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家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析被引量：3: 2011年; 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。; 杨莹王成林徐家萍尤征英凌琳周敬波; 关键词：家蚕果蝇抗菌肽 CECROPIN 原核表达基因结构

家蚕对BmNPV抗病性与中肠消化酶活性的关系被引量：13: 2009年; 对6个现行家蚕品种中肠消化酶活性与家蚕对BmNPV病毒抗性比较与分析,以期寻找现行家蚕品种消化酶的活性与抗性的关系,为辅助家蚕育种及品种推广奠定基础。以DNS法测定不同品种海藻糖酶活性,以Fo-lion-酚法测定不同品种蛋白酶活性,以及以铜皂法测定脂肪酶活性,同时对不同品种家蚕4龄起蚕经口添加BmN-PV病毒进行抗性调查分析。结果表明,蛋白酶、脂肪酶酶活顺序为664×663较低,667×668相对较高,其他品种处于中间层次,对应抗性测定结果的相关分析表明,活性越强抗性越强,呈显著正相关关系;而海藻糖酶的活性与抗性的关系没有较好的相关性。因此,家蚕中肠消化液的蛋白酶、脂肪酶可能与家蚕对BmNPV病毒抗性有关。; 刘震鲍先巡尤征英杨莹徐家萍; 关键词：家蚕海藻糖酶核型多角体病毒抗病性

家蚕和果蝇的抗菌肽Cecropin B基因的表达及产物抑菌活性分析: 抗菌肽Cecropin B是一种线性多肽，分子量约为4kD，在疏水环境中易形成两亲性/(Amphipathic/)α-螺旋，具有热稳定性，水溶性好。Cecropin B具有抗细菌、抗真菌等作用，近年来发现还有抗肿瘤及抗艾...; 杨莹; 关键词：家蚕果蝇杆状病毒表达系统基因结构; 文献传递网络资源链接

多功能抗菌肽及其分子改造的研究进展: 抗菌肽是生物体内产生的一种参与机体防御的多肽,广泛存在于自然界从低等细菌到高等动物人等各种生物中。具有抗革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、抗病毒、抗原虫、抗肿瘤以及参与脊椎动物免疫调节等多种功能,在农业和医药领域拥有...; 徐家萍王成林杨莹尤征英; 关键词：抗菌肽分子改造; 文献传递

家蚕Bms3a基因真核表达载体的构建及其在家蚕细胞和蚕体中的表达: <正>目的构建EGFP为报告基因的pFastBac-IE1-Bms3a-EGFP真核表达载体,分析其在家蚕细胞和家蚕中的表达。方法利用杆状病毒表达系统构建Bms3a重组病毒,感染家蚕细胞及注射家蚕幼虫,在荧光显微镜下观察...; 周武松尤征英杨莹王文兵徐家萍

多功能抗菌肽及其分子改造的研究进展: 抗菌肽是生物体内产生的一种参与机体防御的多肽,广泛存在于自然界从低等细菌到高等动物人等各种生物中。具有抗革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、抗病毒、抗原虫、抗肿瘤以及参与脊椎动物免疫调节等多种功能,在农业和医药领域拥有...; 徐家萍王成林杨莹尤征英; 关键词：抗菌肽分子改造

家蚕Bms3a基因真核表达载体的构建及其在家蚕细胞和蚕体中的表达: 2011年; Bms3a基因可能在家蚕Bombyx mori抗病或细胞凋亡中有一定的作用。将融合有绿色荧光蛋白的Bins3a基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中获得了pFastBac-IE1-Bms3a-EGFP真核表达载体,利用杆状病毒(Bac-to-Bac)表达系统筛选重组杆状病毒,以重组病毒感染家蚕BmN细胞和五龄幼虫,分别在感染24h和48h检测到有绿色荧光蛋白的表达,Western blot证明表达的融合蛋白在相对分子量约57kD处出现特异条带,与预计的蛋白理论值相符。结果表明BmS3A-EGFP融合蛋白在家蚕细胞BmN及幼虫体中得到高效表达。研究结果为进一步研究BmS3A蛋白的功能奠定了基础。; 尤征英周武松徐家萍杨莹凌琳王文兵; 关键词：家蚕真核表达杆状病毒表达系统

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杨莹