李玲
- 作品数：68 被引量：179H指数：8
- 供职机构：大连医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 人乳头状瘤病毒、EB病毒感染与子宫颈癌关系研究被引量：3
- 2011年
- [目的]探讨人乳头状瘤病毒(HPV)、EB病毒(EBV)在宫颈组织的感染及与宫颈癌发病的关系。[方法]用免疫组织化学染色方法(LSAB)检测50例宫颈癌与20例正常宫颈组织HPV、EBV的表达,并探讨其与临床病理参数的关系。[结果]宫颈癌组织HPV和EBV的阳性表达率分别为44.00%和52.00%,二者均明显高于正常宫颈组织的5.00%和10.00%(P<0.05),HPV和EBV的混合感染率为18.00%(9/50)。HPV阳性表达率未闭经者(56.25%)明显高于闭经者(28.56%)(P<0.05);组织学分化3级(87.50%)明显高于12、级(20.00%4、0.62%)(P<0.05);临床分期Ⅱ期(85.71%)明显高于临床Ⅰ期(26.66%)(P<0.05);有淋巴结转移组(77.77%)明显高于无转移组(23.07%)(P<0.05)。EBV阳性表达率未闭经者(65.62%)明显高于已闭经者(27.78%)(P<0.05);组织学分化1级(90%)明显高于23、级(43.75%、37.50%)(P<0.05);临床分期Ⅰ期(86.66%)明显高于临床Ⅱ期的(28.57%)(P<0.05);无淋巴结转移组(84.61%)明显高于有转移组(44.44%)(P<0.05)。[结论]HPV、EBV在宫颈癌组织有较高的感染率,二者感染可能均与宫颈癌发病相关。
- 李玲张海娜张艳开
- 关键词：子宫颈癌HPVEBV
- 利用GST融合蛋白表达系统表达与纯化人N-Ras蛋白被引量：1
- 2015年
- 目的:克隆人N-ras蛋白全长编码区基因,获得其原核表达产物,并对融合蛋白进行纯化。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增出人N-ras蛋白全长编码区基因,将其克隆到p GEX-KG载体中,在大肠杆菌Rossate中表达后,利用GST-Sepharose 4B亲和珠对原核表达产物进行纯化,SDS-PAGE鉴定表达与纯化产物。结果:从人乳腺文库中扩增获得约600 bp的DNA片段,并克隆至p GEX-KG载体上,经测序与目的序列完全一致;在大肠杆菌Rossate中诱导表达出相对分子质量约47×103的目的蛋白;纯化后,经鉴定获得了纯度较高的重组蛋白GST-N-Ras。结论:获得了重组蛋白GST-N-ras,为后续深入研究Ras基因与其他癌基因、抑癌基因的相互作用奠定了基础。
- 张云静冯滢滢徐小洁梁迎春张立王涛李玲郭靖纪贝贝张蓉叶棋浓
- 关键词：小G蛋白原核表达纯化
- 辐射敏感性启动子调控CD基因表达联合^(125)Ⅰ照射对膀胱癌EJ细胞的杀伤作用被引量：1
- 2011年
- 以脂质体介导的辐射敏感性基因联合胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)基因转染膀胱癌EJ细胞,研究放射性核素125I照射后5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)对转染膀胱癌EJ细胞的杀伤作用。人工合成辐射敏感性启动子E8,将启动子克隆至质粒pCD2的CD基因上游,构建以E8为启动子、CD基因为目的基因的新质粒,并采用DNA测序法测定E8和CD基因的序列;脂质体Lipofectamine2000介导pE8-CD转染膀胱癌EJ细胞,用131I照射(吸收剂量为2Gy)后,蛋白质免疫印迹分析(Western blot)测定CD蛋白表达;在转染EJ细胞中分别加入不同剂量125I和5-FC,四唑盐比色法(MTT法)测定各组细胞存活率,并以未经125I照射组、未加5-FC组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组(阳性对照组)进行对照。DNA测序显示构建的pE8-CD质粒含E8启动子及CD基因序列;Western blot可检测到CD基因表达;125I加5-FC组细胞存活率明显低于未经125I照射组及未加5-FC组,与5-FU组相近。这表明放射性核素与基因治疗联合对肿瘤细胞具有协同杀伤作用。
- 李玲张春丽李囡康磊卢霞张丽闫平王荣福
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶基因放射性核素膀胱癌
- 错配修复基因hMSH2在阿霉素耐药白血病细胞K562中的表达
- 2009年
- [目的]探讨错配修复蛋白hMSH2与白血病耐药发生的关系。[方法]MTT检测K562/ADM细胞耐药倍数,PT-PCR检测K562与K562/ADM的hMSH2基因表达,Western-blot检测二者的hMSH2蛋白表达,免疫细胞化学方法检测正常血有核细胞的hMSH2蛋白表达。[结果]K562/ADM耐药倍数为6.7倍,正常血有核细胞未见hM-SH2蛋白表达,Western-blot显示K562/ADM的hMSH2蛋白表达强于K562。[结论]白血病细胞K562存在hM-SH2基因及其产物的表达;耐药细胞的hMSH2蛋白增多可能与持续阿霉素作用有关。
- 刘渤时妍妍李梅王彦李玲吕申
- 关键词：白血病错配修复耐药
- 人VHL基因真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的抑制被引量：2
- 2014年
- 目的:构建人抑癌基因VHL的真核表达载体,并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人VHL基因,将其克隆到p XJ-40-myc载体中,酶切和测序验证后转染人胚肾293T细胞,通过蛋白免疫印迹鉴定其表达;转染人乳腺癌ZR75-1细胞和肝癌Hep G2细胞,通过CCK8法测定细胞生长曲线。结果:从人乳腺文库中扩增得到约650 bp的DNA片段,并克隆至p XJ-40-myc载体上,且测序与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,蛋白免疫印迹检测到相对分子质量为26×103的目的基因表达产物;细胞生长曲线显示,转染myc-VHL的乳腺癌、肝癌细胞较空载体细胞生长慢。结论:构建了myc-VHL真核表达载体,myc-VHL抑制癌细胞生长,为进一步研究VHL在肿瘤发生发展中的功能奠定了基础。
- 李玲王婷梁迎春张立冯滢滢周丽英冀全博郭靖徐小洁叶棋浓
- 关键词：克隆真核表达肿瘤细胞
- 一种小肽及其应用
- 本发明公开了一种肽及其应用。本发明提供的一种小肽，其氨基酸序列为<Image file="DDA0001185552760000011.GIF" he="57" imgContent="drawing" imgForma...
- 叶棋浓徐小洁李玲梁迎春范忠义
- 文献传递
- 人Six1真核表达载体的构建及应用被引量：3
- 2015年
- Six1（sineoculis homeobox homolog 1,Six1）是一种转录调控因子,属于同源盒基因家族成员,是转录因子E2F1的转录靶基因,激活G1/S期的转录,增加S期转录水平,并通过激活靶基因如细胞周期蛋白A1（cyclin A1）、cyclin D1等,启动靶基因转录,从而抑制与DNA结合能力,最后被蛋白酶水解[1]。当Six1过表达时,这一作用则被削弱,
- 周丽英徐小洁李玲王涛张立范忠义郑志兵叶棋浓
- 关键词：真核表达载体绿色荧光蛋白
- 大鼠全脑缺血对再灌注海马区NO含量和Bcl-2表达的影响被引量：10
- 2009年
- [目的]探讨全脑缺血预处理对再灌注海马区NO含量和Bcl-2表达的影响。[方法]将72只Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血组和脑缺血预处理组。假手术组:仅暴露4条血管。脑缺血组:四动脉阻断法,全脑缺血10 min。脑缺血预处理组:全脑缺血预处理3 min,再灌注24 h后再次全脑缺血10 min。所有动物均于末次脑缺血再灌注后12、24、48和72 h取脑组织海马区,硝酸还原酶法检测NO2./NO3.含量,间接反应NO含量;免疫组化方法测定海马区Bcl-2表达。[结果]与假手术比较,脑缺血组和脑缺血预处理组NO含量明显增加,脑缺血组NO含量在48 h达到高峰,72 h出现回落;脑缺血预处理组NO含量在各时间点的变化趋势不明显,与脑缺血组在48和72 h比较差异性有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。脑缺血组和脑缺血预处理组Bcl-2表达与假手术组比较明显升高;脑缺血组Bcl-2表达24 h达到高峰,48 h开始减少;脑缺血预处理组Bcl-2表达在12 h表达开始增加,48 h达到高峰,72 h开始减少;在48和72 h,脑缺血预处理组Bcl-2表达明显高于脑缺血组(P<0.05,P<0.01)。[结论]脑缺血预处理引起的NO含量增加,可能与Bcl-2上调表达增加及高峰延迟具有一定相关性。
- 吕鹏李玲张丽
- 关键词：全脑缺血脑缺血预处理一氧化氮BCL-2
- 癌细胞原代培养对化疗药物敏感性的探讨被引量：8
- 2008年
- 目的通过对不同抗癌药物敏感性做比较,以期寻找各自的合理化疗用药方案,从而指导不同癌症病人的化疗。方法通过肿瘤细胞体外药敏试验(即四甲基偶氮唑盐着色法,MTT),对161例肿瘤(胃癌28例,肠癌38例,膀胱癌8例,乳腺癌33例,其他肿瘤54例)新鲜瘤组织进行表阿霉素(EADM)、氨甲蝶呤(MTX)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、羟基喜树碱(OPT)、顺铂(DDP)、卡铂(CBP)、环磷酰胺(CTX)、足叶乙甙(VP-16)、β-揽香烯(β-elem ene)11种化疗药物敏感性检测,并对其结果进行比较。结果11种抗癌药对不同的肿瘤类型耐药率不同。结论各种类型肿瘤细胞对化疗药物的选择虽有一定共性,但同种肿瘤的不同个体对同种化疗药物的抑制率差异却存有显著性。肿瘤细胞体外药物敏感性测定对肿瘤病人个体的化疗具有一定价值。
- 刘敏王朝晖李玲
- 关键词：MTT法抗癌药物抑制率
- 核转录因子κB在大鼠肠缺血再灌注肺损伤中的表达及脯氨酸二硫代氨基甲酸酯的保护作用被引量：3
- 2005年
- 目的探讨核转录因子(NF)-κB在肠缺血再灌注(IIR)肺损伤发病机制中的作用,研究脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的保护作用。方法 24只Wistar大鼠随机分成对照组、肠缺血再灌注组及PDTC预处理组。检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮(NO)水平以及肺组织P选择素及NF-κB的组化表达、肺组织NF-κB的Western blot检测。结果 IIR后肺组织出现明显损伤,表现为肺组织水肿、出血和炎性细胞浸润。与对照组相比,血清TNF-α水平明显升高,肺组织NO水平上升和SOD水平下降,P选择素及NF-κB的蛋白表达增强,差异具有统计学意义(P<0．01)。PDTC预处理后肺损伤程度减轻、各项指标明显改善,与IIR组比较差异有统计学意义(P<0．05)并与NF-κB表达相一致。结论 NF-κB参与了IIR 导致肺损伤的过程,PDTC可有效预防这类损伤。
- 田晓峰李英华李玲姚继红冯秉安杨春明
- 关键词：缺血再灌注损伤肠损伤肺损伤核因子ΚB
