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吴婕
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
上海大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
居相春
上海大学系统生物技术研究所
王海烽
上海大学系统生物技术研究所
黄海
上海大学生命科学学院
文铁桥
上海大学系统生物技术研究所
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居相春
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2011
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重组小鼠树突状细胞因子DCF1的原核表达和纯化
被引量:1
2011年
目的:克隆小鼠重组树突状细胞因子DCF1蛋白进行原核表达、纯化与鉴定。方法:采用PCR从小鼠脑cDNA克隆dcf1基因,构建DCF1原核表达重组质粒(pET30a-DCF1)并转化E.coli的BL21(DE3)菌株。IPTG诱导重组蛋白表达,并在变性条件下经Ni sepharose FF6亲和层析柱纯化,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功克隆到大小为972bp的小鼠源dcf1基因片段并准确插入表达载体pET30a,0.1 mmol/L IPTG诱导转化菌2h可表达大量的DCF1蛋白,并可经Ni Sepharose FF6柱亲和层析得到高度纯化。结论:成功获得纯化的42kDa重组小鼠DCF1蛋白,为后续进行DCF1蛋白功能研究奠定了基础。
居相春
王海烽
吴婕
黄海
文铁桥
关键词:
原核表达
蛋白纯化
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