陈岺曦
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理更多>>
- GW3965在Raji细胞中对BLyS表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXRs)的特异性激动剂GW3965在Raji细胞中对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)表达的影响。方法 MTT法检测不同浓度的GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)对Raji细胞活性的影响,观察时间为加入GW3965共孵育后24 h。用LXR的特异性激动剂GW3965刺激人B细胞淋巴瘤株Raji细胞,经RT-PCR检测LXR特异性靶基因三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette,ABCA1)mRNA的表达;经RT-PCR和Western blot检测BLyS的表达。结果对照组1‰DMSO D(492)为(0.632±0.055),0.5、5μmol/L和10μmol/L的GW3965 D(492)为(0.609±0.073)、(0.612±0.052)和(0.628±0.055)。LXR的特异性配体GW3965对细胞活性无影响(P>0.05)。GW3965作用于Raji细胞后,ABCA1 mRNA表达剂量依赖性上调,LXR活化后可在转录和翻译水平剂量依赖性下调抑制BLyS的表达。结论 LXR在Raji细胞中可抑制BLyS的表达。
- 黄艳黄刚胡长江曾益军许志臻陈岺曦何凤田宋方洲
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子RAJI细胞
- 二氯乙酸盐激活ROS-JNK通路增强索拉非尼对肝癌细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2019年
- 目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与索拉非尼(sorafenib)联合使用对肝癌细胞Hep3B增殖抑制的效果及可能机制。方法将Hep3B细胞分为对照组(DMSO)、DCA处理组(5 mmol/L)、索拉非尼处理组(10μmol/L)和联合组(5 mmol/L DCA联合10μmol/L索拉非尼)4个组,处理24 h后,在显微镜下观察各组细胞形态;采用CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;通过Western blot检测凋亡相关蛋白PARP的表达和p-JNK的水平;采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞ROS的变化;用流式细胞仪检测加入抗氧化剂和阻断JNK通路后的细胞凋亡的变化。结果 DCA和索拉非尼联合处理24 h能够显著改变细胞形态,杀伤细胞。与对照组和单独用药组比较,联合组显著增强对肝癌Hep3B细胞的增殖抑制效果(P<0.05),明显增加Hep3B细胞中PARP的剪切与JNK的磷酸化水平,胞内ROS水平也明显升高;联合使用抗氧化剂NAC可显著抑制DCA和索拉非尼处理导致的JNK磷酸化水平升高和对Hep3B细胞的增殖抑制效果。结论 DCA和索拉非尼联合使用可显著抑制肝癌细胞Hep3B的增殖,其机制可能与激活ROS-JNK通路有关。
- 孙梁博姚洁李涛陈岺曦陈岺曦闫小晶何凤田
- 关键词：二氯乙酸盐索拉非尼肝癌细胞增殖
- 三结构域蛋白21通过下调自噬相关蛋白4B抑制肝细胞癌细胞增殖的实验研究被引量：7
- 2019年
- 目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在HepG2细胞中过表达TRIM21,并在SMMC7721细胞中敲低TRIM21;CCK-8和细胞克隆形成实验分别检测过表达和敲低TRIM21对HepG2和SMMC7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的情况;Western blot检测TRIM21对自噬相关蛋白4B(autophagy related 4B,ATG4B)水平的影响;分别在HepG2细胞中下调ATG4B表达和在SMMC7721细胞中过表达ATG4B,CCK-8检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 TRIM21在HCC组织中的表达水平较正常肝组织显著下调(n=49,P<0.05);在HepG2细胞中过表达TRIM21能显著降低细胞存活率(P<0.01)、抑制细胞增殖(P<0.01),在SMMC7721细胞中下调TRIM21的表达能显著增加细胞存活率(P<0.05)、促进细胞增殖(P<0.05)。过表达或敲低TRIM21对HCC细胞凋亡影响不明显;TRIM21在HCC细胞中可以抑制ATG4B的表达;而在HCC细胞中过表达或下调ATG4B也可以发挥促进或抑制细胞增殖的效果(P<0.05),ATG4B影响HCC细胞增殖的机制主要是改变细胞周期进程。结论 TRIM21在HCC中可通过下调ATG4B而抑制细胞增殖。
- 李涛陈岺曦陈岺曦闫小晶闫小晶连继勤
- 关键词：细胞增殖
- 生物化学与分子生物学实验教学的体会被引量：8
- 2015年
- 生物化学与分子生物学实验是生物化学课程教学的重要组成部分,是培养学生掌握基本实验技能,把所学的生化理论知识和实验内容相结合的重要手段,有助于提高学生动手实践的能力、分析解决问题的能力以及创新综合的能力。现根据几年的实验教学实践,总结了几点体会,就如何提高实验课的教学质量进行了一定的分析和探讨。
- 许志臻陈敏陈岺曦赵力连继勤何凤田
- 关键词：生物化学与分子生物学实验教学教学改革
- 激活miR-101-3p/EZH2通路增敏索拉非尼抗肝癌HepG2细胞的效果被引量：3
- 2020年
- 目的探讨激活miR-101-3p/EZH2通路在增敏索拉非尼抗肝癌HepG2细胞中的意义。方法将人肝癌细胞HepG2分成对照组(DMSO)和索拉非尼处理组(10μmol/L),处理24 h后,定量PCR检测miR-101-3p表达水平变化;生物信息学预测miR-101-3p结合的靶基因;在肝癌细胞中过表达miR-101-3p后Western blot和定量PCR检测zeste同源蛋白2增强子(enhancer of zeste homolog 2 protein,EZH2)表达水平变化;双荧光素酶报告基因实验验证miR-101-3p和EZH2的靶向关系;Western blot检测索拉非尼处理对EZH2表达水平的影响;在HepG2细胞中过表达miR-101-3p或添加EZH2抑制剂EPZ-6438后联合索拉非尼处理,CCK-8检测对HepG2细胞存活的影响。结果索拉非尼处理后HepG2细胞中miR-101-3p表达水平显著降低(P<0.05);miR-101-3p可在HepG2细胞中下调EZH2的表达(P<0.05);miR-101-3p与EZH2 mRNA 3'-UTR存在直接结合(P<0.05);索拉非尼处理后HepG2细胞中EZH2表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-101-3p或EZH2抑制剂EPZ-6438均可增加索拉非尼对HepG2细胞杀伤的敏感性(P<0.05)。结论激活miR-101-3p/EZH2通路可增敏索拉非尼的抗肝癌细胞HepG2效果。
- 张越婷肖翰希孙梁博李涛陈岺曦闫小晶何凤田连继勤
- 关键词：MICRORNA索拉非尼耐药肝癌EZH2
- 下调miR-4443/TIMP2信号通路增强HepG2细胞对索拉非尼的敏感性被引量：1
- 2021年
- 目的探讨下调miR-4443/TIMP2信号通路后肝癌HepG2细胞对索拉非尼敏感性的影响。方法将HepG2细胞分为对照组(DMSO)与索拉非尼处理组(10μmol/L),索拉非尼处理HepG2细胞24 h后,RT-qPCR检测miR-4443的变化;脂质体法将miR-4443模拟物与miR-4443抑制剂转染HepG2细胞,通过CCK-8检测转染miR-4443模拟物或抑制剂后联用索拉非尼对HepG2细胞活性的影响;生物信息学预测miR-4443的下游靶基因,索拉非尼处理24 h后通过RT-qPCR和Western blot分别检测下游靶基因TIMP2 mRNA及其蛋白水平的变化;转染miR-4443模拟物、抑制剂后,RT-qPCR和Western blot分别检测TIMP2 mRNA以及蛋白含量的变化;在HepG2细胞中通过脂质体法转染TIMP2 siRNA,Western blot检测TIMP2蛋白含量;CCK-8检测敲低TIMP2后联用索拉非尼对HepG2细胞活性的影响。结果与对照组相比,索拉非尼处理组HepG2细胞中miR-4443的含量显著降低(P<0.05);转染miR-4443模拟物可显著降低索拉非尼对细胞活性的抑制(P<0.05),而转染其抑制剂则可显著增强索拉非尼的这一作用(P<0.05);生物信息学预测结果显示miR-4443结合的下游靶基因为TIMP2;索拉非尼处理后HepG2细胞中TIMP2的mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05);而在HepG2细胞中转染miR-4443的模拟物或抑制剂则可使TIMP2的mRNA表达量相应下降或上升,转染模拟物后TIMP2蛋白表达显著降低(P<0.05),表明miR-4443与TIMP2间存在调控关系;用TIMP2 siRNA降低TIMP2表达后,可显著增强索拉非尼对HepG2细胞活性的抑制效果(P<0.05)。结论下调miR-4443/TIMP2信号通路可以增强HepG2细胞对索拉非尼的敏感性。
- 肖翰希张越婷孙梁博李涛陈岺曦闫小晶何凤田连继勤
- 关键词：索拉非尼HEPG2细胞TIMP2耐药
