凌琳
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗菌肽Thanatin基因与多角体蛋白Polyhedrin基因的融合表达及产物的抑菌活性分析被引量：1
- 2011年
- 为利用大肠杆菌表达系统高效表达抗菌肽Thanatin并避免其抗菌活性对宿主菌的影响,将抗菌肽Thanatin基因与家蚕核型多角体病毒多角体蛋白Polyhedrin基因融合克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-Thanatin-polyhedrin,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE检测显示经诱导表达的菌体中有与融合蛋白理论值(35 kD)相符的目的条带。凝胶扫描分析目的融合蛋白以包涵体的形式表达,且诱导后6 h融合蛋白的表达量最大,约占菌体总蛋白量的30%。纯化融合蛋白用盐酸羟胺切割后初步纯化获得具有抗菌活性的Thanatin蛋白。研究结果表明家蚕核型多角体病毒多角体蛋白能够作为抗菌肽Thanatin融合标签介导其高水平表达,有助于利用基因工程技术大规模生产抗菌肽Thanatin。
- 王成林李昕琦凌琳徐家萍
- 关键词：抗菌肽THANATIN家蚕核型多角体病毒多角体蛋白抗菌活性
- 桑枝和蚕沙培养基栽培平菇营养成分分析被引量：12
- 2011年
- [目的]用由桑枝和蚕沙组成的培养基培养平菇(Pleurotus ostreatus),并分析平菇的营养成分,研究以桑枝和蚕沙为生产平菇培养基配料时对平菇营养成分的作用效果,探讨最佳的培养基配方。[方法]以11个不同比例的桑枝和蚕沙等基质组成的培养基生产平菇,并测定平菇的含水量、总干重及灰分、总糖、脂肪、蛋白质含量。[结果]桑枝和蚕沙能明显提高平菇总糖和蛋白质含量,且在其余指标上与玉米芯、棉籽和麦麸的效果相仿。[结论]该研究可以为蚕桑资源的高效开发与利用提供参考,为蚕农增收提供科学依据。
- 鲍先巡张彦凌琳杜畅汪益华
- 关键词：桑枝蚕沙培养基平菇
- 安徽省家蚕病原分布及现行品种区域适应性调查研究被引量：1
- 2010年
- 家蚕病的发生和流行存在诸如品种抗性、气候、蚕农饲养习惯和蚕农饲养技术等因素。为系统分析各因素在家蚕病发生和流行规律中的影响概率及区域发生特点,通过对安徽省8个县市的家蚕病原分布、发生情况及对主要家蚕品种在各个地区的饲养情况进行系统的调查分析,结果获得了安徽省主要蚕区的5种病原分布的基本规律以及4个主要现行品种在安徽省不同地区的饲养适应性情况。
- 刘明辉凌琳张虹魏国清林青松尤征英徐家萍
- 关键词：家蚕病原适应性
- 家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析被引量：3
- 2011年
- 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。
- 杨莹王成林徐家萍尤征英凌琳周敬波
- 关键词：家蚕果蝇抗菌肽CECROPIN原核表达基因结构
- 家蚕Bms3a基因真核表达载体的构建及其在家蚕细胞和蚕体中的表达
- 2011年
- Bms3a基因可能在家蚕Bombyx mori抗病或细胞凋亡中有一定的作用。将融合有绿色荧光蛋白的Bins3a基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中获得了pFastBac-IE1-Bms3a-EGFP真核表达载体,利用杆状病毒(Bac-to-Bac)表达系统筛选重组杆状病毒,以重组病毒感染家蚕BmN细胞和五龄幼虫,分别在感染24h和48h检测到有绿色荧光蛋白的表达,Western blot证明表达的融合蛋白在相对分子量约57kD处出现特异条带,与预计的蛋白理论值相符。结果表明BmS3A-EGFP融合蛋白在家蚕细胞BmN及幼虫体中得到高效表达。研究结果为进一步研究BmS3A蛋白的功能奠定了基础。
- 尤征英周武松徐家萍杨莹凌琳王文兵
- 关键词：家蚕真核表达杆状病毒表达系统
