林文华
- 作品数：9 被引量：33H指数：4
- 供职机构：广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广东省教育部科技部产学研结合项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 阳春砂果实发育过程中可溶性糖及蔗糖代谢酶活性变化规律的研究被引量：4
- 2014年
- 目的:为研究阳春砂果实发育过程中可溶性糖含量、蔗糖代谢酶活性和基因表达量的动态变化规律,并为提高阳春砂的产量提供依据。方法:本研究以阳春砂幼果期、成熟中期和成熟末期的新鲜果实为试验材料,采用高效液相色谱法、紫外分光光度法对可溶性糖含量和酶活性进行测定,并结合3个发育时期果实的高通量测序表达谱数据,分析糖代谢中3个关键酶基因的表达趋势。结果:果糖、葡萄糖和蔗糖是阳春砂果实中的主要糖分,在果实发育过程中,果皮中的己糖(果糖和葡萄糖)含量逐渐降低,种子团中己糖含量先降低后升高;果皮和种子团中蔗糖含量和蔗糖合成酶净活性(合成方向减去分解方向活性)均逐渐升高。结论:基于RNA-seq的糖代谢中的关键酶基因表达趋势分析表明,蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶基因的表达趋势以先上升后不变为主,转化酶基因的表达趋势以逐渐上升为主。蔗糖合成酶是催化阳春砂果实中蔗糖合成与分解的关键酶,果实成熟末期是蔗糖合成酶活性和蔗糖含量最高的时期。
- 于安民张敏杨锦芬林文华严萍梁锦培詹若挺
- 关键词：阳春砂果实发育可溶性糖
- 两面针商品药材的质量评价被引量：3
- 2015年
- 目的：对市售两面针商品药材进行质量调查和评价。方法：参照2010年版《中国药典》两面针项下方法,对18批两面针商品药材进行性状鉴别、薄层色谱及高效液相法检测氯化两面针碱含量,并建立两面针HPLC指纹图谱方法,结合相似度评价对样品药材进行鉴别分析。结果：样品性状,薄层鉴别和含量测定的结果显示,9批药材有伪品掺杂现象;样品总灰分的含量是2.4%-6.4%,水分含量是7.0%-12.1%,醇溶性浸出物含量是2.2%-8.6%;HPLC测定中有2批样品检测不到氯化两面针碱,11批样品图谱与对照指纹图谱相似度低于0.8;18批药材均不符合2010年版《中国药典》标准。结论：目前市场上的两面针药材品质参差不齐,伪品掺杂现象比较严重。
- 张振山严萍谭志滨林文华童家赟詹若挺
- 关键词：两面针商品药材薄层色谱法高效液相色谱法指纹图谱
- 正交试验法优选防己配方颗粒的提取工艺被引量：5
- 2013年
- 目的:优选防己配方颗粒的提取工艺。方法:采用正交试验法,以出膏率、粉防己碱和防己诺林碱的提取量为评价指标,考察加水量、提取次数和提取时间3个因素,优选出防己配方颗粒的提取工艺。结果:确定防己配方颗粒的最优提取工艺为防己饮片第1次加8倍量水,浸泡0.5 h,煎煮1.5 h,第2次加6倍量水,煎煮1.5 h。结论:该工艺条件提取充分,稳定可行,可为防己配方颗粒的标准化、规范化生产提供一定参考依据。
- 陈娟梁小银林大都严萍林文华詹若挺陈蔚文
- 关键词：防己正交试验粉防己碱防己诺林碱
- 茜草中大叶茜草素、羟基茜草素含量测定方法优化的实验研究被引量：7
- 2014年
- 目的 优化茜草中大叶茜草素、羟基茜草素的HPLC含量测定方法。方法采用LUBEXEcosilC18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-乙腈-0．05％磷酸水（25：50：25），流速1．0mL·min-1检测波长为250nm。结果大叶茜草素和羟基茜草素分别在19．34—161．20μg·mL-1（r=0．9999）和12．16～101．30μg·mL-1（r=0．9999）范围内呈良好线性，平均回收率分别为97．27％（RSD=1．91％）和100．00％（RSD=1．87％）。结论该方法操作简单，重复性好，可作为茜草中大叶茜草素和羟基茜草素的含量测定方法，为合理制定茜草的含测方法提供参考。
- 林文华朱喜梅严萍詹若挺潘华峰刘翠婷张洁
- 关键词：茜草大叶茜草素
- Mincle受体蛋白克隆、原核表达与纯化被引量：3
- 2015年
- 本研究通过应用基因工程技术,构建融合基因pET14b-Mincle的原核表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白Mincle,并对其表达产物进行纯化、鉴定、透析复性。采用RT-PCR技术扩增小鼠Mincle的基因片段,将其克隆于载体pMD18-T中,并克隆到带有His-tag的原核表达载体pET14b中;重组质粒经酶切鉴定、序列比对验证正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达目的蛋白。经1mmol/LIPTG在37℃下诱导5h获得了分子量约为22kDa的重组融合蛋白的优化表达,SDS-PAGE、Western Blot和ELISA证实了重组蛋白的特异性。Mincle以包涵体形式在宿主中表达,利用Ni2+亲和柱进行纯化和生物膜透析复性,纯化和透析后的蛋白经WesternBlot、ELISA法定性鉴别以及用白色念珠菌(SC5314)整个灭活细胞对复性后蛋白的活性测定,透析后的Mincle重组融合蛋白能与白色念珠菌的特异性结合体现其生物活性,表明获得了具有活性的蛋白,为后续研究打下基础。
- 严萍朱喜梅李璐林文华詹若挺唐语谦
- 关键词：基因克隆纯化
- 新胃乃安片的质量标准研究被引量：3
- 2014年
- 目的建立新胃乃安片（黄芪、三七、红参、人工牛黄和珍珠层粉）的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中的黄芪、红参和三七中的多种指标成分进行同时鉴别;采用薄层色谱法对人工牛黄进行鉴别;采用HPLC-ELSD法对方中黄芪的黄芪甲苷进行测定。结果薄层色谱特征明显,在同一薄层板上能同时鉴别黄芪、红参和三七药材;黄芪甲苷在1.539～15.39μg（r=0.999 8）范围内呈良好的线性关系,其平均回收率（n=6）为97.0%（RSD=1.5%）。结论建立的薄层色谱和HPLC定量测定方法简便、重复性好,专属性强,可用于新胃乃安片的质量控制。
- 梁小银林文华严萍苏碧茹詹若挺陈蔚文
- 关键词：黄芪甲苷
- 阳春砂颗粒质量标准研究
- 2013年
- 【目的】建立阳春砂颗粒的质量标准。【方法】采用薄层色谱法对阳春砂颗粒中的香草酸、原儿茶酸和槲皮苷等成分进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对香草酸进行含量测定。【结果】薄层色谱斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;香草酸在0.103～1.645μg(r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系;其平均回收率(N=6)为99.8%(sR=0.7%)。【结论】该方法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可有效控制阳春砂颗粒的质量。
- 梁小银林文华严萍黄金珊詹若挺陈蔚文
- 关键词：阳春砂香草酸原儿茶酸槲皮苷
- 不同来源威灵仙常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量测定被引量：3
- 2013年
- [目的]测定不同来源威灵仙药材中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量。[方法]采用反相高效液相色潽法,色谱条件为:色谱柱为Waters XbridgeTM-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),体积流量为1 ml/min,检测波长为205 nm,柱温为25℃。[结果]计算得常春藤皂苷元的回归方程为Y=7×106X-429 884,R2=0.999 8,齐墩果酸的回归方程为Y=8×106X-94 259,R2=0.999 1,表明常春藤皂苷元在2.008～25.100 ng/ml范围内,齐墩果酸在2.238～22.380 ng/ml浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。不同来源的威灵仙药材齐墩果酸含量基本大于0.3%;来源于两广的威灵仙品种粉灵仙中常春藤皂苷元含量较高,其他来源的威灵仙药材中常春藤皂苷元含量极低。[结论]该方法简单、准确、稳定,可用于威灵仙药材质量评价;不同来源的威灵仙药材在含量上存在较大差异,其中来源于两广的粉灵仙含量较高。
- 李璐林文华严萍詹若挺潘华峰
- 关键词：ET常春藤皂苷元齐墩果酸
- 救必应商品药材的质量评价被引量：5
- 2015年
- 【目的】对市售救必应商品药材进行质量调查和评价。【方法】参照2010年版《中国药典》救必应项下方法,对22批救必应商品药材进行性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱、浸出物测定,及采用高效液相色谱法检测紫丁香苷、长梗冬青苷的含量,综合对商品药材进行质量评价。【结果】综合鉴别、浸出物、含量测定结果显示,22批药材中有2批存在伪品掺杂和1批为次品及混伪品掺杂的现象,另外,12批药材质量较差。【结论】目前市场上的救必应药材品质参差不齐,存在伪品、劣品掺杂现象。
- 欧阳燕琴严萍陈桌俊林文华童家赟詹若挺
- 关键词：显微鉴别高压液相
