源奇异变形杆菌侵入细胞的特点和病理损伤规律。结果不同来源奇异变形杆菌感染Caco-2细胞的最佳感染复数(MOI)均为100∶1,感染时间均为2 h。致腹泻奇异变形杆菌C02011感染Caco-2细胞的细胞膜通透性改变,黏附率为(0.647±0.038)%,侵袭率为(0.261±0.005)%。健康人群体检株奇异变形杆菌B02005的细胞膜通透性出现轻微受损,黏附率为(0.975±0.030)%,侵袭率为(0.134±0.003)%。尿道分离奇异变形杆菌标准株ATCC29906的黏附率为(0.303±0.027)%,侵袭率为(0.104±0.003)%,并未发现Caco-2的细胞膜发生变化。吉姆萨染色和透射电子显微镜观察与上述方法结果一致,说明了不同来源奇异变形杆菌感染Caco-2细胞的致病性不同(P<0.05);同时,透射电子显微镜实验也验证了细胞模型的成功建立。结论成功构建奇异变形杆菌感染Caco-2的细胞模型,并分析了不同来源奇异变形杆菌的致病性特征。
- 白芳龚泽龙左乐王淼石晓路袁建辉
- 关键词:奇异变形杆菌CACO-2细胞模型透射电子显微镜
- 奇异变形杆菌VirB9基因功能研究
- 在前期研究中,本课题组首次发现:具有强致腹泻能力的奇异变形杆菌C02011株含有VirB型IV型分泌系统(T4SS)。亲缘关系谱分析表明,此结构与肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌T4SS毒力岛上的VirB最为相近。我们结合前期...
- 白芳
- 关键词:奇异变形杆菌细胞模型动物模型
- 文献传递
- 乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究被引量:5
- 2019年
- 探讨乌鸡肽的营养成分及功能,为其深度开发打下基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭脱色法制备乌鸡肽,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、纳升级液相色谱串联质谱(Nano liquid chromatography tandem mass spectrometry,Nano LC-MS/MS)技术鉴定其组成成分。结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比例为1.74%,总氨基酸含量较高者为Leu、Ala、His、Pro、Met和Phe,游离氨基酸含量较高者为Glu、Pro、Asp、Arg、Gly和Ala;相对分子质量分布范围为0至6 918 Da,其中1 084 Da以下的比例达到88.91%;Nano LC-MS/MS鉴定出源于107种蛋白质的2 287种肽段序列,其中种类最为丰富的蛋白为参与骨骼肌修复的蛋白及酶类。该研究较为全面的分析乌鸡肽的营养成分,并表征了其功能,为乌鸡肽的潜在应用价值研究打下基础。
- 白芳李映红李映红黄飞娟
- 关键词:氨基酸相对分子质量