张晓
- 作品数：9 被引量：34H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 采用噬菌体展示技术筛选玉米赤霉醇的单链抗体被引量：2
- 2009年
- 目的从噬菌体单链抗体库中筛选玉米赤霉醇(ZER)的阳性克隆。方法人工抗原ZER-BSA作为包被原,采用负筛选,经过连续3轮固相"亲和-洗脱-富集"筛选,富集了噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,同时采用Trypsin和ZER竞争洗脱2种洗脱方法。ELISA鉴定阳性克隆,运用SDS-PAGE方法对大肠杆菌分泌蛋白进行了时间条件的摸索。结果随着淘洗轮数的增加,特异性噬菌体抗体得到了高度富集,从6个96孔板的克隆中筛选到10株阳性克隆(阳性大于阴性3倍视为阳性克隆),将菌株转换成功的5株测序发现有4株不同的阳性克隆,对一株进行了原核系统的表达,SDS-PAGE确定了目的条带的存在,相对分子质量为Mr28000。结论为在天然噬菌体抗体库中制备玉米赤霉醇的抗体奠定了基础。
- 张晴晴张晓程罗根刘媛唐敏刘贤进
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体玉米赤霉醇
- 一种噬菌体抗体库及其在农药残留免疫测定中的应用
- 本发明涉及一种噬菌体抗体库，是在pCANTAB5E载体的SfiI和NotI酶切位点间组装ScFv基因片段，其特征在于：所述的ScFv基因片段可以与十六元大环内酯类农药的抗原亲和富集，形成可溶性单链抗体，并将其应用于农药残...
- 刘贤金张晓刘媛余向阳
- 文献传递
- 伊维菌素的单链抗体hsIVM8及其制备方法、其在免疫学检测的应用
- 本发明涉及抗体，具体涉及一种伊维菌素的单链抗体hsIVM8及其制备方法、在免疫学检测的应用；本发明为以伊维菌素-牛血清白蛋白结合物为包被抗原包被免疫管，通过固相抗原筛选法从人源噬菌体抗体库Tomlinson J中筛选展示...
- 刘贤进温爽张晓刘媛
- 文献传递
- 米尔比霉素肟化物ScFv噬菌体展示抗体库的构建被引量：3
- 2008年
- 目的构建具16元大环内酯共性结构小分子物质的特异性抗体库。方法免疫原MILO-BSA免疫小鼠后从脾细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增得到全套抗体重链可变区基因(VH)及轻链可变区基因(VL),SOE-PCR将VH、VL片段拼接扩增得到单链抗体可变区基因片段(ScFv)。将ScFv基因克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化感受态大肠杆菌,辅助噬菌体超感染得到上清液即为噬菌体抗体库。结果RT-PCR扩增出长360bp左右的抗体重链可变区基因(VH)及340bp左右的轻链可变区基因(VL),SOE-PCR扩增得到750bp左右的ScFv基因片段,成功构建了库容量为2.4×106,滴度为2.0×1012pfu/mL的噬菌体单链抗体库。结论构建的抗体库目的片段连接率较高,多样性较好,为下一步16元大环内酯类小分子物质高特异性抗体的筛选奠了基础。
- 张晓张晴晴温爽刘媛刘贤进
- 关键词：单链可变区抗体
- 玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较被引量：7
- 2008年
- 采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测方法。并对建立的直接竞争ELISA(DC-ELISA)与间接竞争ELISA(IC-ELISA)方法在检出限、检测线性范围、检测时间和二抗的使用方面进行了比较。
- 刘媛刘贤进余向阳张存政张晓刘蓉蓉龚振明
- 关键词：玉米赤霉醇
- 抗呕吐毒素DON单链抗体ScFv及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种抗呕吐毒素DON单链抗体ScFv及其制备与应用，属于生物制品领域。本发明从能够分泌抗呕吐毒素DON的单克隆抗体的杂交瘤细胞株McGill078中，通过PCR方法克隆获得该抗体重链和轻链的可变区基因Fab段，...
- 张存政张晓刘贤进刘媛祭芳张强王耘
- 文献传递
- 一种噬菌体抗体库及其在农药残留免疫测定中的应用
- 本发明涉及一种噬菌体抗体库，是在pCANTAB5E载体的SfiI和NotI酶切位点间组装ScFv基因片段，其特征在于：所述的ScFv基因片段可以与十六元大环内酯类农药的抗原亲和富集，形成可溶性单链抗体，并将其应用于农药残...
- 刘贤金张晓刘媛余向阳
- 文献传递
- 动物饲料中玉米赤霉烯酮ELISA检测方法的建立被引量：20
- 2007年
- 为检测动物饲料中玉米赤霉烯酮的含量，建立酯联免疫检测法（ELISA）。结果显示：该方法检测回收率范围为67％～99％，其最低检出限为0．1μg／kg；以建立的ELISA法对随机添加的35个普通动物饲料样本进行分析，并以HPLC法对同一批样品进行检测，两种方法回收率相关系数为0．9561。证明建立的ELISA检测方法适合动物饲料中玉米赤霉烯酮的检测。
- 张晓张晴晴程罗根张心明刘媛刘贤进
- 关键词：玉米赤霉烯酮动物饲料
- 噬菌体展示技术在农药等小分子检测中的应用被引量：2
- 2008年
- 噬菌体展示技术是将外源蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面融合表达,用于筛选和改造功能性多肽的生物技术,具有库容量大,结合特异性强等特点,现已被广泛应用于生命科学的许多领域。本文在系统介绍了噬菌体展示技术及其载体系统发展的基础上,对该技术在农药等小分子化合物免疫检测中的应用进行了综述。
- 张晓刘媛刘贤进程罗根
- 关键词：噬菌体展示技术酶联免疫检测
