翟晓晨
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向EGFR免疫毒素BI7D12-PE38KDEL的制备及其体外活性测定被引量：3
- 2017年
- 目的:构建基于EGFR纳米抗体的免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,并检测其对EGFR肿瘤细胞的细胞毒作用。方法:采用分子克隆技术,将靶向EGFR的纳米抗体7D12以二价的形式,通过柔性连接肽(G4S)4与铜绿假单胞菌外毒素的截断形式PE38KDEL连接,构建原核表达载体p ET28a-BI7D12-PE38KDEL。然后将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达。通过镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并经Western blot验证。通过流式细胞技术检测该免疫毒素与EGFR阳性细胞A549、HT29、MCF-7和EGFR阴性细胞CEM、Jurkat的结合能力后,将其按照一定的浓度梯度进行细胞毒实验研究,72 h后,使用WST-1试剂检测BI7D12-PE38KDEL对上述细胞的杀伤效果。结果:通过SDS-PAGE和Western blot实验验证,成功的制备了重组免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,该毒素大部分以可溶性的方式表达。BI7D12-PE38KDEL能够与EGFR阳性的A549、HT29、MCF-7肿瘤细胞特异性的结合,并且对上述细胞的细胞毒作用与阴性对照组CEM和Jurkat相比具有极其显著性差异(P<0.01)。结论:成功地构建了基于EGFR纳米抗体的重组免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,该免疫毒素能特异性的结合并杀伤EGFR阳性的肿瘤细胞。
- 毛春燕安钢力王祥岭翟晓晨孟会敏游凤涛杨林
- 关键词：表皮生长因子受体免疫毒素
- 三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤保护机制的研究进展被引量：12
- 2016年
- 三七总皂苷(panax notoginsenosidum,PNS)具有增加脑血流量,改善微循环和抗血小板聚集等作用,在临床上广泛用于脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的治疗。目前研究认为,三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤的保护机制涉及其对自由基及脂质过氧化物、细胞凋亡、钙通道、神经元损伤、相关信号通路蛋白表达等多方面作用。这些结果为三七总皂苷的合理开发和应用提供了充分的科学依据。笔者对近年来国内外有关文献进行了检索和分析,现对三七总皂苷保护脑缺血/再灌注损伤机制的研究进展予以综述。
- 翟晓晨吴捷
- 关键词：三七总皂苷
