范大为
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 微小隐孢子虫Cp735基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2011年
- 采用PCR方法从微小隐孢子虫基因组中扩增Cp735基因。与pMD-18T载体连接后,挑取阳性重组子测序分析。用基因重组技术将Cp735基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建Cp735基因的重组原核表达载体pET28a-Cp735。将pET28a-Cp735在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果表明:得到了在大肠杆菌中高效表达的重组蛋白,分子质量大小约为26 kD,并且具有反应原性。
- 范大为肖丹张西臣宫鹏涛杨举李建华
- 关键词：微小隐孢子虫克隆原核表达
- 伊氏锥虫与路氏锥虫二重PCR鉴别检测方法的建立
- 2011年
- 目的建立伊氏锥虫和路氏锥虫二重PCR鉴别检测方法。方法根据路氏锥虫18S rRNA基因和伊氏锥虫RoTat 1.2VSG基因特异序列设计两对引物,通过优化PCR反应体系与反应条件,建立种特异二重PCR鉴别检测方法。结果用建立的二重PCR鉴别检测方法能特异扩增路氏锥虫和伊氏锥虫目的片段,大小分别为261bp和482bp;路氏锥虫和伊氏锥虫的最低检出量分别均达1个虫体,检测日本血吸虫、杜氏利氏曼原虫与瑟氏泰勒虫等其他血液寄生虫均为阴性。结论建立的二重PCR检测体系灵敏度高、特异性强,适用于路氏锥虫和伊氏锥虫的感染检测及流行病学调查。
- 王泽东刘畅范大为李巍苏利波宫鹏涛李建华李赫张国才张西臣
- 关键词：伊氏锥虫PCR检测
- 曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的原核表达曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子(IL-4-inducing principle of schistosoma eggs,IPSE),并制备小鼠多克隆抗体。方法人工合成IPSE基因,采用PCR技术克隆其成熟体开放阅读框,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IPSE。转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后,应用组氨酸标签蛋白纯化柱纯化包涵体蛋白,免疫BALB/c鼠,制备多克隆抗体。结果克隆的IPSE基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%;重组表达质粒pET-28a-IPSE经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为16 000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,可与鼠抗His单抗特异性结合;用纯化的包涵体蛋白免疫BALB/c小鼠后,获得的特异性抗血清效价为2×10-4,该血清可与IPSE蛋白发生特异性反应。结论已原核表达、纯化了曼氏血吸虫IPSE蛋白,并制备了高滴度的特异鼠抗血清,为进一步从日本血吸虫中筛选相似蛋白及研究其功能奠定了基础。
- 赵娜李世杰徐晓芳吴威范大为宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词：原核细胞包涵体多克隆抗体
- 乳酸菌和大肠杆菌对微小隐孢子虫感染BALB/c鼠的影响
- 目前，人们着重于研究细菌和肠黏膜上皮细胞相互作用后肠道中抗菌肽表达水平的变化以及寄生虫感染后对肠道正常菌群的影响，而关于细菌对寄生虫感染的影响的报道较少，主要集中在益生菌如罗伊氏乳酸菌、干酪乳酸杆菌及嗜酸性乳酸杆菌对原虫...
- 范大为
- 关键词：保加利亚乳酸杆菌致病性大肠杆菌定植微小隐孢子虫
- 文献传递
