- 多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导分子STAT3磷酸化表达的研究被引量：2
- 2007年
- 目的检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导子和活化子STAT3磷酸化(p-STAT3)水平,并观察瘦素体外对培养卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平的影响,探讨瘦素在PCOS发病机制中的作用。方法选择行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的肥胖型PCOS患者(肥胖PCOS组)、非肥胖型PCOS患者(非肥胖PCOS组)、排卵功能正常和单纯输卵管因素不育的肥胖(肥胖对照组)及正常体重妇女(正常对照组)各15例。采用免疫印迹技术检测卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平。同时将正常人卵巢黄素化颗粒细胞行体外培养,分别加入不同浓度的瘦素(0、10、100、1,000 ng/ml)培养48 h,观察瘦素体外对人卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平的影响。结果(1)肥胖型PCOS组、肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平分别为(24.28±0.51)、(21.31±1.32)、(11.69±0.67)、(9.03±0.20),实验组间比较有显著性差异(P<0.05),其中肥胖型PCOS组p-STAT3表达水平最高,其次依次为肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组。各组之间两两比较,均有显著性差异(P<0.05)。(2)加入瘦素培养48 h后,卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平随瘦素浓度升高而增高,呈浓度依赖性,至瘦素浓度达到100 ng/ml时,p-STAT3水平达到高峰,随后呈下降趋势。结论瘦素通过介导JAK2/STAT3信号途径可能参与了肥胖型PCOS的发病机制。
- 尹婕刘义吕立群王冬花龚成肖维盛慧
- 关键词：多囊卵巢综合征瘦素STAT3颗粒细胞
- 罗格列酮对体外培养的PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素抵抗的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨罗格列酮改善PCOS卵巢局部胰岛素抵抗的作用。方法:收集行IVF-ET治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不孕患者(对照组)促排卵后黄素化颗粒细胞行体外培养,分别用不同浓度罗格列酮(0nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000nmol/L)处理细胞48h,采用RT-PCR和Westernblotting分别检测卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2mRNA的表达及蛋白含量。结果:①基础状态下,PCOS组IRS-1mRNA表达及蛋白含量较对照组显著增加;IRS-2mRNA表达及蛋白含量较对照组显著降低(P<0.05);②不同浓度罗格列酮作用后,PCOS组IRS-1mRNA及蛋白表达显著降低,IRS-2mRNA及蛋白表达显著增加,并呈剂量依赖性,而正常对照组无变化。结论:PCOS患者卵巢局部存在胰岛素抵抗,其原因可能与IRS-1和IRS-2mRNA及蛋白表达异常有关;罗格列酮可通过提高黄素化颗粒细胞IRS-2的表达,降低IRS-1的表达,改善PCOS患者卵巢局部胰岛素抵抗。
- 刘义吕立群王冬花邓小艳尹婕盛慧肖维龚成
- 关键词：黄素化颗粒细胞罗格列酮
- 多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物1、2表达及其酪氨酸磷酸化被引量：2
- 2007年
- 目的检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平,探讨卵巢局部胰岛素抵抗的分子机制。方法收集行体外受精-胚胎移植治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不孕患者(对照组)促排卵后卵巢黄素化颗粒细胞,采用放射免疫法检测血清LH、FSH、睾酮及空腹胰岛素(FINS)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FPG)水平;利用稳态模型(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用RT-PCR、Western印迹及免疫沉淀法分别检测两组卵巢黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2 mRNA、蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化程度。结果(1)PCOS患者血清LH、LH/FSH、睾酮、FINS及HOMA-IR均明显高于对照组(均P<0.05);(2)与对照组比较,PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA、蛋白的表达显著增加(均P<0.05),IRS-2 mRNA、蛋白的表达显著降低(均P<0.05);(3)PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS- 2酪氨酸磷酸化程度均较对照组明显降低(均P<0.05)。结论PCOS患者卵巢局部存在胰岛素抵抗,其原因可能与IRS-1和IRS-2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化异常有关。
- 王冬花刘义邓小艳吕立群盛慧尹婕肖维龚成
- 关键词：多囊卵巢综合征卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物酪氨酸磷酸化
- 黄体生成素对多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物1和2 mRNAs及蛋白质表达的影响
- 2007年
- 目的探讨黄体生成素(LH)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2 mRNAs及蛋白质表达的影响,其及在卵巢局部胰岛素抵抗中的作用。方法收集行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不育患者(对照组)促排卵后黄素化颗粒细胞行体外培养,分别用不同浓度LH(0、20、200、2,000 mIU/ml)处理细胞48 h,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western-blot)检测黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2 mRNAs及蛋白质的表达。结果(1)与对照组比较,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质表达显著增加(P<0.05),IRS-2 mRNA及蛋白质表达显著降低(P<0.05);(2)不同浓度LH作用后,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质的表达显著增加,IRS-2 mRNA及蛋白质的表达变化不明显;对照组则均无显著变化。结论PCOS异常增高的LH可能通过增加黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质的表达参与了患者卵巢局部选择性胰岛素抵抗的发生。
- 王冬花刘义邓小艳吕立群盛慧尹婕肖维龚成
- 关键词：黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物黄体生成激素
- 卵巢癌患者腹水中CD90(+)细胞促进肿瘤细胞腹腔播散被引量：3
- 2015年
- 目的检测卵巢癌患者腹水中的CD90(+)细胞含量,鉴定其对卵巢癌细胞生物学特性和腹腔种植的影响。方法从良性腹水和恶性腹水中成功分离细胞后流式细胞检测其中CD90细胞阳性率,磁珠分选得到CD90(+)细胞后培养得到其分泌上清刺激卵巢癌细胞qRT-PCR及Western blot,比较卵巢癌干细胞相关基因(CD44、CD133、ALDH1、OCT4、Nanog)表达情况;悬浮成球试验观察其分泌上清对卵巢癌细胞悬浮成球能力的影响;免疫缺陷小鼠体内的腹腔种植试验对比CD90(+)细胞对卵巢癌细胞成瘤能力以及腹腔播散的影响。结果良性腹水中可检测少量的CD90(+)细胞,其比例为(2.91±0.52)%,恶性腹水中比例为(22.95±6.24)%;CD90(+)细胞上清刺激SKOV3和CaOV3细胞后表达更高的干细胞基因CD133、CD44、ALDH1、OCT4和Nanog(P<0.01);悬浮成球试验结果示SKOV3细胞中对照组球体数目和球体大小分别是(50±2)个和(215±21)个细胞,CM处理组分别为(115±12)个和(620±54)个细胞;CaOV3细胞中对照组球体数目和球体大小分别是(65±6)个和(112±23)个细胞,CM处理组为(145±12)个和(315±34)个细胞;体内成瘤试验结果示SKOV3细胞组小鼠腹腔种植灶数目是(22±3)个,SKOV3联合CD90(+)细胞组种植灶数目是(46±5)个;总的转移灶重量分别是(1.8±0.4)g和(5.1±0.8)g。结论卵巢癌腹水中高表达CD90(+)细胞,这群细胞可以刺激卵巢癌细胞高表达干细胞基因,具备更强的成球能力,促进卵巢癌细胞腹腔播散,CD90(+)细胞可考虑作为卵巢癌靶向治疗靶点。
- 盛慧陈慧潘丽李丹
- 关键词：卵巢癌腹水CD90
- 细胞外信号调节激酶1/2在瘦素促进子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖中的作用被引量：7
- 2007年
- 背景与目的:流行病学研究提示瘦素与子宫内膜癌的发生有关,但其作用机制尚不清楚。瘦素作为促有丝分裂原,能够显著促进多种细胞的生长增殖。本研究的目的在于探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)在瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖中的作用。方法:免疫荧光染色检测Ishikawa细胞中瘦素受体的表达;于Ishikawa细胞中分别加入不同浓度的瘦素(0、10、50、100、150ng/ml),作用不同时间(6、12、24h),MTT法检测各组细胞的增殖情况;同时应用ERK1/2激酶特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2磷酸化,观察其对瘦素促进Ishikawa细胞增殖的影响;应用免疫印迹技术检测100ng/ml瘦素作用于Ishikawa细胞不同时间后(20、40、60min)ERK1/2的活化水平(以p-ERK1/2与ERK1/2的比值表示)。结果:免疫荧光检测结果证实Ishikawa细胞存在瘦素受体的表达;瘦素能明显促进Ishikawa细胞的增殖,在0～100ng/ml范围内瘦素浓度越高,细胞增殖越显著,100ng/ml瘦素作用24h其增殖效应最大(A值=0.73±0.02),100ng/ml组与150ng/ml组差异无统计学意义(P=0.129);PD98059能明显抑制瘦素对Ishikawa细胞的增殖作用,100ng/ml瘦素和100μmol/LPD98059作用24h后,细胞增殖率为(6.88±0.86)%;Ishikawa细胞经100ng/ml瘦素处理后,ERK1/2活化程度明显增高。结论:瘦素可能通过激活ERK1/2信号转导途径促进子宫内膜癌细胞的增殖。
- 龚成刘义肖维尹婕王冬花盛慧
- 关键词：子宫肿瘤瘦素信号调节激酶ISHIKAWA细胞
- PCOS患者卵巢胰岛素抵抗的发生机理探讨被引量：11
- 2007年
- 目的:探讨胰岛素抵抗/高胰岛素血症在PCOS生殖功能障碍中的作用。方法:收集行IVF-ET治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不孕患者(对照组)促排卵后卵巢黄素化颗粒细胞,行体外培养,分别用不同浓度胰岛素处理细胞48h,采用RT-PCR和Westernblot检测黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2mRNA及蛋白的表达。采用放射免疫法检测血清性激素及空腹血清胰岛素(FIN)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FPG)水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:①PCOS患者血清LH、LH/FSH、T、FIN及HOMA-IR均明显高于对照组(P<0.05);②0mU/ml胰岛素时,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1mRNA及蛋白的表达水平明显高于对照组(P<0.05),而IRS-2mRNA及蛋白的表达水平较对照组明显降低(P<0.05);③10mU/ml胰岛素对二组患者黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2mRNA及蛋白的表达均无影响(P>0.05);④100mU/ml或1000mU/ml胰岛素作用后,二组患者IRS-1mRNA及蛋白的表达水平均明显增高(P<0.05),而IRS-2mRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:PCOS患者胰岛素抵抗/高胰岛素血症通过提高卵巢颗粒细胞IRS-1的表达,降低IRS-2的表达参与患者卵巢生殖功能障碍的发生。
- 王冬花刘义邓小艳吕立群盛慧尹婕肖维龚成
- 关键词：胰岛素
- JAK2/STAT3信号传导通路在瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖中的作用被引量：5
- 2008年
- 目的 探讨JAK2／STAT3信号传导通路在瘦素促进子宫内膜癌细胞（Ishikawa细胞）增殖中的作用。方法 免疫荧光染色法检测瘦素受体（OB-Rb）在Ishikawa细胞的表达。Ishikawa细胞分别用不同浓度的瘦素（0、10、50、100、150ng／ml）作用不同的时间（6、12、24h）后，MTT法检测各组细胞的增殖情况；另应用不同浓度（0、25、50、100umol／L）JAK2激酶特异性抑制剂AG490阻断STAT3磷酸化后，采用MTT法检测瘦素对Ishikawa细胞增殖的影响；瘦素（100ng／ml）作用Ishikawa细胞不同时间（0、20、40、60min）后，采用免疫印迹法（Western blot）检测细胞STAT3磷酸化水平。结果 免疫荧光染色证实Ishikawa细胞膜存在OB-Rb的表达；瘦素能明显促进Ishikawa细胞的增殖，在0～100ng／ml范围内呈剂量依赖性，于150ng／ml瘦素作用24h时细胞增殖效应最大；AG490可明显抑制瘦素对Ishikawa细胞的促增殖作用，呈剂量依赖性；Ishikawa细胞经100ng／ml瘦紊处理后，随时间的延长，STAT3活化程度逐渐增高，至少可持续60min。结论 瘦素可能通过激活JAK2／STAT3信号传导通路促进子宫内膜癌细胞的增殖。
- 肖维刘义龚成尹婕王冬花盛慧
- 关键词：瘦素子宫内膜癌
- 血清AFP、CA19-9、CA72-4、CEA、NSE联合检测在胃癌诊断中的价值被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨血清肿瘤标记物AFP、CA19-9、CA72-4、CEA、NSE联合检测诊断胃恶性肿瘤的临床应用价值.方法:分别检测125例胃恶性肿瘤患者(恶性肿瘤组)、40例胃良性病变患者(良性对照组)及40例健康体检者(健康对照组)的血清AFP、CA19-9、CA72-4、CEA、NSE水平,分析AFP、CA19-9、CA72-4、CEA、NSE在3组人群中的诊断结果,将各单项检测结果与联合诊断结果进行ROC曲线下面积比较.结果:①胃恶性肿瘤组与胃良性病变组比较:除血清NSE外,其他四种血清肿瘤标记物均有统计学意义(P<0.05);胃恶性肿瘤组与健康对照组比较:血清CA19-9和血清CEA含量有统计学意义(P<0.05);胃良性病变组与健康对照组比较:血清CEA含量有统计学意义(P<0.05).②经χ2检验,血清CA19-9、CA72-4和CEA的阳性和阴性检出率有统计学意义,可以认为三种血清肿瘤标记物对胃恶性肿瘤单项检测诊断有帮助.③各单项肿瘤标记物AUC除NSE外均大于0.5,具有统计学意义,联合诊断中敏感性大大提高.结论:应用AFP、CA19-9、CA72-4和CEA四项血清肿瘤标记物联合诊断胃恶性肿瘤,可显著提高血清学诊断胃恶性肿瘤的准确性,为临床医生诊断提供选择.
- 陈慧许畅彭佳欣盛慧盛慧张翼庞艳
- 关键词：肿瘤标记物胃恶性肿瘤
- 罗格列酮对多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物1和2蛋白表达及酪氨酸磷酸化的影响被引量：13
- 2008年
- 目的:研究罗格列酮对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)和IRS-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化的影响。探讨罗格列酮改善PCOS卵巢局部胰岛素抵抗的作用。方法:收集行IVF-ET治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常患输卵管性不孕患者(对照组)促排卵后黄素化颗粒细胞行体外培养,分别用不同浓度罗格列酮(0、1、10、100、1000、10000nmol/L)处理细胞48h,采用RT-PCR、免疫印迹(Western blotting)及免疫沉淀法分别检测卵巢黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2mRNA的表达、蛋白含量及酪氨酸磷酸化水平。结果:(1)与对照比较,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1mRNA表达及蛋白含量显著增加(P<0.05),IRS-2mRNA表达及蛋白含量显著降低(P<0.05),IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平均显著降低(P<0.05,P<0.05);(2)不同浓度罗格列酮作用后,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1mRNA及蛋白表达显著降低,IRS-2mRNA及蛋白表达显著增加,同时IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平也显著增加,而正常对照组黄素化颗粒细胞IRS表达及酪氨酸磷酸化水平无显著变化。结论:PCOS患者卵巢局部存在胰岛素抵抗,其原因可能与IRS-1和IRS-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化异常有关;罗格列酮可以通过调整IRS-1和IRS-2表达失衡,提高IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,改善PCOS患者卵巢局部胰岛素抵抗。
- 刘义王冬花邓小艳吕立群盛慧尹婕肖维龚成
- 关键词：多囊卵巢综合症粒层细胞罗格列酮
