韩斅
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技部农业科技成果转化资金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- VeroE6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定
- 2014年
- 为寻找与猪流行性腹泻病毒（porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV）相互作用的VeroE6细胞蛋白，深入研究病毒感染机制，本试验建立了一个VeroE6细胞酵母杂交cDNA文库。采用Trizol试剂从培养的VeroE6细胞中提取细胞总RNA，通过SMART技术合成双链cDNA，并利用同源重组的方法构建VeroE6细胞的酵母cDNA文库。结果显示，文库滴度为9．7×10^8 CFU／mL，插入的双链cDNA片段大小为0．5～3kb，平均长度约为1．6kb，文库重组率为87％，此文库可以用来筛选与病毒相互作用的VeroE6蛋白。该文库的构建为发现和研究与PEDV结构蛋白相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础。
- 迟延彬石达朱庆贺陈建飞时洪艳张鑫李长龙韩斅刘宁赵鑫冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒VEROCDNA文库SMART技术酵母双杂交
- A群猪轮状病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2014年
- 试验旨在制备A群G11血清型猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)VP7蛋白的单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性。将A群G11血清型PoRVVP7基因克隆至pGEX-6P-1载体,然后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,IPTG诱导表达GST-VP7融合蛋白。分离纯化融合蛋白GST-VP7并免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞并进行有限稀释法克隆化筛选。经3次筛选,最终得到1株能与GST-VP7蛋白反应的特异性、稳定分泌抗体的阳性细胞克隆。Western blotting鉴定结果显示该单克隆抗体具有良好的免疫原性及特异性;MTT法中和试验结果显示其具有中和活性;分泌的单克隆抗体亚型为IgG2b。本试验结果表明A群PoRV VP7蛋白在大肠杆菌中成功表达且制备了单克隆抗体,可用于PoRV VP7蛋白结构和功能的研究,也为猪轮状病毒病的预防、诊断和治疗等研究奠定基础。
- 迟延彬陈建飞时洪艳张鑫石达李长龙韩斅陈洪岩冯力
- 关键词：VP7基因单克隆抗体
- 猪A群轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定
- 轮状病毒是在世界范围内引起五岁以下儿童和幼畜严重腹泻的病原之一,其每年造成大量的人员及经济动物的死亡。在我国因猪轮状病毒(Porcine rotavirus, PoRV)引起的仔猪腹泻,给养猪业造成严重经济损失。本研究克...
- 韩斅
- 关键词：A群轮状病毒单克隆抗体抗原表位
- 文献传递
