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抗菌肽Thanatin与Polh的原核融合表达及其真核表达研究: 抗菌肽Thanatin是一个含有21个氨基酸残基的线性多肽，首次被发现存在于昆虫椿（Podisus maculiventris）中，与蛙（frog）皮肤抗菌肽brevinin家族有很高的序列同源性。其有一个位于C末端的二...; 王成林; 关键词：杆状病毒表达系统; 文献传递

抗菌肽Thanatin基因与多角体蛋白Polyhedrin基因的融合表达及产物的抑菌活性分析被引量：1: 2011年; 为利用大肠杆菌表达系统高效表达抗菌肽Thanatin并避免其抗菌活性对宿主菌的影响,将抗菌肽Thanatin基因与家蚕核型多角体病毒多角体蛋白Polyhedrin基因融合克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-Thanatin-polyhedrin,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE检测显示经诱导表达的菌体中有与融合蛋白理论值(35 kD)相符的目的条带。凝胶扫描分析目的融合蛋白以包涵体的形式表达,且诱导后6 h融合蛋白的表达量最大,约占菌体总蛋白量的30%。纯化融合蛋白用盐酸羟胺切割后初步纯化获得具有抗菌活性的Thanatin蛋白。研究结果表明家蚕核型多角体病毒多角体蛋白能够作为抗菌肽Thanatin融合标签介导其高水平表达,有助于利用基因工程技术大规模生产抗菌肽Thanatin。; 王成林李昕琦凌琳徐家萍; 关键词：抗菌肽 THANATIN 家蚕核型多角体病毒多角体蛋白抗菌活性

多功能抗菌肽及其分子改造的研究进展: 抗菌肽是生物体内产生的一种参与机体防御的多肽,广泛存在于自然界从低等细菌到高等动物人等各种生物中。具有抗革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、抗病毒、抗原虫、抗肿瘤以及参与脊椎动物免疫调节等多种功能,在农业和医药领域拥有...; 徐家萍王成林杨莹尤征英; 关键词：抗菌肽分子改造; 文献传递

利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法: 本发明公开了一种利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法。步骤包括：将BmCecB2基因及polh基因分别克隆到启动子表达载体以构建重组双启动子表达载体；将重组双启动子表达载体转化到DH1...; 徐家萍李昕琦杜畅王文兵高娟王成林; 文献传递

多功能抗菌肽及其分子改造的研究进展: 抗菌肽是生物体内产生的一种参与机体防御的多肽,广泛存在于自然界从低等细菌到高等动物人等各种生物中。具有抗革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、抗病毒、抗原虫、抗肿瘤以及参与脊椎动物免疫调节等多种功能,在农业和医药领域拥有...; 徐家萍王成林杨莹尤征英; 关键词：抗菌肽分子改造

家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析被引量：3: 2011年; 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。; 杨莹王成林徐家萍尤征英凌琳周敬波; 关键词：家蚕果蝇抗菌肽 CECROPIN 原核表达基因结构

自僵菌封闭式工业化固体发酵工艺: 李增智樊美珍李农昌黄勃王成林黄长春等; 中国的白僵菌生产和防治害虫应用规模世界第一，但在生产上30年来长期沿用作坊式的开放式发酵工艺，不仅质量不稳、易受杂菌污染产品干燥困难、生产周期长，而且规模小，劳动效率低，难以实现产业化生产。“六五”“七五”和“八五”期间...; 关键词：; 关键词：白僵菌固体发酵细菌杀虫剂

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王成林