孙宏勇
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 感染兔出血症病毒兔肝组织蛋白表达差异研究
- 提取感染组和对照组的兔肝脏总蛋白，采用双向凝胶电泳技术比较分析差异表达蛋白;经MALDI-TOF-TOF质谱分析，搜索蛋白质数据库，获得差异蛋白质的信息。经过初步筛选和质谱分析，共获得60个具有统计学意义的表达差异蛋白点...
- 李茂中刘家森王泽祥孙宏勇郭东春姜骞林欢曲连东
- 关键词：兔出血症病毒肝组织蛋白表达双向凝胶电泳
- 文献传递
- 兔铁蛋白重链与兔出血症病毒相互作用的研究
- 兔出血症病毒(RHDV)属于兔病毒属嵌杯病毒科，能引起成年兔的一种急性、败血性、高度接触性传染病，即兔出血症(RHD)。RHD爆发首次报道是在1984年中国江苏省，随后该病毒在世界各地流行，目前许多国家存在该流行病。由于...
- 孙宏勇
- 关键词：兔出血症病毒VP60相互作用
- 文献传递
- 兔视黄醇结合蛋白4基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2013年
- 为表达兔视黄醇结合蛋白4(rRBP4),提取兔肝脏组织总RNA,采用RT-PCR技术扩增了rRBP4的基因,大小为606bp。将其克隆于原核表达载体pET-32a(+)获得表达重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21(DE3)Plyss中进行表达,pET-32a-rRBP4以包涵体形式表达,包涵体经过洗涤、变性后,用镍离子亲和层析柱纯化,并利用尿素梯度透析法复性。SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子质量一致的特异性目的蛋白;Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应。
- 王泽祥孙宏勇郭东春单丽玲原冬伟刘家森曲连东
- 关键词：原核表达肝细胞
- ELISA验证兔铁蛋白重链与RHDV VP60相互作用
- 2013年
- 为验证本实验室前期实验中初步鉴定的兔铁蛋白重链(FTH)与兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)具有相互作用关系,本研究采用RT-PCR技术从兔肝脏扩增编码FTH基因,并将其克隆至pET-32a(+)中转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。重组FTH蛋白(rFTH)经IPTG诱导获得表达,采用Ni-NTA Agarose纯化rFTH。利用纯化的VP60作为ELISA包被抗原检测FTH与VP60的相互作用。结果表明,ELISA检测的OD490nm值与FTH蛋白量呈正相关。本研究进一步验证了FTH与VP60具有相互作用关系。
- 孙宏勇刘家森王泽祥陈淑慧单丽玲郭冬春姜骞林欢曲连东
- 关键词：兔出血症病毒VP60ELISA
