严萍
- 作品数：82 被引量：373H指数：10
- 供职机构：广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省粤港关键领域重点突破项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 何首乌的18S rRNA基因序列分析被引量：4
- 2008年
- 为探讨野生和种植品种物种间的亲缘关系并为其鉴别提供分子依据,分析了不同产地野生何首乌Polygonum multiflorumThunb及种植品种和伪品芭蕉的核基因组18S rRNA序列.何首乌的18S rRNA基因序列长度为1 809 bp,且高度保守,在680、1 712和1 724位点存在碱基替代.与何首乌基因序列相比较,伪品芭蕉有71个位点发生碱基置换,在284和1 537位点上分别插入了C和A碱基,而在135和500位点分别缺失了T和A.通过18S rRNA基因序列的同源性分析,基本可以认为野生品种和种植品种基原一致,说明DNA测序技术是一种准确而有效的何首乌分子鉴定方法.
- 严萍焦旭雯庞启华赵树进
- 关键词：分子鉴定何首乌基因
- 茜草醇提物对大鼠肝、肾及结肠的毒性被引量：3
- 2017年
- 目的:观察茜草70%乙醇提取物长期给药对大鼠肝、肾及结肠毒性的影响,为临床合理用药提供一定的依据。方法:在SPF级实验条件下,将48只Wistar大鼠随机分为空白组和茜草高、中、低剂量(30,10,5 g·kg^(-1),分别相当于临床人拟定剂量的36,12,6倍)组,每组12只,雌雄各半。空白组给予等体积蒸馏水,连续灌胃给药60 d。给药期间,观察记录大鼠的一般情况(行为活动,精神状态,饮食量,毛色光泽,大小便颜色);停止给药后,观察动物的血液生化指标、脏器系数及病理组织学变化等。结果:与空白组比较,茜草各剂量组大鼠肝,肾及脾脏器指数明显增大(P<0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平显著升高(P<0.01);雄性大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)和胱抑素C(Cys-C)明显升高(P<0.05,P<0.01),雌性大鼠仅茜草高剂量组β2-MG显著升高(P<0.01),胱抑素C(Cys-C)与空白组比较无统计学差异。茜草各剂量组尿素氮(BUN)与空白组比较无统计学差异,茜草各组肝、肾组织形态与空白组比较没有明显的病理改变。茜草各剂量组雌雄大鼠的结肠组织形态、结肠黑色素染色和结肠上皮细胞凋亡率与空白组比较均无明显变化。结论:茜草70%乙醇提取物长期给药剂量≥5 g·kg^(-1),具有轻微的肝、肾毒性;对结肠无毒性作用,不能导致大鼠结肠黑变病的发生。
- 郑作亮李盛青钟瑜萍詹若挺潘华峰严艳严萍
- 关键词：肝脏毒性肾脏毒性结肠黑变病长期毒性
- 细粒棘球绦虫乳酸脱氢酶B细胞表位的预测及鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的预测及鉴定细粒棘球绦虫乳酸脱氢酶(Echinococcus granulosus lactate dehydrogenase,Eg LDH)的B细胞表位,为研制敏感性和特异性强的棘球蚴病诊断方法奠定基础。方法通过ESPript 3.0在线网站和IEDB软件对Eg LDH的二级结构、β转角、表面可及性、柔韧性、抗原性、亲水性、线性表位等参数进行预测,筛选出具有潜在优势的B细胞表位区域;选取合适的B细胞表位进行体外多肽段合成;通过ELISA方法对合成的B细胞表位进行诊断效能评价,分别检测棘球蚴病患者血清、囊尾蚴病患者血清和健康者血清,评价敏感性、特异性和交叉反应性。用囊液抗原作为对照。结果Eg LDH二级结构中α螺旋占37.16%,β-折叠占9.67%,无规则卷曲占53.17%,存在4个跨膜区。筛选获得7个潜在的B细胞表位区域。体外合成了4个氨基酸长序列的B细胞表位PP-1(215~228)、PP-2(189~200)、PP-4(79~89)和PP-7(21~33),ELISA结果显示,4个B细胞表位PP-1、PP-2、PP-4和PP-7对棘球蚴病患者血清的敏感性分别为52.9%(18/34)、61.8%(21/34)、82.3%(28/34)和50%(17/34),PP-4与PP-1、PP-2和PP-7的敏感性差异有统计学意义(χ~2=8.100、5.143、9.091,均P<0.05),囊液抗原的敏感性为91.1%(31/34),与PP-1、PP-2和PP-7的差异有统计学意义(χ~2=9.600、5.780、10.530,均P<0.05),与PP-4的差异无统计学意义(χ~2=0.444,P>0.05);对健康者血清的特异性分别为100%(21/21)、100%(21/21)、95%(20/21)和95%(20/21),囊液抗原的特异性为95%(20/21),与PP-1、PP-2、PP-4和PP-7的差异无统计学意义;对囊尾蚴病患者血清的交叉反应性分别为:0、1/10、2/10和2/10,囊液抗原的交叉反应性为5/10。结论 EgLDH的B细胞表位PP-4对棘球蚴病患者血清有较强的敏感性和特异性,有望成为潜在的诊断抗原。
- 闫帅严萍莫筱瑾徐斌张颋胡薇詹若挺叶萍
- 关键词：细粒棘球绦虫乳酸脱氢酶B细胞表位诊断抗原
- 何首乌叶绿体matK基因序列分析(英文)被引量：4
- 2007年
- 目的通过DNA序列变异,初步研究何首乌品种的亲缘关系及其与地理分布的相关性。方法采用PCR直接测序技术对来源于何首乌15个居群的17个样品的叶绿体matK基因进行测序分析研究。结果何首乌的matK基因长度均为1271bp,根据排序比较,何首乌17个样品间存在12个变异位点,用UPGMA(不加权的算术平均对群法)法构建的系统分支树将其分成四支。结论matK基因序列可变位点为何首乌品种的归并提供了分子依据,且品种的亲缘关系与地理分布呈良好的相关性。
- 严萍焦旭雯庞启华赵树进
- 关键词：何首乌蓼科MATK基因DNA测序
- 分子酶工程的研究进展
- 随着基因工程和蛋白质工程的发展和应用,酶工程在分子水平上得到了迅猛发展.本文着重介绍了酶基因克隆与异源表达、酶分子的定向改造和进化、融合蛋白与融合酶、酶的人工模拟(抗体酶、分子印迹技术)和端粒酶,综述了分子酶工程的进展、...
- 严萍梁海秋杨辉周河治
- 关键词：分子酶工程基因克隆定向进化端粒酶
- 文献传递
- 黄芪干燥根DNA提取方法的研究被引量：8
- 2010年
- 采用改良的CTAB法、高盐低pH法、SDS法、苯酚法等9种提取液提取黄芪干燥根的基因组DNA,结果表明,CTAB法和高盐低pH法能得到高质量的基因组DNA。用这两种方法提取9批黄芪干燥根,A260/A280值均在1.8～2.0之间,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,降解较少,能有效的从黄芪干药材中提取到高质量的基因组DNA。将DNA以引物5S进行PCR扩增,获得清晰的条带。本研究从富含多糖和次生物质的黄芪干燥根提取高质量的基因组DNA,为今后黄芪遗传多样性、分子鉴定研究奠定基础。
- 刘敏严萍詹若挺徐晖陈蔚文许伟帅
- 关键词：干燥根基因组DNADNA提取方法
- 新胃乃安片中4种异黄酮成分的含量测定及一测多评法的建立被引量：2
- 2019年
- 目的:建立同时测定新胃乃安片中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素等4种异黄酮成分的含量测定方法。方法:采用HPLC外标法测定上述4种异黄酮成分的含量,以毛蕊异黄酮苷为内参物,建立毛蕊异黄酮苷与芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的相对校正因子,通过相对校正因子计算出芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的量,计算结果与外标法实测值进行比较。结果:建立了一测多评同时测定新胃乃安片中4种异黄酮成分的含量测定方法,该方法与外标法测定结果没有明显差异。结论:该研究建立的一测多评法简单方便,可同时测定新胃乃安片中4种异黄酮类成分含量,为建立完善的新胃乃安片质量标准提供参考依据。
- 梁小银严萍詹若挺陈蔚文
- 关键词：毛蕊异黄酮苷
- 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱
- 本发明提供了一种白及HPLC指纹图谱的建立方法，以及由此得到的白及标准指纹图谱。本发明的方案是：（1）供试品溶液的制备，（2）HPLC色谱分析。白及HPLC标准指纹图谱共有色谱峰13个，其保留时间分别为2.024min、...
- 陈蔚文严萍张蕾林文华张敏梁小银李璐詹若挺
- 文献传递
- 何首乌cDNA文库的构建及分析被引量：2
- 2008年
- 目的为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了三年生何首乌叶cDNA文库。方法以何首乌成熟叶片为材料提取其总RNA;纯化出mRNA;反转录合成双链cDNA;钝化cDNA末端;连接上EcoR接头;经Xho酶切后,使用Sepharose CL-2B凝胶介质滤过,收集400bp以上的片段与Uni-ZAP XR载体连接,经包装蛋白包装成cDNA文库。Uni-ZAPXR载体可以在辅助噬菌体ExAssist helper phage的共感染下,快速释放出pBluescript SK-噬菌粒,经转染E.coliSOLR后,铺于氨苄青霉素抗性平板,分别利用PCR和双酶切的方法鉴定插入片段的大小。结果测定该初始文库的滴度为1.07×106pfu/mL,含有5.4×105个重组子,插入片断长度为0.5～2.0kb;扩增文库的重组子为4.25×1011个,重组率为98.5%。结论经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,为进行中药材相关功能基因调控研究奠定基础。
- 谭雪梅申彦晶严萍郑传进赵树进
- 关键词：CDNA文库何首乌次生代谢产物
- 新胃乃安片中4种异黄酮成分的同时鉴别及抗氧化活性的初步筛选被引量：4
- 2018年
- 目的:建立新胃乃安片中芒柄花素、毛蕊异黄酮、芒柄花苷及毛蕊异黄酮苷4种异黄酮成分的同时鉴别方法,并对其抗氧化活性进行初步筛选研究。方法:采用薄层色谱-生物自显影技术,以甲苯-乙酸乙酯-甲醇(20∶20∶9)为展开剂对上述4种成分进行分离鉴别,以清除2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)自由基能力对鉴定成分进行抗氧化活性筛选。结果:薄层色谱特征明显,在同一薄层板上能同时鉴别芒柄花素、毛蕊异黄酮、芒柄花苷及毛蕊异黄酮苷4种成分,其中筛选出毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷具有清除DPPH自由基的活性。结论:建立的方法操作简单,重现性好,可为新胃乃安片的质量控制及药效物质研究奠定基础。
- 梁小银严萍詹若挺陈蔚文
- 关键词：芒柄花素毛蕊异黄酮毛蕊异黄酮苷
