胡敬东 作品数:64 被引量:218 H指数:10 供职机构: 山东农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 山东省自然科学基金 山东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
7株鸡传染性支气管炎变异流行病毒的分离鉴定 被引量:5 2020年 为了解2018年生产鸡群中鸡传染性支气管炎病毒(IBV)遗传变异情况,对分离自山东、四川的7株IBV的S1基因进行了克隆、序列测定和分析。结果表明,QX型是目前山东省鸡群中IBV流行的主要基因型;而四川分离株与QX基因型中的BJY株同源性最高,核苷酸同源性为86.6%,氨基酸同源性为85.2%;且7株分离株与常用疫苗株H120、H52、M41、W93、491等同源性普遍较低,变异较大,可能原因是在长期使用活疫苗免疫的背景下,这种免疫选择压造成了生产现场野毒株的主要基因变异。此分子流行病学调查显示的结果对指导临床防疫有一定的参考价值。 尹丹 杨晶 李璐瑶 田家军 唐熠 唐熠 曾帅 胡敬东 刁有祥关键词:鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 鸡白细胞介素18成熟蛋白基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达 被引量:8 2006年 通过PCR方法自含鸡白细胞介素18(Chicken interleukin-18,ChIL-18)成熟蛋白(mature ChIL-18,mChIL-18)基因的克隆质粒中扩增mChIL-18基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中。阳性克隆鉴定后,在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了mChIL-18在CEF中的表达。 胡敬东 赵宏坤 崔治中关键词:转染 IFA 脂质体包被鸡IL-18可增强新城疫活疫苗的免疫效果 被引量:2 2012年 首次将重组鸡白细胞介素18(mChIL-18)用脂质体包被,将不同浓度的mChIL-18脂质体联合新城疫疫苗对鸡群进行免疫,观察其对新城疫疫苗的免疫增强作用。1日龄SPF鸡分为6组,分别为空白对照组、单纯疫苗组、新城疫疫苗+0.2mL mChIL-18组、新城疫疫苗+0.1mL mChIL-18组、新城疫疫苗+0.3mL mChIL-18组和新城疫疫苗+空载体对照组。所有免疫组鸡于7日龄免疫,免疫后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用血凝抑制试验和流式细胞仪来检测免疫鸡的HI抗体水平及CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化情况。并于最后一次采血后,对各组试验鸡应用F48E9标准强毒进行攻击(100ELD50.只-1)。结果表明mChIL-18脂质体的最佳剂量为0.2mL.只-1,其不仅能够显著增强机体的细胞免疫和体液免疫,而且还可以明显提高新城疫疫苗的保护率。 张海滨 周明东 周霞 胡敬东 赵宏坤关键词:脂质体 新城疫疫苗 免疫增强 三种PCR方法诊断猪伪狂犬病的比较研究 被引量:13 2003年 针对伪狂犬病毒gD基因的不同片段设计三对引物 ,分别进行PCR扩增用于猪伪狂犬病的诊断 ,扩增的三个片段的长度分别为 2 62bp、2 1 7pb以及 1 2 0 3bp的全基因。通过比较发现 ,这三种PCR诊断方法均具有很高的特异性和敏感性 ,但扩增gD基因内部 2 62bp的PCR诊断方法种具有突出优点 ,其退火与延伸合成一步 ,其操作可于 1h内完成 ,敏感性更高 ,更适于猪伪狂犬病的快速诊断。 范伟兴 刘文强 胡敬东 赵宏坤关键词:PRV PCR 糖蛋白D 人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白复性过程中研究的影响因素 2009年 将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达的包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性。然后按照试验设计,考察不同浓度组成的人工分子伴侣体系对不同浓度鸡IL-18重组蛋白复性率的影响。试验结果表明,利用人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性存在最佳的条件,优化该条件能够提高该融合蛋白的复性率,且产物都具有良好的生物学活性,为鸡IL-18重组蛋白的进一步应用研究奠定了基础。 王新华 胡敬东 孔娜 李宏梅 赵宏坤关键词:复性 鸭坦布苏病毒非结构蛋白NS1与鸭胚成纤维细胞蛋白互作的研究 [目的]筛选鸭胚成纤维细胞(DEF)中与鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS1蛋白可能发生相互作用的蛋白质,为阐述坦布苏病毒的的致病机制,提出新的疾病防控思路提供理论依据[方法]设计带有BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点的引物... 王振忠 程冰花 陈浩 刁有祥 胡敬东关键词:NS1基因 重组质粒 酵母双杂交 鸡白细胞介素18双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用 被引量:1 2014年 应用识别不同表位的鸡白细胞介素18成熟蛋白(Mature chicken interleukin-18,mChIL-18)的2株单克隆抗体(mAb)1G9和2E6,建立检测mChIL-18的双抗体夹心ELISA,并利用此方法对禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)人工感染SPF鸡体内mChIL-18的分泌水平进行检测。结果显示,捕获抗体的最佳质量浓度为8mg/L,检测抗体的工作效价为1∶800,待检样品的最佳稀释度为1∶400,检测敏感度可达31.5ng/L,与其他细胞因子等抗原蛋白无交叉反应;跟对照组相比,REV感染鸡体内mChIL-18的表达量在7、14、21、28、35、42、49d均呈现升高,但只有14日龄时表现差异显著(P<0.05)。结果表明,本试验成功建立了ChIL-18的双抗体夹心ELISA,为鸡传染病的细胞免疫学研究提供了可靠方法。 王肖祎 苏倩倩 李恩扩 胡敬东关键词:单克隆抗体 双抗体夹心ELISA 禽流感病毒LAMP快速诊断方法的建立 被引量:5 2014年 参考禽流感病毒(AIV)基质蛋白(M)基因设计了两对引物,特异性识别其6个不同位点,建立了基于颜色判定的环介导等温扩增反应(LAMP)方法。试验对不同禽源病毒进行了测试,结果发现该方法仅特异性地检出禽流感病毒(H9和H5亚型)核酸,对AIV病毒的检测极限为10 EID50。人工感染病料检测结果与鸡胚病毒分离法的符合率为96.7%。数据表明,建立的LAMP方法特异、敏感、简便,在禽流感的诊断中具有很大的临床应用潜力。 王辰雨 胡敬东 史玉颖 宋敏训 张鹤晓关键词:禽流感病毒 白细胞介素18及其生物活性 本文介绍了白细胞介素18的结构特点、生产、分布以及生物活性等.白细胞介素18的作用机理,以及与其它细胞因子的相互作用机制有待于进一步研究. 刘文强 隋兆峰 胡敬东 赵宏坤关键词:白细胞介素18 生物活性 细胞因子 抗肿瘤作用 文献传递 1株鸭源棒状杆菌的分离及鉴定 被引量:2 2017年 从四川某鸭场发病种鸭的肝脏组织中分离到1株革兰阳性杆菌,通过形态特征、培养特性、生化特性进行鉴定,并进行药敏试验,应用通用引物对其16S r RNA基因进行克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在血琼脂平板生长良好,能发酵部分糖类。系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S r RNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在87.1%~98.9%之间,分离菌鉴定为棒状杆菌。 王振忠 牛晓宇 于相龙 杨晶 张敏敏 张媛媛 刁有祥 胡敬东关键词:棒状杆菌 RRNA 同源性分析