沈浩
- 作品数：12 被引量：22H指数：2
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 用于检测大豆拟茎点种腐病菌的LAMP引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了用于检测大豆拟茎点种腐病菌的LAMP引物组合物和应用。大大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引物F...
- 郑小波沈浩王源超张海峰
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- 大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标及其LAMP引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引...
- 郑小波沈浩戴婷婷王源超张海峰
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- 大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标及其LAMP引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向...
- 郑小波沈浩戴婷婷王源超张海峰
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- 一种用于检测大豆拟茎点种腐病菌的特异性LAMP引物组合物及其应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了一种用于检测大豆拟茎点种腐病菌的特异性LAMP引物组合物及其应用。大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正...
- 郑小波沈浩王源超张海峰
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- 大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标及其PCR引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标及其PCR引物组合物和应用。大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标序列Tef，核苷酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，该靶标序列特异性的普通PCR引物组合物，上游引物FP如...
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- 基于环介导等温扩增技术检测橡树疫霉菌被引量：18
- 2013年
- 应用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了基于颜色判定的简单、快速和灵敏的橡树疫霉菌(Phytophthora ramorum)检测方法。以ITS为靶序列对橡树疫霉菌的分子检测存在无法区分近似种的问题,笔者在橡树疫霉菌的基因组研究中,发现了PrA3aPro类转座子序列。生物信息学分析表明,该序列非常适合作为大豆疫霉分子检测的靶标。利用LAMP技术,以PrA3aPro为靶序列,设计LAMP特异性引物,建立LAMP反应体系与条件,并进行灵敏度和特异性试验。结果表明:整个检测过程仅需1 h,即可通过肉眼直接目测试验结果。在等温条件下(64℃)进行核酸扩增反应1 h,然后经3种方法验证扩增结果:1)浊度仪验证浊度变化;2)琼脂糖凝胶电泳验证;3)在扩增前加入染料HNB(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,根据HNB的颜色变化判定。特异性试验中,在橡树疫霉菌株中能够产生浊度曲线,扩增到梯形条带,同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应,而在其他疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象。在灵敏度试验中,PrA3aPro-LAMP技术最低检测限为1 ng.μL-1。该方法的建立为橡树疫霉菌的检疫及其所致病害的快速诊断提供了新的技术。
- 戴婷婷陆辰晨沈浩王源超郑小波
- 关键词：环介导等温扩增
- 大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标及其LAMP引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引...
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- 大豆茎褐腐病菌环介导等温扩增检测技术的建立被引量：2
- 2015年
- [目的]应用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立基于颜色判定的简便、快速和灵敏的大豆茎褐腐病菌[Phialophora gregata f.sp.sojae(PGS)]检测方法。[方法]利用LAMP技术,以ITS为靶序列,设计了4条特异性的LAMP引物和2条环引物,在此基础上建立了检测大豆茎褐腐病菌的LAMP体系。[结果]整个检测过程仅需1 h就可通过肉眼直接目测试验结果。在等温条件下(64℃)进行核酸扩增反应1 h,在扩增前加入染料HNB(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,根据HNB的颜色变化可以判断PGS的存在与否。特异性试验中,大豆茎褐腐病菌菌株DNA扩增后HNB呈天蓝色的阳性反应,而在其他大豆常见病害的供试菌株中均呈紫色的阴性反应。在灵敏度试验中,ITS-LAMP技术最低检测限为10 pg·μL-1,对于进口大豆残体样本中PGS的检测灵敏度为每10 g大豆植株残体50个孢子。[结论]该方法的建立为检疫性病害大豆茎褐腐病菌的检测提供了新的技术平台,符合我国口岸对大豆茎褐腐病菌快速检测的迫切需要。
- 吴旭东陆辰晨沈浩吴翠萍张海峰王源超郑小波
- 关键词：环介导等温扩增ITS
- 大豆茎部病原菌环介导等温扩增技术快速检测的研究
- 大豆南方茎溃疡病菌(Diaporthe phaseolorum var.meridionalis,DPM)、大豆北方茎溃疡病菌(Diaporthe phaseolorum var.caulivora，DPC)和拟茎点种腐...
- 沈浩
- 关键词：溃疡病菌环介导等温扩增口岸检疫
- 文献传递
- 大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标及其LAMP引物组合物和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向...
- 郑小波沈浩戴婷婷王源超张海峰
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