孔娜
- 作品数：25 被引量：46H指数：3
- 供职机构：菏泽学院更多>>
- 发文基金：菏泽学院科研基金山东省科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学政治法律更多>>
- 人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白复性过程中研究的影响因素
- 2009年
- 将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达的包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性。然后按照试验设计,考察不同浓度组成的人工分子伴侣体系对不同浓度鸡IL-18重组蛋白复性率的影响。试验结果表明,利用人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性存在最佳的条件,优化该条件能够提高该融合蛋白的复性率,且产物都具有良好的生物学活性,为鸡IL-18重组蛋白的进一步应用研究奠定了基础。
- 王新华胡敬东孔娜李宏梅赵宏坤
- 关键词：复性
- 医学高职院校学生思政教育存在的不足及对策被引量：2
- 2021年
- 高校是国家后备人才储备库,大学生的思想政治教育工作日益成为全社会关注的焦点。医学高职院校的目标是培养医德高尚、献身医学的医疗工作者,医学高职院校大学生思想政治教育水平的提升尤为重要。本文分别从医学生思想政治教育研究背景、目前存在的问题以及问题产生的原因开展研究,在此基础上,探讨医学高职院校大学生思想政治教育的相应对策。
- 孔胶胶王新华孔娜
- 关键词：医学高职院校思政教育
- 鸡IL-18原核表达蛋白及真核表达质粒对IBD灭活疫苗免疫增强作用的研究
- 将鸡IL-18原核表达蛋白的复性产物和真核表达质粒pcDNA3．1TOPO-mChlL18分别与IBDV灭活疫苗联合应用，通过中和抗体检测和T淋巴细胞对ConA增殖反应试验，研究其对IBDV灭活疫苗的免疫增强作用。结果显...
- 王新华孔娜胡敬东李宏梅赵宏坤
- 关键词：真核表达质粒灭活疫苗免疫增强
- 文献传递
- 山羊IL-18成熟蛋白在昆虫细胞／杆状病毒中的表达及其活性分析被引量：1
- 2011年
- 目的:在昆虫细胞/杆状病毒中表达山羊白介素18(gIL-18)成熟蛋白,并对其生物学活性进行分析。方法:将编码山羊白介素18(gIL-18)成熟蛋白的基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac Dual上,构建重组质粒pFastBac Dual-gIL18,将该重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-gIL18,在Cellfectin作用下,将Bacmid-gIL18转染昆虫细胞sf9,收获感染后不同时间段的细胞,进行SDS-PAGE、Western blot检测和生物学活性分析。结果:重组蛋白获得正确表达具有良好的免疫原性;生物学活性分析表明,重组蛋白能够促进淋巴细胞增殖、诱导淋巴细胞分泌IFN-γ。结论:用昆虫细胞/杆状病毒系统成功表达了gIL-18成熟蛋白,且具有良好的免疫原性和生物学活性,从而为进一步研究gIL-18作为免疫调节剂和免疫佐剂在生产上的应用奠定了基础。
- 王婷婷王希辉范忠玲陈金龙曹丙蕾孔娜胡敬东赵宏坤
- 关键词：杆状病毒昆虫细胞生物学活性
- 金黄色葡萄球菌聚集因子A基因与牛IL-18基因真核共表达载体的构建与表达被引量：1
- 2010年
- 参照聚集因子A(Clumping factor A,ClfA)和牛白介素18(BoIL-18)cDNA序列分别设计引物进行扩增,将ClfA基因和BoIL-18基因分别插入到真核双表达载体pBUDCE4.1的CMV和EF-1α2个启动子的下游,构建携带2个目的基因的重组真核双表达载体pBUDCE/ClfA/BoIL-18。在Cellfectin Reagent的作用下转染293T细胞,用间接免疫荧光试验检测ClfA和BoIl-18蛋白。结果表明,重组质粒pBUDCE/ClfA/BoIL-18在293T细胞中同时表达了ClfA和BoIL-18蛋白。该重组载体的成功构建为研究ClfA和BoIL-18重组共表达产物的生物学活性及其防治奶牛金黄色葡萄球菌性乳腺炎的作用奠定基础。
- 陈智刘少宁曹丙蕾孔娜李宏梅胡敬东赵宏坤
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳腺炎真核表达
- 一种动物疾病预防用疫苗注射装置
- 本实用新型公开了一种动物疾病预防用疫苗注射装置，具体涉及动物医学领域，包括底座，所述底座下表面固定连接有左右对称分布的固定块，所述底座上表面左端位置固定连接有一号固定板，所述一号固定板右表面上端位置固定连接有二号固定板，...
- 王新华孔娜
- O型FMDV VP1基因与山羊IL-18基因在昆虫细胞中的共表达与活性检测
- 2011年
- 以杆状病毒pFastBacTM Dual为载体,将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因和山羊白介素18(gIL-18)基因,分别插入到双表达载体的P10启动子和多角体蛋白启动子PH的下游,构建重组质粒pFastBacTMDual-gIL18-VP1,然后转化DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-gIL18-VP1,并利用昆虫细胞进行转染。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明gIL-18基因和VP1基因同时在同一细胞中独立表达。将共表达产物进行生物学活性分析表明,重组蛋白能够诱导山羊脾淋巴细胞生成IFN-γ抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上生长。本试验用Bac-to-Bac系统成功构建了同时含有gIL-18基因和VP1基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到了高效表达,且具有良好的生物学活性,从而为下一步研究gIL-18在口蹄疫(FMD)中的免疫调节作用奠定了坚实的基础。
- 王婷婷范忠玲王希辉陈金龙曹丙蕾孔娜胡敬东赵宏坤
- 关键词：VP1基因共表达SF9细胞
- Bac-to-Bac系统双表达蛋白IBDV VP2-IL-18免疫原性的研究被引量：2
- 2015年
- 把用Bac-to-Bac系统单表达或双表达的蛋白IL-18、传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2和IBDV VP2-IL-18与IBD疫苗同时腿部肌肉多点注射免疫14日龄SPF鸡,14d后加强免疫1次;免疫前、后均采血检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数量和ELISA抗体效价。二免后第21天用vvIBDV-GX8/99毒株进行攻毒。结果显示,VP2-IL-18、VP2+IL-18、IL-18+IBD疫苗、VP2分别免疫雏鸡后均能促进CD4+、CD8+T淋巴细胞的增殖和抗体水平的增加,能明显增强攻毒保护率,但VP2-IL-18免疫组要优于VP2+IL-18混合免疫组及其他免疫组和对照组,差异显著(P<0.05)。上述结果表明,双表达蛋白VP2-IL-18不仅能够诱导机体产生细胞免疫和体液免疫,而且还可以产生较高保护率,为新型IBD疫苗的研制奠定了基础。
- 孔娜
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2IL-18免疫原性
- 奶牛乳房炎的中西医结合治疗方法研究被引量：11
- 2015年
- 为筛选有效治疗奶牛乳房炎的方法,从奶牛场随机挑出710头奶牛,随机进行分组,试验组(试验Ⅰ—Ⅶ组)每组100头,对照组10头。采用氢氧化钠凝乳检验法、酒精阳性乳检验法对所有奶牛同时进行乳房炎诊断,检测结果阳性者进行治疗。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组采用不同剂量中药治疗,试验Ⅳ组采用西药治疗,试验Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组采用不同剂量中西药结合治疗,Ⅷ组不使用任何药物治疗检测出的患病奶牛,治疗期为14 d。结果显示,中药组治疗时间较长为13 d,其中试验Ⅱ组治愈率最高为92.86%,试验Ⅱ组治愈率比试验Ⅰ组和试验Ⅲ组分别高出30.70个百分点(P<0.01)、0.11个百分点(P>0.05);试验Ⅳ组见效快,治疗时间短,为5 d,但是治愈率低至71.43%;中西药结合治疗组时间短至7 d,且试验Ⅴ组治愈率高达100.00%,治愈率比试验Ⅵ组和试验Ⅶ组分别高出1.29个百分点(P>0.05)和4.23个百分点(P>0.05)。以上结果表明,中西药结合是目前治疗奶牛乳房炎最有效的方法,最佳治疗剂量为中药煎剂50 m L与西药结合。
- 孔娜
- 关键词：奶牛乳房炎中药西药
- 生物制品学教学改革与实践被引量：5
- 2015年
- 生物制品学是生物制药技术专业的重要专业课。本文结合教学改革与实践,阐述了如何提高学生的专业技能、科研素质和课程教学质量。
- 孔娜
- 关键词：生物制品学教学改革师资建设
