王永
- 作品数：400 被引量：1,652H指数：19
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程经济管理更多>>
- 牦牛胃溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析
- 溶菌酶是动物体内十分重要的非特异性免疫因子,参与多种免疫防护反应,具有杀菌、抗病毒、提高免疫力、减轻炎症等多种功效,有着潜在的研究价值和商业前景,本实验室首次对牦牛胃溶菌酶基因进行了真核表达研究.参照GeneBank中牦...
- 任洪辉王永江明锋骆美蓉张林朱小翌李建波
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
- 四川9个黑山羊品种(群体)微卫星DNA多态性研究被引量：15
- 2006年
- 以10个微卫星标记,PCR扩增,12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sanguinetti银染法显色,对四川建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山、白玉9个黑山羊品种(群体),进行微卫星DNA遗传多态性研究。结果表明,10个微卫星座位在9个黑山羊品种(群体)中均为高度多态座位,建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山和白玉黑山羊的平均PIC、H和Ne分别为:0.735 2/0.773 9/5.017 6、0.724 4/0.763 2/4.483 8、0.750 3/0.782 7/4.878 2、0.770 2/0.800 7/5.286 1、0.740 2/0.777 1/4.576 8、0.746 5/0.784 6/4.855 6、0.751 1/0.788 9/4.959 1、0.760 4/0.790 5/4.886 9和0.697 0/0.741 7/4.272 8。嘉陵与营山黑山羊在D=0.386处聚为1类;自贡与江安黑山羊在D=0.428处聚在一起后,在D=0.456处再与合江黑山羊聚为1类;金堂与乐至黑山羊在D=0.437处聚为1类;白玉与建昌黑山羊在D=0.489处聚为1类。最后4种聚为1大类。
- 王杰陈明华华太才让欧阳熙王永付昌秀周光明
- 关键词：微卫星标记黑山羊
- 山羊DGAT1基因的克隆及对前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用研究被引量：3
- 2022年
- 旨在克隆山羊DGAT1基因序列,明确DGAT1基因在山羊不同组织中的表达模式,并进一步揭示过表达DGAT1基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质代谢的影响。本试验以10月龄健康简州大耳公羊(n=7)为试验动物。采用RT-PCR法克隆山羊DGAT1基因序列,并对序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测DGAT1在山羊不同组织中的相对表达水平;采用双酶切法构建pcDNA3.1-DGAT1真核表达载体并转染至山羊肌内前体脂肪细胞;使用RT-qPCR检测DGAT1过表达效率及脂质代谢相关基因的表达情况;通过油红O染色法观察过表达DGAT1对脂滴形成的影响,利用GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量。结果显示,获得山羊DGAT1基因序列全长1651 bp(GenBank登录号:MT221183),包含5′UTR 125 bp,CDS 1470 bp,3′UTR 56 bp,编码489个氨基酸残基;山羊DGAT1基因在小肠中的表达量最高,在脾中表达量最低;RT-qPCR检测结果显示,DGAT1在细胞中过表达极显著(P<0.01),GPAM基因的相对表达水平显著上调(P<0.05),ADRP和ACOX1基因极显著上调(P<0.01),而AGPAT6基因相对表达水平显著下调(P<0.05),MLYCD和HSL基因极显著下调(P<0.01);油红O染色结果显示,过表达DGAT1后脂滴聚积相较于对照组极显著增多(P<0.01),甘油三酯测定结果显示,过表达DGAT1基因可极显著增加山羊肌内脂肪细胞甘油三酯含量(P<0.01)。本研究成功获得山羊DGAT1基因CDS区序列并构建了pcDNA3.1-DGAT1真核表达载体,过表达DGAT1可显著促进山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积,并显著影响脂质代谢相关基因的表达,这些结果为进一步阐明DGAT1对调控山羊肌内脂肪代谢的作用机制提供了重要数据。
- 杨昌恒李琪李琪黄维林亚秋向华王永
- 关键词：山羊DGAT1过表达甘油三酯
- 山羊GPR35基因表达特性分析及对皮下脂肪细胞分化作用的研究
- 2023年
- 旨在克隆山羊GPR35基因序列,探究其表达特性并初步阐明该基因对山羊皮下前体脂肪细胞分化的影响以及可能的作用机制。本研究以1周岁的健康雄性(n=4)简州大耳羊为试验对象,利用RT-PCR技术(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)克隆山羊GPR35基因完整的蛋白质编码区(sequence coding for amino acids in protein, CDS)序列,并对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测GPR35基因在山羊各组织及不同分化阶段皮下脂肪细胞中的表达情况;随后将GPR35过表达载体(pEGFP-N1-GPR35)及其干扰序列(Si-GPR35)分别转染至山羊皮下前体脂肪细胞中并使用油酸诱导分化,通过油红O和Bodipy染色对其脂滴的变化进行形态学观察并对其甘油三酯含量变化进行检测,最后通过qRT-PCR技术来检测脂肪细胞分化、甘油三酯合成和分解相关标志基因的表达量变化(所有样本均设置3个生物学样本重复和3个技术重复)。结果表明,克隆获得的山羊GPR35基因序列全长为1 167 bp,开放阅读框长906 bp,共编码301个氨基酸残基。GPR35基因在山羊背最长肌中的表达量显著高于其它肌肉组织(P<0.01);在皮下脂肪中的表达量显著高于其它脂肪组织(P<0.01);在脾脏中显著高于山羊的其它内脏组织(P<0.01),此外该基因在诱导分化120 h后的皮下脂肪细胞中表达量最高(P<0.01)。过表达和干扰GPR35后分别抑制和促进皮下脂肪细胞中的脂滴含量和聚集程度,甘油三酯相对含量分别显著下降和上升;过表达该基因后C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ、AP2、SREBP1基因的表达量极显著下调(P<0.01),HSL极显著上调(P<0.01);而干扰该基因后C/EBPα、C/EBPβ、AP2、SREBP1、DGAT1基因的表达量极显著上调(P<0.01),FASN极显著下调(P<0.01)。综合以上结果表明,GPR35基因可能是山羊皮下前体脂肪细胞分化过程中的一个负向的调控因子,这种作用可能�
- 孟秋赤卢光玉陈定双林亚秋王瑞龙钟朝崧王永刘伟刘伟李艳艳李志雄
- 关键词：山羊生物信息学分析细胞分化
- 野牦牛线粒体基因组结构及其系统进化研究
- 野牦牛属高寒地区的特有物种，是我国最珍贵的野生动物遗传资源之一，已被列为国家一级重点保护动物。野牦牛是家牦牛的近缘野生种，在青藏高原恶劣的气候环境下，具有极强的抗寒能力和适应能力，是很好的育种材料，科学研究已证明家、野牦...
- 钟金城柴志欣马志杰王永杨万远拉环
- 关键词：野牦牛线粒体基因组系统进化
- 藏系绵羊KRT26基因的克隆测序和组织表达分析被引量：1
- 2015年
- 为了克隆藏系绵羊KRT26基因序列,并研究其组织表达谱,试验从藏系绵羊皮肤中提取总RNA,用RT-PCR技术克隆KRT26基因,并进行了氨基酸序列测定和荧光定量PCR分析。结果表明:获得了1 407 bp的编码区序列,该序列与绵羊KRT26基因的预测序列仅有1个碱基差异,推导的氨基酸序列相同,与牛、人、小鼠KRT26的氨基酸序列相似性依次为94.44%、79.44%和73.32%。KRT26基因在藏系绵羊的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、脂肪、皮肤中均有不同程度表达,但在皮肤的表达量远远高于其他组织,表现出极高的组织特异性。
- 李彩霞黄林王永付伟任亮林亚秋郑玉才
- 关键词：藏系绵羊基因克隆组织表达谱
- 过表达NR4A1促进山羊皮下脂肪细胞分化被引量：3
- 2021年
- 旨在克隆山羊NR4A1基因的CDS区序列,明确其组织和细胞表达模式,以及探究过表达NR4A1基因对山羊皮下脂肪细胞分化的影响。本试验利用双酶切法构建山羊过表达载体pcDNA3.1-NR4A1。以1周岁简州大耳羊(n=5)为试验动物。利用RT-PCR方法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术克隆NR4A1基因编码区序列并明确其时空表达特性,再将山羊pcDNA3.1-NR4A1载体转染皮下脂肪细胞使NR4A1过表达,利用形态学方法检测过表达后脂滴聚集的变化,同时采用qPCR方法检测脂肪分化标志基因相对表达水平的变化。结果获得山羊NR4A1基因的编码区序列是1797 bp,编码598个氨基酸;NR4A1在山羊各组织中广泛表达,且在山羊背最长肌中的相对表达水平最高(P<0.01),在山羊皮下脂肪细胞分化60 h表达量最高(P<0.01);过表达NR4A1基因显著促进山羊皮下脂肪细胞的脂滴积累,并且显著提高C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ、LPL、SREBP1和AP2的相对表达水平(P<0.05)。NR4A1基因可能是山羊皮下脂肪细胞分化的正调控因子,且可能是协同脂肪分化标志基因的表达量来实现的。
- 崔胜王永朱江江熊燕林亚秋
- 关键词：山羊克隆过表达
- 安哥拉山羊改良本地山羊生产马海毛研究
- 王杰覃志红欧阳熙王同军李一丁庆明王永
- 该项目取得的成果主要应用于引种安哥拉山羊前可行性分析、引种安哥拉山羊、安哥拉山羊改良本地山羊生产马海毛、马海毛山羊饲养管理技术和马海毛产品研制等。技术原理主要有：任何家畜品种是在特定的生态条件下育成的，在引种前根据引进品...
- 关键词：
- 关键词：安哥拉山羊杂交育种饲养管理马海毛
- 川中黑山羊OPN基因cDNA克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2014年
- 以川中黑山羊为研究对象,对OPN基因CDS区进行克隆测序及生物信息学分析,并与GenBank其他物种该基因进行序列比对,结果表明,川中黑山OPN基因全长952 bp,包含1个834 bp的完整的CDS编码区,编码278个氨基酸;OPN的CDS编码区核苷酸序列与绵羊、牛、猪、人、马、小鼠、鸡相应序列的同源性分别为98%、95%、79%、79%、70%、47%。
- 胡亮龙石太吴宪红王永字向东
- 关键词：克隆生物信息学
- 简阳大耳羊的种质特性被引量：4
- 2013年
- 简阳大耳羊是我国在进行肉用山羊新品种培育工作中,继培育出第1个肉用山羊新品种南江黄羊后的又一个具有特点的肉用山羊新品种,它经过引种杂交、级进杂交、横交固定及世代选育等培育过程,历经60余年于2012年培育成功,试验对简阳大耳羊的种质特性进行了综述。结果表明:简阳大耳羊具有体型外貌基本一致、生长速度快、产肉性能优良、肉质好、繁殖性能高、体格大、遗传性能稳定、抗逆性强和适应能力强等特点。
- 熊朝瑞范景胜王永张红平郑水明陈天宝俄木曲者
- 关键词：简阳大耳羊种质特性肉用性能杂交利用
