赵飞
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 基于腺病毒载体的IFITM3递送及其抑制禽流感病毒感染的体外研究
- 引言近年来,新发突发病毒性传染病如H5N1/H1N1/H7N9等不同亚型流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、Zika病毒等,对人类健康造成了巨大危害。为有效应对病毒的多样性和高变异性,研制新型广谱的抗病毒制剂成为疾病防控...
- 杜寿文姜颖越曹婷婷赵飞李昌金宁一
- 文献传递
- 基于Tet-On 3G的IFITM3诱导表达MDCK细胞系的建立及功能分析被引量：1
- 2017年
- 利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFITM3^+细胞百分数及定位分析.用含萤光素酶(Luciferase)报告基因的禽流感病毒H5/H7蛋白或VSV G蛋白包裹的假型慢病毒颗粒进行感染实验,检测萤光素酶活性.结果表明,筛选获得了携带人IFITM3的MDCK诱导表达细胞系,且IFITM3表达量与Dox剂量和诱导时间相关;确定Dox工作浓度为2.5μg/mL,诱导12 h时IFITM3^+细胞数达75%以上,且IFITM3在晚期内体/溶酶体存在分布;假型病毒感染及萤光素酶活性分析表明,IFITM3可显著抑制禽流感病毒H5,H7和VSV G蛋白介导的病毒进入,为深入探究其具体的抑制机制奠定了基础.
- 曹婷婷杜寿文许汪邢彬赵飞王茂鹏朱羿龙白杰英田宇飞刘立明赵翠青周义发李昌金宁一
- 三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分别针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针。运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果。分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV。相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍。结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别。
- 曹佳媛田明尧崔卓栋柴丹范园园赵飞张艳芳金宁一
- 关键词：新疆出血热病毒拉沙病毒多重PCR
- 山羊痘病毒GTPV-AV41的TK基因缺失株构建
- 朱羿龙杜寿文王茂鹏赵飞白冰曹婷婷邸洋许汪邢彬李昌金宁一
- 发酵豆制品中乳酸菌分离及其鉴定和功能研究被引量：3
- 2016年
- 从4类中国传统发酵豆制品(臭豆腐类、腐乳类、豆瓣酱类、豆豉类)中分离出具有益生功能的乳酸菌。利用MRS液体培养基培养,通过对菌株进行耐酸、耐小牛胆盐、表面疏水性、抗氧化和降胆固醇试验,确定菌株的物理特性,同时进行16S rDNA序列的比对,最终确定分离得到了4株乳酸菌,分别命名为C1,C2,F1和F2。初步鉴定C1,C2为嗜酸乳杆菌(L.acidophilus),F1,F2为戊糖片球菌(P.pentosaceus),4株菌株均具有潜在益生功能。
- 张艳芳郭焱李昌任大勇王茂鹏姜颖越曹婷婷赵飞潘荣荣金宁一
- 关键词：发酵豆制品乳酸菌
- 表达IFITM3的重组腺病毒、其构建方法及应用
- 本发明提供一种表达IFITM3的重组腺病毒，所述重组腺病毒携带人IFITM3基因，通过将携带人IFITM3基因的重组穿梭质粒与病毒骨架质粒共转染哺乳动物细胞得到。本发明还提供所述重组腺病毒的构建方法及应用。基于本发明的表...
- 金宁一李昌杜寿文姜颖越田明尧李霄鲁会军邢彬朱羿龙赵飞曹婷婷
- 文献传递
- 牛干扰素诱导跨膜蛋白3对口蹄疫病毒感染的抑制作用
- 引言口蹄疫(Foot and Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的一种偶蹄动物所患的烈性传染病。该病传播途径多、流行范围广和传染性...
- 赵飞谭鹏杜寿文曹婷婷许汪邢彬王茂鹏朱羿龙尹逊哲李昌金宁一
- 文献传递
- 牛干扰素诱导跨膜蛋白3对口蹄疫病毒感染的抑制作用被引量：3
- 2016年
- 为了研究牛干扰素诱导跨膜蛋白3(bIFITM3)对O型口蹄疫病毒(FMDV)的抑制作用,本试验将表达bIFITM3的重组质粒pLV-bIFITM3和表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的对照质粒pLV-EGFP分别转染BHK-21细胞,通过嘌呤霉素抗性筛选获得能够稳定表达外源基因的细胞系。用O型FMDV感染稳定细胞系,通过观察细胞病变、噬斑分析和实时荧光定量PCR方法评价bIFITM3对O型FMDV感染的抑制作用。结果表明,成功筛选获得稳定表达bIFITM3与EGFP的BHK-21细胞系,bIFITM3表达后显著抑制FMDV感染BHK-21细胞,且抑制作用在病毒感染循环的早期阶段就已显现。本试验证明bIFITM3在FMDV感染中具有抗病毒作用,为口蹄疫的防控研究提供新的思路和理论依据。
- 赵飞杜寿文谭鹏曹婷婷许汪邢彬王茂鹏朱羿龙刘立明赵翠青李昌金宁一
- 关键词：口蹄疫病毒BHK-21细胞
- 牛支原体P81蛋白的表达及纯化被引量：5
- 2017年
- 目的构建3种牛支原体P81蛋白原核表达质粒,分析其在大肠埃希菌中的表达情况,并纯化P81蛋白。方法根据GenBank发表的牛支原体P81基因序列(GenBank登录号:AY627040.1),密码子优化后合成P81全基因序列。构建原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE电泳分析P81蛋白在原核表达系统中的表达情况;应用Ni-NTA对目的蛋白进行纯化。结果pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81均高效表达分子质量单位为78ku左右的P81蛋白。表达产物进行Ni-NTA亲和层析,得到纯化的P81蛋白。结论构建的重组原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81、pGEX-6P-1-P81能在大肠埃希菌中高效表达牛支原体P81蛋白,为进一步分析该蛋白的抗原性奠定了基础。
- 马海彬韩继成孙文超解长占靖杰肖朋朋赵飞张萍鲁会军金宁一
- 关键词：牛支原体原核表达蛋白纯化
- 猪肺巨噬细胞源IFN-λ1的分子克隆、表达与活性分析被引量：2
- 2018年
- Ⅲ型干扰素（interferonlambda，IFN-λ）在机体抗病毒固有免疫、适应性免疫、黏膜免疫及抗肿瘤免疫等方面发挥重要作用。本研究利用RT—PCR技术从猪肺巨噬细胞CRL2845中扩增获得猪IFN—x1基因（pIFN—λ1），并进行遗传进化分析和信号肽预测；将含信号肽的pIFNX1基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3．1中，通过常规的质粒转化、阳性茵落筛选、质粒提取及酶切鉴定，获得重组质粒pcDNA-plFNλ1；利用脂质体转染CRL2845细胞，转染48h后通过qRTPCR、Westernblot、间接免疫荧光方法分析pIFNX1表达及胞内定位；收集转染细胞总RNA，通过qRT—PCR方法分析OAS1、ISG15、PKR、WITM3等干扰素刺激基因的表达，并利用舍报告基因的痘病毒VTT—EGFP感染瞬时表达pIFN—λ1的CRL2845细胞，通过流式细胞术分析pIFN—λ1抗痘病毒效果。结果显示，成功在猪肺巨噬细胞中扩增获得pIFN—λ1基因，并在CRL2845细胞内成功表达；瞬时表达后选择性诱导OAS1、ISG15的表达，并可抑制约38％的痘苗病毒感染CRL2845细胞。结果表明，瞬时表达pIFN—λ1能选择性诱导部分干扰素刺激基因的表达，且具有抗病毒活性，为深入研究猪IFN-λ1在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机理及其应用奠定基础。
- 许汪许汪杜寿文曹婷婷白杰英白杰英田明尧王茂鹏赵飞朱羿龙孙文超刘立明赵翠青李昌
- 关键词：抗病毒活性
