朱江江
- 作品数：33 被引量：95H指数：7
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学交通运输工程更多>>
- 山羊APOE基因克隆及组织细胞表达模式分析
- 2020年
- 旨在克隆山羊载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)基因序列并进行生物信息学分析,明确APOE基因在山羊各组织及分化前后脂肪细胞中的表达模式,利用RT-PCR及3′RACE方法克隆山羊APOE基因序列,利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)方法检测该基因在山羊心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪等13个组织中的表达水平以及在皮下前体脂肪细胞成脂分化过程中的表达变化情况。结果表明,RT-PCR方法获得山羊APOE基因序列970 bp,其中ORF 951 bp,5′UTR 7 bp,3′UTR 12 bp(GenBank登录号:MN049956);3′RACE法获得3′UTR 152 bp(登录号:MN049957);Targetscan和Mirbase预测得知miR-22-3p可能靶标山羊APOE基因;蛋白预测显示山羊APOE编码316个氨基酸,是一个具有信号肽、无跨膜结构域的不稳定酸性蛋白;亚细胞定位结果发现APOE在细胞外、细胞质、液泡、细胞核以及内质网中均发挥生物学作用;进化树显示该基因在各物种的同源性较高,与绵羊、藏羚羊和牛的亲缘关系最近;基因组织表达谱显示山羊APOE在皮下脂肪中的表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01);时序表达结果显示随着皮下前体脂肪细胞分化的进行,APOE基因表达呈上升趋势且在诱导分化60 h时表达量最高。结果为最终进一步揭示APOE基因在脂肪细胞分化、脂肪沉积及脂质代谢中的作用提供了基础理论数据。
- 杜宇王永张亚楠张亚楠许晴许晴
- 关键词：山羊APOE克隆
- miR-106b-5p靶向KLF4调控山羊肌内前体脂肪细胞分化被引量：3
- 2020年
- 旨在明确miR-106b-5p对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响,并确定这种作用是通过靶向KLF4来实现的。本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达模式,通过脂质体转染技术将miR-106b-5p mimic和miR-106b-5p inhibitor转入体外培养的山羊肌内前体脂肪细胞,油红O染色法从形态学验证miR-106b-5p对脂肪细胞中脂滴积聚的影响,qRT-PCR检测预测的靶标基因KLF4和脂肪分化标志基因的表达情况,利用双荧光素酶报告系统鉴定miR-106b-5p与KLF4的靶标关系。qRT-PCR结果显示,miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化第3天时表达量最高。在山羊肌内脂肪细胞中干扰miR-106b-5p后油红O染色显示脂滴聚积减少,过表达miR-106b-5p后脂滴聚积增加。在山羊肌内前体脂肪细胞中转染miR-106b-5p inhibitor后PPARγ表达量显著降低(P<0.05),而KLF4表达量极显著升高(P<0.01);转染miR-106b-5p mimic后LPL和PPARγ表达量极显著升高(P<0.01)。荧光素酶活性试验结果显示,过表达miR-106b-5p可显著抑制KLF4荧光活性。miR-106b-5p通过靶向并负调节KLF4的表达促进山羊肌内脂肪细胞分化。
- 杜宇赵越林亚秋朱江江王永马洁琼谢光杰
- 关键词：山羊KLF4脂肪细胞
- PDK4对山羊肌内脂肪细胞脂代谢的影响被引量：3
- 2021年
- 旨在克隆获得山羊PDK4基因序列,明确其组织细胞表达特性,并明晰其对山羊肌内脂肪细胞脂代谢的作用。构建山羊PDK4过表达和干扰细胞模型,利用RT-PCR、实时荧光定量PCR等研究PDK4对山羊肌内脂肪细胞脂代谢的影响。结果克隆获得山羊PDK4基因序列,长度为1808 bp,定位于线粒体和细胞质。明确了山羊PDK4组织及细胞时序表达模式,发现PDK4高表达于山羊肺脏、臂三头肌和肝脏组织(P<0.01);在诱导分化5 d的山羊肌内脂肪细胞中表达水平极显著高于诱导分化之前的表达水平(P<0.01)。干扰和过表达山羊PDK4分别显著降低和增加了脂质积聚,且干扰PDK4后脂代谢相关基因FABP3、CD36、ACACA、AGPAT6和ADRP表达水平均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低,而过表达PDK4后表达水平极显著升高(P<0.01)。PDK4在山羊各组织及肌内前体脂肪细胞分化各个阶段均存在表达。过表达山羊PDK4促进了脂肪细胞脂滴累积和脂质沉积相关基因表达上调,干扰后呈相反的趋势和表达。
- 张浩张亚楠李鑫李鑫李鑫朱江江王永朱江江
- 关键词：山羊脂代谢
- 山羊CMKLR1基因的克隆、表达及其与肌内脂肪的相关性研究
- 2017年
- 试验旨在克隆山羊CMKLR1基因序列并进行生物信息学分析,研究其表达与肌内脂肪(IMF)沉积的相关性。采集山羊皮下脂肪组织,应用RT-PCR克隆山羊CMKLR1基因序列;以GAPDH(GenBank登录号:AJ431207.1)为内参基因,实时荧光定量PCR检测其在山羊不同组织中的表达量及在肌肉组织中的时序表达谱(以肝脏表达量为基准);测定肌肉组织中的IMF含量,分析其与CMKLR1mRNA表达量的相关性。结果显示,克隆获得了山羊CMKLR1基因,1 089bp的CDS区,GenBank登录号:KT165374。实时荧光定量PCR分析显示,CMKLR1基因在24月龄山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪、背最长肌、股二头肌和臂三头肌中均存在不同程度的表达,其中在肺脏中表达量显著高于其他组织(P<0.05);CMKLR1基因在1~3和24月龄的山羊背最长肌、臂三头肌和股二头肌中表达趋势相同,均是在股二头肌中表达量最高,而8~10月龄则是在臂三头肌中表达量最高。山羊IMF含量以24月龄背最长肌含量最高。山羊背最长肌、股二头肌和臂三头肌中CMKLR1mRNA表达与IMF含量相关性不显著(P>0.05)。CMKLR1基因不参与山羊IMF沉积作用,试验结果为进一步研究CMKLR1基因奠定理论基础。
- 廖红海林亚秋朱江江王永
- 关键词：山羊克隆表达谱
- SRSF10对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响被引量：3
- 2022年
- 旨在克隆山羊SRSF10基因序列,明确其生物学特性,并通过过表达和干扰手段阐明SRSF10对山羊肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以简州大耳羊(Capra hircus)为试验对象,利用RT-PCR技术克隆山羊SRSF10基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术研究其在成脂诱导分化不同阶段细胞中的表达水平;转染pcDNA3.1-SRSF10过表达载体和SRSF10-siRNA至山羊肌内前体脂肪细胞并诱导分化,通过油红O和Bodipy染色法从形态学上明确其对脂滴积聚的影响;通过qPCR方法检测脂肪细胞分化标志基因表达的变化。结果显示,获得山羊SRSF10基因序列为1026 bp,其中CDS区552 bp,共编码183个氨基酸;SRSF10在诱导分化96 h的肌内脂肪细胞中表达量最高;过表达和干扰山羊SRSF10分别促进和抑制了肌内脂肪细胞中的脂滴积聚;过表达后基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα的相对表达量极显著上调(P<0.01),干扰后分化标志基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα相对表达水平极显著降低(P<0.01)。结果表明,山羊SRSF10是肌内脂肪细胞分化的正调控作用因子,并且这种调控作用可能主要通过调节SREBP1、PPARγ和C/EBPα的表达来实现。
- 刘珂含王永李艳艳李艳艳朱江江朱江江朱江江熊燕
- 关键词：山羊基因克隆细胞分化
- 不同冷冻保存时间对肥羔型黑山羊肌肉色差的影响被引量：2
- 2020年
- 为了研究冷冻保存时间对羊肉肉色变化的影响,试验采用CR-410型色差仪对不同性别肥羔型黑山羊的不同部位肌肉肉色进行测定,并利用SPSS统计软件和Excel软件比较色差及其在冷冻保存过程中的变化趋势。结果表明:肥羔型黑山羊母羊不同部位肌肉在-20℃保存12 h后的亮度值(L^*值)、红度值(a^*值)和黄度值(b^*值)较0 h明显增大,24~48 h期间趋于稳定。色度值(H^*值)和色饱和度(C^*值)在保存0~12 h期间变化最为迅速,24~48 h期间H^*值缓慢上升,36~48 h期间C^*值呈现下降趋势;在保存12~48 h后公羊臂三头肌L^*值大于母羊;母羊各部位肌肉在保存不同时间后H^*值大于公羊,在保存36~48 h后各部位肌肉C^*值均大于公羊。说明随着冷冻时间延长,肌肉表面渗水导致肌肉L^*值增大,公羊肌肉较母羊更易渗出水分,空气中氧及肌肉表面微生物代谢物与肌红蛋白结合使得肉色褐变,母羊较公羊褐变更加明显,因此在山羊屠宰后以及运输冷冻保存过程中,都要选择适当保存时间以保证肉色鲜红。
- 黄维王永林亚秋俄木曲者崔胜俞雨阳梁计峻张林朱江江
- 关键词：肉色色差仪冷冻保存褐变
- 藏山羊AQP7基因克隆和不同组织器官差异表达分析被引量：3
- 2019年
- [目的]本研究旨在克隆获得藏山羊AQP7基因序列,并构建组织表达谱。[方法]利用RT-PCR技术克隆藏山羊AQP7基因序列,利用相关生物学软件进行生物信息学分析,同时利用qPCR检测AQP7在藏山羊各组织中的表达差异。[结果]克隆获得藏山羊AQP7基因序列长度为1119 bp,其中CDS区为993 bp,编码330个氨基酸。组织表达谱显示AQP7在藏山羊各组织中均有表达,其中在脂肪和肾脏组织中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01)。[结论]本试验研究结果为藏山羊肌内脂肪研究提供了分子理论基础。
- 张亚楠王永朱江江许晴林亚秋
- 关键词：藏山羊克隆
- 山羊CD36基因表达差异及其与肌内脂肪沉积的关系研究被引量：5
- 2017年
- 为了构建山羊CD36基因的组织表达谱及揭示基因表达与肌内脂肪(IMF)沉积的关系,试验采用荧光定量PCR(q PCR)技术检测CD36基因在山羊不同器官组织和三个发育阶段的不同肌肉组织表达情况,并将基因mRNA表达量与IMF含量进行相关分析。结果表明:CD36基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪和背最长肌等器官组织中均有表达,其中在脂肪组织中表达量最高,在脾脏中次之,而在心脏中表达量最低。CD36基因在1~3月龄、8~10月龄时表达变化趋势相同,在背最长肌、股二头肌和臂三头肌中呈逐渐上升趋势,而24月龄时则呈相反变化趋势。相关性分析表明,肌肉组织中CD36基因mRNA表达量与IMF含量呈正相关,且在臂三头肌中相关性达到显著水平(P<0.05)。说明CD36基因可以作为山羊IMF沉积的候选基因。
- 廖红海钟之旭林亚秋朱江江李倩林森王永
- 关键词：山羊表达谱
- 山羊CPT1A基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析被引量：7
- 2019年
- 旨在获得山羊肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ肝脏亚型CPT1A(Carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)基因序列,分析其生物学特征,阐明其组织及细胞分化时序表达规律,同时揭示CPT1A基因在背最长肌、股二头肌、臂三头肌中与肌内脂肪含量(IMF)的关系。选取7只1周岁健康简州大耳羊为试验动物,屠宰后迅速采集心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、股二头肌、臂三头肌、皮下脂肪和腹间脂肪组织样品,利用TRIzol法提取总RNA。采用RT-PCR法克隆山羊CPT1A基因,进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR技术检测CPT1A基因在不同组织中的表达水平以及CPT1A在山羊前体脂肪细胞分化过程中的时序表达。使用皮尔逊相关系数进行CPT1A基因表达量与IMF含量相关性分析。通过克隆得到CPT1A基因序列(MH345735)为2 380 bp,包含CDS全长2 319 bp,5′UTR 38 bp和3′UTR 23 bp,编码773个氨基酸。组织表达结果显示,CPT1A在简州大耳羊肝脏和肾脏中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01)。细胞时序表达定量结果显示,CPT1A在诱导分化0~5 d逐渐升高,在第5天表达量最高(P<0.01),5~9 d逐渐下降。CPTA基因表达量与IMF含量相关性分析结果显示,CPT1A基因表达量与各肌肉组织肌内脂肪含量均显著正相关。结果表明,CPT1A可能在肌内脂肪沉积过程中具有重要调控作用,为进一步研究CPT1A调控山羊脂质代谢的机理研究提供参考。
- 梁计峻林亚秋俞雨阳王永朱江江
- 关键词：山羊克隆肌内脂肪
- 藏山羊FGF10基因克隆及其组织表达分析被引量：2
- 2017年
- 为了探讨藏山羊成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)基因分子结构特征,并阐明其在藏山羊不同器官组织中的表达情况,试验采用逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RTPCR)克隆该基因,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测FGF10基因在藏山羊各器官组织中的表达情况。结果表明:克隆获得藏山羊FGF10基因序列长度为1 252 bp,包括完整CDS区642 bp(Gen Bank登录号为KX530811),编码213个氨基酸,蛋白质分子质量为23.78 ku,属于疏水性不稳定蛋白,且主要分布于细胞外。与山羊FGF10基因CDS区比对结果显示,藏山羊FGF10基因序列存在一个核苷酸突变位点,并导致该位点缬氨酸(Val)突变为异亮氨酸(Ile)。组织表达结果显示,FGF10 mRNA主要在藏山羊肺脏、脾脏和背最长肌中高表达,而在心脏、肝脏和肾脏器官组织中表达水平较低。
- 李倩林亚秋林亚秋朱江江王永
- 关键词：藏山羊克隆生物信息学分析组织表达谱
